This study was carried out to establish improved techniques on organogenesis from callus culture of Gladiolus. Organogenesis from the callus was effective in the half strength of MS solid medium without 2,4-D at 15 $^{\circ}C$ under 24 hours of daylength. Formation of adventitious root was most effective in the liquid shaking culture, and adventitious shoot induction was effective in the liquid stationary culture. From these results, we could find optimal culture conditions for redifferentiation from callus, in addition, liquid shaking culture revealed as more useful when compared with that of solid culture method for the redifferentiation of callus in Gladiolus `Topaz'.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.18
no.1
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pp.69-76
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1998
This study was conducted to construct of the transgenic plants wliich are resistant to oxidative stresses including ozone with B. mpestris cytosolic glutathione reductase cDNA using the binary vector system of Agrobacterium tumefaciens. The 1.8kb B. campestris cytosolic GR cDNA was subcloned into the unique Sma I site of the plant transformation vector pBKSI- I, downstream of the constitutive CaMV 35s promoter and upstream of the nos termination sequence, in place of the uidA (GUS) reporter gene. The resulting plant transformation vector, pBKS-GRI, was introduced into A. tumefaciens LBA4404 by two cycles of tkeze-thaw method. The B. nqus cotyledonary petioles were transformed by the Agrubaferium harboring pBKS-GRI. Transformed shoots were induced and selected on regeneration medium supplemented with kanarnycin. The shoot formation was increased remarkably by addition of Ag$NO_3$, in MS media. The transgenic plants were analyzed for the presence of the B. campestris GR gene by Southern blot analysis and it was confirmed that a foregin gene was stably integrated into the genomes of B. nqus plants.
Dry matter production, leaf area growth and total nitrogen changes were studied in Glycine max. soybean communities, which were grown in sandy loam soils controlled to provide various moisture levels, i.e., 5-7%(level 1), 8-10%(level 2), 11-13%(level 3), 14-15%(lev디 4), 17-20%(level 5) and 22-24%(level 6). A summary of the results is shown. The maximum dry matter production of leaves, stems and nodules and the maximum leaf area per unit area were at level 5, but the maximum of root dry matter production was at level 4. Total nitrogen content of the soybean plant decreased with growth, but each level of soil moisture content also showed a little difference. Water content of the plant decreased with plant age and soil water deficiency, especially in roots and nodules. Nodule formation increased in proportion to soil moisture content. total nitrogen content of the soil on which the soybeans grew, increased from 0.23% before sowing to 0.30% at 100 days after sowing. It seems that soil water content acts as a linear factor in the elongation or dry weight increase of shoots and roots until increasing to level 5. Considering the pattern of plant growth through analysis of the shoot and root dry weight ratio, or the photosynthetic organ and non-photosynthetic organ dry weight ratio, the asymptote of plant growth at a high soil water content exceeded that at a low soil water content.
This experiment was conducted to introduce phosphinothricin acetyl -transferase(PAT) gene, resistant to basta and non-selective herbidide, into tobacco(Nicotiana tabacum cv.BY4). For shoot formation,tobacco leaf disks were placed on the MS medium supplemented with 2.0mg/L BA and 0.1mg/L NAA. In this medium condition, tobacco leaf disces were cocultivated with A. tumefaciens MP90 containing NPT IIand PAT resistant to kanamycin and Basta, respectively. Shoots were obtained in the medium containing antibiotics, and those were transferred to rooting medium supplemented with 0.1mg/L NAA and antibiotics. The plants obtaining roots were transplanted into soil. Phenotype of transgenic tobacco plant was mostly as normal plant. However, about 5% was abnormal plant, which did not set seeds. PCR analysis and southern blot were performed to determine transformation. As the results, it was confirmed that PAT gene was stably integrated into tobacco genome.When herbicide, basta, was sprayed to the plants confirmed by PCR, the transgenic plants showed normal growth, whereas normal plants died. Therefore, the result of this experiment show that tobacco transformation for the resistance to basta, non-selective herbicide, was successful because PAT gene was stably integrated into tobacco.
Leaf and stem explants of Sedum erythrostichum Miq. were cultured on MS medium supplemented with various combinations of growth regulators. After two weeks of culture, 100% of the leaf explants formed calli on medium containing 2.0 mg/L 2, 4-D and 1.0 mg/L BA. Callus proliferated when subcultured on medium containing 2.0 mg/L 2, 4-D and 1.0 mg/L BA. Numerous adventitious buds were regenerated from callus cultured on the medium containing 2.0 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA. Root formation from shoot was occurred on the MS basal medium containing 1.0 mg/L IAA.
Lee, Sang Sook;Yoon, Gyeong Mee;Rho, Eun Jung;Moon, Eunpyo;Pai, Hyun-Sook
Molecules and Cells
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v.21
no.1
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pp.141-146
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2006
We previously showed that NtCDPK1, a tobacco calcium-dependent protein kinase, interacts with and phosphorylates the Rpn3 regulatory subunit of the 26S proteasome, and that both NtCDPK1 and Rpn3 are mainly expressed in rapidly proliferating tissues, including shoot and root meristem. In this study, we examined NtCDPK1 expression in roots using GUS expression in transgenic Arabidopsis plants, and investigated its function in root development by generating transgenic tobacco plants carrying a sense NtCDPK1 transgene. GUS activity was first detected in roots two days after sowing. In later stages, strong GUS expression was detected in the root meristem and elongation zone, as well as the initiation sites and branch points of lateral roots. Transgenic tobacco plants in which NtCDPK1 expression was suppressed were smaller, and their root development was abnormal, with reduced lateral root formation and less elongation. These results suggest that NtCDPK1 plays a role in a signaling pathway regulating root development in tobacco.
Bae, Dae-Ho;Park, Whoa-Shig;Hwang, Sung-Jin;Hwang, Baik
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.17
no.3
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pp.192-197
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2009
Camptotheca acuminata, a native of South China is a well known natural source of monoterpene-indole alkaloid camptothecin(CPT), one of the most promising anti-tumoural compounds. This study was conducted to optimize plant growth regulators and culture conditions on plantlets regeneration through organogenesis from callus of Camptotheca acuminta. Callus were induced from various explants of in vitro germinated plantlets of C. acuminta using WPM medium containing 0.2 ㎎/L 2,4-D. Hypocotyl segments were exhibited higher embryogenic callus than the other explants. Shoot buds formation from embryogenic callus was affected by plant growth regulators, pre-treated dark condition and liquid culture. Organogenesis was optimal in WPM liquid medium containing 0.5 ㎎/L BA. The dark pre-treatment for 2 weeks before the solid culture was effective for organogenesis. The regenerated shoots were rooted in WPM medium with 0.2 ㎎/L NAA and successfully acclimated in green-house conditions.
In order to provide basic information for the application of tissue culture to a rice breeding program. experiments were carried out on the callus formation from seedings and anthers and organ differentiation from the callus of rice varieties and their hybrids. It appeared that in general the callus tissue was more easily induced in japonicas than in indicas with significant varietal differences. A highly significant positive correlation (r=0.896$^{**}$) was obtained between the fresh weight of callus induced in NAA medium and in 2, 4-D medium in the same variety. Callus formed on the medium with 2, 4-D was more friable than that formed on the medium with NAA. The callus formation from seedlings was better than from anthers in upland rice varieties. The easiness of the callus formation appeared to be a dominant character in crosses of rice varieties. Varietal difference was also noticed in the organ differentiation from the callus and the root differentiation seemed to be easier than the shoot differentiation. Most of the plants derived from the cal1us were albinos and the frequency of occurrence of albinos was greater in callus of seedlings than in that of anthers. Greater amount of callus tissue was formed from anthers of $F_1$ plants than anyone of their parents in remote-crosses but it was clear in close-crosses. A highly significant positive correlation (r=0.504$^{**}$) was found between the callus formation from seedlings and from anthers.
Calanthe striata f. sieboldii Decne. ex Regel is a terrestrial orchid with beautiful flowers arranged in racemose inflorescences. This species is threatened due to over-collection and loss of suitable habitats. Asymbiotic germination is useful in the conservation efforts to re-establish plants in the wild, and for commercial propagation. In this study, we investigate the effects of sodium hypochlorite (NaOCl), three types of culture media (Phytomax Orchid Maintenance - POM, Seed Germination Maintenance - SGM, and Murashige and Skoog 1962 - MS), and plant growth regulators on embryo swelling, protocorm formation, and embryo diameter of C. striata f. sieboldii. Treatment with 1% NaOCl for 30 min greatly enhanced embryo swelling (28.3%), embryo diameter ($205.8{\mu}m$), and embryo protocorm formation (54.8%) compared to seeds without NaOCl treatment (embryo swelling 8.5%, embryo diameter $14.6{\mu}m$, and protocorm formation 13.4%) on POM medium. Protocorm formation on POM medium supplemented with 1.0 mg/L N6-benzyladenine (BA) (95.6%) was better than the control (54.5%). Additionally, the effects of activated charcoal (AC) and sucrose on seedling growth in in vitro culture were examined. The protocorm converted into healthy plants with well-developed shoot primordia on the POM medium with AC and sucrose. The most suitable conditions for seedling growth after 10 weeks of culture were the POM medium with AC or sucrose. These results show effective asymbiotic seed germination and in vitro seedling growth of C. striata f. sieboldii.
Journal of the Korean Society of Environmental Restoration Technology
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v.5
no.2
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pp.53-62
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2002
The objectives of this study were to understand the tolerance mechanism of woody plants to water stress and tolerance changes in relation to mycorrhizal formation. Lespedeza cyrtobotrya Miq. commonly used for erosion control in slopes were raised from seeds and transplanted to 120 plastic pots. Sixty pots received the top soil of a Fraxinus americana forest, while remaining 60 pots received the autoclaved top soil. The forest soil contained 1,200 spores per 100g of arbuscular endomycorrhizal fungus, mostly Glomus sp. The plants were raised outside with regular supply of water and mineral nutrients. Two kinds of water deficit treatment and a control were started at the middle of July : cyclic water deficit treatment with 3 cycles of sequential water stress at the point of xylem water potential of about -0.6, -0.6, and -1.7 MPa and recovery, and non-cyclic water deficit treatment with single water stress at about -1.5 MPa. The non-stressed plants received plenty of water throughout the period. In late August the plants were harvested for measurements of dry weight, N, P, carbohydrate contents, net photosynthesis and superoxide dismutase(SOD) activities. Both cyclic and non-cyclic water deficit treatments reduced dry weight by 60% and 40%, respectively, and reduced nitrogen absorption, while increased SOD activities. Water-stressed plants also showed increased carbohydrate contents in the leaves and lowered stomatal conductance. Mycorrhizal inoculation resulted in an average of 40% infection of roots and 2-3 times increase in P absorption in water-stressed as well as non-stressed plants. Mycorrhizal formation also increased shoot-root ratio. The results that SOD activities of water-stressed plants with mycorrhizal infection were significantly lower than those of non-mycorrhizal plants suggest the possibility of improvement of water-stressed condition by mycorrhizal formation. It was concluded that endomycorrhizal formation increased tolerance of Lespedeza cyrtobotrya seedlings to water stress.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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