The spinning apparatus and production of secretory silk from silk gland of the black widow spider, Latrodectus mactans were studied with scanning and transmission electron microscopes. The silk glands were located in seven groups on the spinnerets including each pair of major and minor ampullate, 3 pairs of tubuliform, 1 pair of flagelliform, 2 pairs of aggregate, about 50 pairs of pyriform and over 250 pairs of aciniform glands, respect- ively. Each group of silk gland feeds silk into one of the three spinneret pairs. Secretory silk is synthesized from rough endoplasmic reticulum (rER) of glandular epithelial cells. The secretory silk is transported from toe rER into the secretory vacuoles which are grown up by fusion with the surrounding small vesicles including the secretory silk. The secretory vacuoles, which show a gradual increase in electron density with the process of maturity, are formed without involvement of the Golgi complex, suggesting that they do not play an important role in the processing of the secretory silk. The secretory silk products are released by the mechanism of apocrine secretion, losing part of their cytoplasm. Moreover, another type of silk precursor, possibly protein, appears as granular material, and is also discharged to the luminal cavity.
It is well known that the cysteine proteases in excretory-secretory product (ESP) of Paragonimus westermani newly excysted metacercariae (PwNEM) are capable of degrading IgG in vitro. Recent evidence suggests that the IgG-coated surface, such as found on parasites, is one of the most effective physiologic stimuli for granulocyte activation. Therefore, this study was designed to investigate the effect of excretory-secretory product (ESP) of PwNEM on superoxide production of granulocytes stimulated with IgG The 96-well plates were coated with human IgG (0, 10, 30, $100{\;}\mu\textrm{g}/ml$) in the absence or presence of ESP. When granulocytes were incubated in the wells coated with human IgG in the presence of ESP, the level of superoxide production of granulocytes was reduced to about 90% when compared to the cells incubated in the wells coated with IgG alone. This inhibitory effect of the ESP on IgG-induced superoxide production of granulocytes was concentration-dependent. These results suggest that ESP secreted by PwNEM may be important in the control of effector functions of granulocytes stimulated with IgG in human paragonimiasis.
The silk glands of the spiders are of several types. Among the several types of spider's silk glands, the principal fibers used in constructing the eggcase are products of the tubuliform glands (TBG), which are present only in females. Development of these glands parallels maturations of the ovaries and fat bodies. In order to understand the mechanism of eggcase-silk production, this paper has examined the fine structural changes of the TBG during the period of egg maturation in the garden spider, Argiope aurentia. Between the two kinds of secretory granules observed in the glandular epithelium of the mature TBG, the electron-dense granules which have paracrystalline structure are revealed to be the precursors of the eggcase silk fibers. During the production of eggcase, rapid release of the secretory product occurs at apical surface by the mechanism of apocrine secretion. Moreover, secondary lysosomes appear due to the rapid disorganization of cellular components during the eggcase formation. Examinations of formed fibers indicate a multicomponent internal structure, and electron micrographs reveal each fiber contains numerous electron lucent fibrils embedded in an amorphous electron dense matrix. The secretory precursors are produced as separated vesicles via well-oriented rER, and no Golgi complex has been found in the glandular epithelial cells.
Bacterial components and their derivatives have been reported to mediate various immunomodulating activities and to activate immune cells including macrophage. In this study, the secretory and cellular macrophage response to teichoicated fragments (TFs) from pneumococcal cell wall subcomponent were examined. Tumoricidal activity was measured by MTT assay and secretory molecules were assessed by biological assay. After stimulation of macrophages with various doses of TFs for 18hrs, secretion of TNF-$\alpha$, nitrite and $H_2O$$_2$ were significantly increased as compared to medium-treated control. In addition, tumorcidal activity of TFs-treated macrophages was enhanced, whereas production of IL-1 and IL-6, and phagocytic activity were not induced. These data suggest that TFs is a potent inducer of macrophage secretory and cellular activities.
Capsular polysaccharides (CPs) from Streeptococcus pneumoniae were examined for the ability to induce secretory responses in a pure population of peritoneal macrophages. The highly purified CPs were able to affect the macrophage, ie, secretion of tumor necrosis factor-alpha (TNF-$\alpha$) and nitrite. As after stimulation with CPs, secretion of TNF-u induced by these CPs reached its maximum within the first few hours of the interaction, while secretion of nitrite was increased with time. In addition, production of TNF-$\alpha$ and nitrite was increased in a dose-dependent manner. In the presence of indomethacin, CP-stimulated TNF-$\alpha$ production was not altered. In contrast, LPS with indomethacin stimulated 24.5% more TNF-$\alpha$ than LPS alone, suggesting that the intracellular signaling processes for TNF production are differentially stimulated by CP and LPS. The results demonstrate that CPs are potent inducer of macrophage secretory activities.
검은과부거미의 독 분비장치는 두흉부에 있는 가위턱과 한쌍의 독선으로 이루어져 있다. 독선은 한겹의 얇은 장막과 횡문근 섬유의 다발에 의해 둘러싸여 있었고. 근육층을 따라서 운동신경의 축삭 돌기와 근섬유 사이에 신경근육간 연접이 형성되어 있었다. 분비상피를 이루는 단층 원주상피세포에는 복잡한 수지상의 돌기가 형성되었고, 독선 전체가 단포상선을 이루고 있음이 관찰되었다. 상피의 분비면은 기저막으로부터 선의 내강쪽으로 확장된 세포질 돌기에 의해 표면적이 현저히 증가되었고, 상피의 내강면에는 조밀한 미세융모가 형성되어 있었다. 독성 분비물은 상피세포 내에서 두 종류의 분비과립으로부터 생성되었다. 분비기동안 이들 분비과립은 과적의 형태로 변형, 농축된 후, 이출분비의 형태로 내강으로 방출되었다. 방출 후의 기저부 상피세포들은 고도의 증식과정을 거쳐 원주상의 상피세포로 재생됨이 확인되었다.
In this experiment, oocytes were collected from goat ovaries available in slaughterhouse by follicle puncture method. Morphologically culturable type of oocytes which having compact, multilayered cumulus granulosa cell complex and evenly granulated cytoplasm, was separated under a stereozoom microscope. Oocytes were washed thoroughly in maturation medium containing TCM-199, $1{\mu}g/ml$ estradiol-$17{\beta}$, 0.5 ${\mu}g/ml$ FSH, $100{\mu}g/ml$ LH, 3 mg/ml BSA and 10% estrus goat serum. Washed oocytes were cultured into maturation medium on granulosa cell monolayer. Culture plate was then kept into $CO_2$ incubator at $38{\pm}1^{\circ}C$, maximum humidity and 5% $CO_2$ for 18 h. After maturation the oocytes were washed thoroughly with maturation medium containing polyvinyl alcohol (PVA) without serum and BSA and further cultured for 12 h for secretory proteins of oocytes. PVA medium was collected, pooled and concentrated by 5000 cut off centrisart. Secretory proteins were separated on 12.5% SDS-PAGE. A total number of 3.41 oocytes per ovary were obtained and 2.17 culturable oocytes per ovary were cultured into maturation medium. After 18 h of maturation, 4,567 oocytes (1.82 oocytes per ovary) were further cultured into serum and BSA free PVA medium for its secretory proteins. Four secretory proteins of oocytes with approximately molecular weight of 45, 55, 65 and 95 kDa were obtained on SDS-PAGE in silver staining and three proteins with approximately molecular weight of 45, 55 and 65 kDa in Coomassie brilliant blue staining. In conclusion, four secretory proteins with approximately molecular weight of 45, 55, 65 and 95 kDa was obtained from in vitro cultured oocytes of goats.
Trichomoniasis caused by the parasitic protozoan Trichomonas vaginalis is the most common sexually transmitted disease in the world. Dendritic cells are antigen presenting cells that initiate immune responses by directing the activation and differentiation of naive T cells. In this study, we analyzed the effect of Trichomonas vaginalis-derived Secretory Products on the differentiation and function of dendritic cells. Differentiation of bone marrow-derived dendritic cells in the presence of T. vaginalis-derived Secretory Products resulted in inhibition of lipopolysaccharide-induced maturation of dendritic cells, down-regulation of IL-12, and up-regulation of IL-10. The protein components of T. vaginalis-derived Secretory Products were shown to be responsible for altered function of bone marrow-derived dendritic cells. Chromatin immunoprecipitation assay demonstrated that IL-12 expression was regulated at the chromatin level in T. vaginalis-derived Secretory Products-treated dendritic cells. Our results demonstrated that T. vaginalis- derived Secretory Products modulate the maturation and cytokine production of dendritic cells leading to immune tolerance.
Among the four kinds of silk glands in the funnel-web spider Agelena limbata, the ampullate gland for dragline silk production is the most predominate one in both sexes, and is composed of three functional parts-excretory duct, storage ampulla and convoluted tail regions. Two pairs of major ampullate glands send secretory ductules to the anterior spinnerets, and another two pairs of minor ampullate glands supply the middle spinnerets. There are no apparent differences between the major and minor ampullate glands not only the external spigots but also their internal silk glands. However, the microstructure is very unique in this spider, because each gland has spherical shaped storage sac with twig-like branched tails. Nevertheless, the wall of the secretory region is similarly composed of a single layer of epithelial cells. The mature secretory silks in glandular epithelium are closely packed and accumulated as electron-opaque vesicles. Most of the secretory products which originated from the rough endoplasmic reticula(rER) are grown up by fusion with the surrounding small vesicles however, the Golgi complex does not seem to play an important role in this process of secretion.
Among the silk glands in the black widow spider Latrodectus mactans, the ampullate one is the most predominant gland in both sexes, and is com-posed of three functional parts - excretory duct, storage ampulla and convoluted tail regions. This experiment was performed using mechanical pulling stimulation with electric motor equipment to reveal a correlation between silk usage and silk producing system in this poisonous spider. The mature secretory products in glandular epithelium are closely packed and appear as electron-opaque spherical vesicles. A part of the vesicles with fine fibrillar paracrystalline texture seems to store some proteins which will function at the time of final assembly into fibrils. Most of the secretory silk products which originated from the rough endoplasmic reticula of the glandular epithelial cells are grown by fusion with surrounding small vesi-cles. However, the Golgi complex does not seem to play an important role in this process of secretion. According to progressive maturation of secre-tory silk product, these granules are progressively filled with a fine fibrillar material, and thus appear much more electron-dense than those of earlier states. When the secretory product is extruded from the glandular cavity, the epithelium is rapidly changed to a thinner layer of tall columnar cells with less definitive cell membranes. After extruding there ave a few secre-tory droplets within these cells, thus causing this region to stain much lighter.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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