• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제26권11호
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• pp.1924-1932
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• 2016

Mycophenolic acid (MPA) is an antibiotic produced by Penicillium brevicompactum. MPA has antifungal, antineoplastic, and immunosuppressive functions, among others. ${\beta}-Hydroxy-{\beta}-methylglutaryl-CoA$ (HMG-CoA) lyase is a key enzyme in the bypass metabolic pathway. The inhibitory activity of HMG-CoA lyase increases the MPA biosynthetic flux by reducing the generation of by-products. In this study, we cloned the P. brevicompactum HMG-CoA lyase gene using the thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction and gene walking technology. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation (ATMT) was used to insert a mutated HMG-CoA lyase gene into P. brevicompactum. Successful insertion of the HMG-CoA lyase gene was confirmed by hygromycin screening, PCR, Southern blot analysis, and enzyme content assay. The maximum MPA production by transformants was 2.94 g/l. This was 71% higher than wild-type ATCC 16024. Our results demonstrate that ATMT may be an alternative practical genetic tool for directional transformation of P. brevicompactum.

• Mycobiology
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• 제29권4호
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• pp.218-223
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• 2001

A rapid radicle assay for prescreening antagonistic bacteria to Phytophthora capsic4 causal agent of Phytophthora blight of pepper was developed. Sixty-four bacterial strains with in vitro antifungal activity selected out of 1,400 strains isolated from soils of Ansung, Chunan, Koyang, and Paju, Korea in 1998 were used for development of the bioassay. Uniformly germinated pepper seeds dipped in bacterial cells for 3 hours were placed near the edges of growing mycelia of P. capsici on water agar containing 0.02% glucose. Five-week-old pepper plants(cv. Nockwang) were inoculated to compare with results of the radicle assay developed in this study. For plant inoculation, pepper seeds were sown in potting mixtures incorporated with the bacterial strains, then transplanted into steam-sterilized soils 3 weeks later. Plants were hole-inoculated with zoospores of P. capsici 2 weeks after transplanting. Disease incidence and severity were determined in radicle and plant assessments, respectively. In radicle assay, six strains, GK-B15, GK-B25, OA-B26, OA-B36, PK-B09, and VK-B14 consistently showed the significant(P=0.05) disease reduction against radicle infection by the fungus, four of which also did in plant assessments. Strains OA-B36 and GK-B15 consistently reduced the fungal infection in both the radicle assay and the plant assessment. Therefore, prescreening strains using the radicle assay developed in this study followed by plant assay could reduce time and labor, and improved the possibility of selecting antagonistic bacteria for control of Phytophthora blight of peppers.

• 농약과학회지
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• 제9권1호
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• pp.35-40
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• 2005

Rhizoctonia solani AG-4에 의하여 발생하는 여름 시금치 잘록병은 매우 중요한 병이다. 이 병을 방제하기 위하여 13종(pencycuron, trifloxystrobin, pyraclostrobin, azoxystrobin, kresoxim-methyl, validamycin, fluazinam, Benlate-T, flutolanil, cyazofamid, hexaconazole, tebuconazole, prochloraz)의 살균제의 약효를 in vitro와 in vivo 검정을 통하여 평가하였다. In vitro 균사생장 억제 시험 결과 pencycuron, pyraclostrobin, validamycin, fluazinam, Benlate-T, hexaconazole, tebuconazole, flutolanil이 병원균의 생장을 크게 억제하였다. 그러나 trifloxystrobin, azoxystrobin, kresoxim-methyl, cyazofamid, prochloraz은 억제 정도가 낮게 나타났다. 살균제들을 관구처리한 유묘검정(2,000 mg/L)에서 pencycuron, pyraclostrobin, validamycin, fluazinam, Benlate-T, flutolanil은 97.8%, 84.4%, 93.3%, 95.6%, 91.1%, 86.7%의 생존율을 나타냈고, 2,000 mg/L의 농도로 종자처리하였을 때 pencycuron과 pyraclostrobin은 85.1% 이상의 생존율을 나타내었다.

• 한국토양비료학회지
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• 제40권6호
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• pp.447-453
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• 2007

작물생육에 유용한 미생물을 선발하여 생물비료로 이용하고자 고추, 토마토, 상추, 오이, 목초, 잔디, 콩의 근권토양 및 뿌리표면에서 세균을 373균주 분리하였다. 각각의 균주를 작물에 접종후 작물생육에 미치는 영향을 관찰하였다. 그 중 작물생육을 촉진시키는 균주를 대상으로 작물생육량과 식물병원성 진균 억제능을 평가한 후 우수한 1균주를 선발하였다. 그리고 선발한 균주의 배양적 특성 및 식물호르몬 생산성을 분석하였다. 선발된 균주는 16S rRNA 염기서열분석, 생화학적특성 등의 분석으로 속 종명을 동정하였다. 식물생육촉진 및 식물병원성 진균을 효과적으로 억제하는 Bacillus subtilis S37-2 균주를 선발하였다. 시험에 사용된 식물병원성 진균은 Fusarium oxysporum (KACC 40037), Rhizoctonia solani (KACC 40140), Sclerotinia sclerotiorum (KACC 40457)의 3 균주였으며, 이들 균주에 대하여 모두 효과적이었다. 토양이 충진된 폿트에 상추를 재배하여 B. subtilis S37-2 균주의 희석현탁액을 $10^5{\sim}10^8cell\;ml^{-1}$ 범위의 접종 농도별로 근권에 처리후 상추의 생육량을 조사하였다. 접종균수가 많을수록 상추 생육량은 증가하였다. $8.7{\times}10^8cell\;ml^{-1}$를 주당 50 ml씩 1~2회 접종시 대조구에 비해 상추의 엽 생체중이 48.7%, 뿌리의 건물중이 42.3% 씩 각각 생육량이 증가하는 효과를 나타내었다. 상추 유묘에 식물병원성 진균인 S. sclerotiorum (KACC 40457)처리후 B. subtilis S37-2 균주를 접종한 구와 접종하지 않은 대조구를 비교한 결과 접종후 9일에 접종구는 16.7%, 대조구는 100% 이병되어 고사되었다. 배지 종류별로 B. subtilis S37-2 균주의 균체증식량을 비교한 결과 TSB배지가 양호하였으며, 질소원을 첨가할 경우 peptone, tryptone보다 yeast extract를 첨가한 구가 균체생성량이 양호하였다. 그리고 배양 온도별로는 $30^{\circ}C$에 비해 $37^{\circ}C$가 약 2~4배이상 균체생성량이 많았다. L-tryptophan을 $20mg\;L^{-1}$ 첨가한 TSB 배지에 B. subtilis S37-2 균주를 접종하여 24시간 배양후 IAA(indole 3-acetic acid) 생성량은 $0.1{\mu}g\;ml^{-1}$ 이 검출되었다.

• 식물병연구
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• 제23권2호
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• pp.159-167
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• 2017

본 연구는 Cladosporium cucumerinum PT1 (KACC 48094)에 의해 발생하는 오이 검은별무늬병에 대하여 유기농업자재의 방제효과를 평가하기 위해 수행되었다. 43품목의 유기농업 자재를 대상으로 실내에서 항균활성 검정과 온실에서 오이 유묘에 포자현탁액 접종을 통한 유묘검정을 실시하였다. 13개 품목의 유기농업자재가 균사생장을 억제하였고, 이 중 9개 품목이 미생물 제제였다. 오이 유묘를 이용한 검정에서 6품목의 유기농업자재가 90% 이상의 우수한 방제효과를 나타냈다. 그 중에서 Bacillus amyloliquefaciens M27이 유효성분인 미생물 제제의 억제효과가 가장 뛰어났다. 그 다음으로 9개의 유기농업자재를 선발하여 예방적 및 치료적 효과를 알아보기 위해 적용하였는데, 예방적으로 처리했을 때 9개 자재 모두 병 발생을 상당히 억제하였다. 특히, 보르도액 I과 III은 방제가가 각각 96.7%, 73.3%로 훌륭한 예방효과를 나타냈다. 이 중 백리향+고삼 추출물이 함유된 자재에서만 방제가 가 50%로 다소 낮았지만 치료적 처리의 효과가 나타났다. 이 연구를 통해 시설 내 온화하고 습한 조건에서 잘 발생하는 오이 검은별무늬병은 유기농업자재로 방제될 수 있고 예방적 처리가 더욱 중요하고 효과적임이 확인되었다.