Tracking the fate of individual cells and their progeny through lineage tracing has been widely used to investigate various biological processes including embryonic development, homeostatic tissue turnover, and stem cell function in regeneration and disease. Conventional lineage tracing involves the marking of cells either with dyes or nucleoside analogues or genetic marking with fluorescent and/or colorimetric protein reporters. Both are imaging-based approaches that have played a crucial role in the field of developmental biology as well as adult stem cell biology. However, imaging-based lineage tracing approaches are limited by their scalability and the lack of molecular information underlying fate transitions. Recently, computational biology approaches have been combined with diverse tracing methods to overcome these limitations and so provide high-order scalability and a wealth of molecular information. In this review, we will introduce such novel computational methods, starting from single-cell RNA sequencing-based lineage analysis to DNA barcoding or genetic scar analysis. These novel approaches are complementary to conventional imaging-based approaches and enable us to study the lineage relationships of numerous cell types during vertebrate, and in particular human, development and disease.
An assay for detecting Apple scar skin viroid (ASSVd) was developed based on nucleic acid sequence based amplification (NASBA) in combination with realtime detection during the amplification process using molecular beacon. The ASSVd specific primers for amplification of the viroid RNA and molecular beacon for detecting the viroid were designed based on highly conserved regions of several ASSVd sequences including Korean isolate. The assay had a detection range of $1{\times}10^4$ to $1{\times}10^{12}$ ASSVd RNA $copies/{\mu}l$ with reproducibility and precision. Following the construction of standard curves based on time to positive (TTP) value for the serial dilutions ranging from $1{\times}10^7$ to $1{\times}10^{12}$ copies of the recombinant plasmid, a standard regression line was constructed by plotting the TTP values versus the logarithm of the starting ASSVd RNA copy number of 10-fold dilutions each. Compared to the established RT-PCR methods, our method was more sensitive for detecting ASSVd. The real-time quantitative NASBA method will be fast, sensitive, and reliable for routine diagnosis and selection of viroid-free stock materials. Furthermore, real-time quantitative NASBA may be especially useful for detecting low levels in apple trees with early viroid-infection stage and for monitoring the influence on tree growth.
Kim, Na-Kyeong;Lee, Hyo-Jeong;Ryu, Tae-Ho;Cho, In-Sook;Ju, Ho-Jong;Jeong, Rae-Dong
Research in Plant Disease
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v.27
no.2
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pp.79-83
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2021
The aim of the present study was to develop a sensitive and specific detection method for the rapid detection of apple scar skin viroid (ASSVd) in apple leaves. The resulting reverse transcription recombinase polymerase amplification (RT-RPA) assay can be completed in 10 min at 42℃, is 10 times more sensitive than conventional reverse transcription polymerase chain reaction, and can specifically amplify ASSVd without any cross-reactivity with other common apple viruses, including apple stem grooving virus, apple stem pitting virus, and apple chlorotic leaf spot virus. The reliability of the RT-RPA assay was assessed, and the findings suggested that it can be successfully utilized to detect ASSVd in field-collected samples. The RT-RPA assay developed in the present study provides a potentially valuable means for improving the detection of ASSVd in viroid-free certification programs, especially in resource-limited conditions.
Ahn, Keun Jae;Kim, Do Yeon;Cheon, Gwahn-Woo;Park, Hyun Jun;Ahn, Tae Hwan
Medical Lasers
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v.10
no.2
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pp.90-95
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2021
Background and Objectives Surgery for harvesting costal cartilage is often required for revision septorhinoplasty due to a lack of septal cartilage in patients with a severely contracted nose, and postoperative scarring on the anterolateral rib cage commonly requires additional treatment. This study aimed to evaluate the therapeutic efficacy and safety of combined polydeoxyribonucleotide (PDRN) and microlens array (MLA)-type nanosecond-domain neodymium (Nd):yttrium-aluminum-garnet (YAG) laser treatment for postoperative scars after costal cartilage harvest surgery. Materials and Methods Nine Korean patients with scars after costal cartilage harvest surgery treated with PDRN injections and MLA-type Nd:YAG laser treatments were retrospectively reviewed. Results Most of the scar lesions exhibited clinical improvement at 2 weeks after PDRN and MLA-type nanosecond-domain laser treatments, and the lesions further improved after adding more treatment sessions. The median Vancouver Scar Scale (VSS) score decreased from 6 (interquartile range [IQR]: 6-7) before combined intralesional PDRN injection and MLA-type, nanosecond-domain Nd:YAG laser treatments to 3 (IQR: 2-4) thereafter. Patient satisfaction after the combination treatments was rated as satisfactory. None of our patients reported major adverse events. Conclusion This case series study demonstrated that combined PDRN and MLA-type, nanosecond-domain Nd:YAG laser treatments are effective and safe for treating scars from costal cartilage harvest surgery.
Kim, Jae Hyun;Choi, Jong Min;Chung, Chan Min;Park, Myong Chul
Journal of the Korean Burn Society
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v.24
no.2
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pp.74-76
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2021
Postburn scar contracture of sole can cause musculoskeletal deformity, restricted range of motion, and decreased quality of life. It is very important to exhibit similar characteristics of the sole when reconstructing the sole because it has to resist shearing force and weight bearing. In this case, we performed medialis pedis free flap for the postburn scar contracture of the sole and the flap survived without complication. The patient satisfied with functional and aesthetic outcomes. Medialis pedis free flap, which is harvested adjacent to the sole, can show similar characteristic of the sole and maintain adequate contour. Moreover, this flap can be harvested without sacrifice of major vessel or nerve. Due to these advantages, medialis pedis free flap can be an ideal option for the reconstruction of the sole.
Purpose: Negative pressure therapy has been used in various conditions to promote wound healing. It has also been used to secure a skin graft by improving microcirculation and improving tight adhesion between the graft and the recipient bed. To reduce post burn scar contracture and improve aesthetical result, many types of dermal substitutes have been invented and used widely. The goal of this study was evaluate usefulness of the VAC (Kinetic concepts Inc., San Antonio, TX) in improving the take rate and time to incorporation of Integra$^{(R)}$ in reconstruction of burn scar contracture. Methods: A retrospective study was performed from October, 2006 to December, 2008. The VAC was utilized for 11 patients. The average patient's age was 19.7 years (range 5 - 27) and average surface area was $785cm^2$ (range 24 - 1600). The burn scars were excised deep into normal subcutaneous tissue to achieve complete release of the scar, Integra$^{(R)}$ was sutured in place with skin staple와 Steri - strip$^{(R)}$. Then slit incisions were made on silicone sheet only with No.11 blade for effective drainage. The VAC was used as a bolster dressing over Integra$^{(R)}$. Negative - Pressure ranging from 100 to 125 mm Hg was applied to black polyurethane foam sponge trimmed to the appropriate wound size. An occlusive seal over the black polyurethane foam sponge was maintained by a combination of the occlusive dressing, OP - site$^{(R)}$. The VAC dressing changes were performed every 3 or 4 days until adequate incorporation was obtained. The neodermis appeared slightly yellow to orange color. When the Integra$^{(R)}$ deemed clinically incorporated, The VAC was removed and take was estimated with visual inspection. Very thin STSG(0.006 ~ 0.008 inches) was performed after silicone sheet removal. Result: The mean time for clinically assessed incorporation of Integra$^{(R)}$ was 10.00 days (range 9 - 12). The mean dressing change was 3.5 times until take was obtained. In All patients, Integra$^{(R)}$ had successful incorporation in tissue without serious complications. Conclusion: Integra$^{(R)}$ in combination with Vacuum - Assisted Closure(VAC) may be incorporated earlier than conventional dressing method.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.31
no.6
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pp.501-508
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2005
Generally we use the preauricular incision to access and remove the parotid gland tumor. But the preauricular approach has some complications such as damage of facial nerve and sensory nerve, Frey's syndrome, and postoperative scar. Especially, the postoperative scar can often cause an unesthetic result and mental stress in young patients. Therefore, if we avoid preauricular incision to be performed outside of tragus, the postoperative scar would be hardly remarkable, and patients would be satisfied cosmetically. We performed surgical excision using a modified endaural and neck approach in a 21-year-old female with a pleomorphic adenoma and 15-year-old male with a neurofibroma occured in the parotid gland. A new, modified endaural and neck approach is a combined method of the modified endaural incision by Starck et al and Gutierrez's neck extension. We obtained an adequate access and the cosmetically acceptable postsurgical scar. The postoperative scars were hidden in the external ear and the hairline. Moreover, except the neck dissection can this approach be applied to the surgery of temporomandibular joint as well as the parotid gland tumor.
Min Jae Cha;Iksung Cho;Joonhwa Hong;Sang-Wook Kim;Seung Yong Shin;Mun Young Paek;Xiaoming Bi;Sung Mok Kim
Korean Journal of Radiology
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v.22
no.7
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pp.1044-1053
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2021
Objective: Motion-corrected averaging with a single-shot technique was introduced for faster acquisition of late-gadolinium-enhancement (LGE) cardiovascular magnetic resonance (CMR) imaging while free-breathing. We aimed to evaluate the image quality (IQ) of free-breathing motion-corrected single-shot LGE (moco-ss-LGE) in patients with hypertrophic cardiomyopathy (HCM). Materials and Methods: Between April and December 2019, 30 patients (23 men; median age, 48.5; interquartile range [IQR], 36.5-61.3) with HCM were prospectively enrolled. Breath-held single-shot LGE (bh-ss-LGE) and free-breathing moco-ss-LGE images were acquired in random order on a 3T MR system. Semi-quantitative IQ scores, contrast-to-noise ratios (CNRs), and quantitative size of myocardial scar were assessed on pairs of bh-ss-LGE and moco-ss-LGE. The mean ± standard deviation of the parameters was obtained. The results were compared using the Wilcoxon signed-rank test. Results: The moco-ss-LGE images had better IQ scores than the bh-ss-LGE images (4.55 ± 0.55 vs. 3.68 ± 0.45, p < 0.001). The CNR of the scar to the remote myocardium (34.46 ± 11.85 vs. 26.13 ± 10.04, p < 0.001), scar to left ventricle (LV) cavity (13.09 ± 7.95 vs. 9.84 ± 6.65, p = 0.030), and LV cavity to remote myocardium (33.12 ± 15.53 vs. 22.69 ± 11.27, p < 0.001) were consistently greater for moco-ss-LGE images than for bh-ss-LGE images. Measurements of scar size did not differ significantly between LGE pairs using the following three different quantification methods: 1) full width at half-maximum method; 23.84 ± 12.88% vs. 24.05 ± 12.81% (p = 0.820), 2) 6-standard deviation method, 15.14 ± 10.78% vs. 15.99 ± 10.99% (p = 0.186), and 3) 3-standard deviation method; 36.51 ± 17.60% vs. 37.50 ± 17.90% (p = 0.785). Conclusion: Motion-corrected averaging may allow for superior IQ and CNRs with free-breathing in single-shot LGE imaging, with a herald of free-breathing moco-ss-LGE as the scar imaging technique of choice for clinical practice.
Lee, Tae Ho;Son, Mi Ran;Byun, Soon Ok;Moon, Jung Woong
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.48
no.9
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pp.998-1003
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2005
Purpose : We evaluated the occurrence of renal scarring in children with unilateral vesicoureteral reflux(VUR), and the relationships between renal scar formation and risk factors such as VUR, duration of fever, acute-phase reactant, age, and sex. Methods : We retrospectively analyzed the data of 35 children newly diagnosed with unilateral vesicoureteral reflux after urinary tract infection(UTI) in Wallace Memorial Baptist Hospital between January 1996 and December 2004. Ultrasonography, Erythrocyte sedimentation rate(ESR), and C-reactive protein(CRP) were performed initially. Voiding cystourethrography(VCUG) was performed 1 to 3 weeks after treatment with UTI. $^{99m}Tc$-dimercaptosuccinic acid(DMSA) scan was performed 4 to 6 months after treatment. Results : Scintigraphic renal damage was present in 29 percent of the refluxing and in 3 percent of the nonrefluxing kidneys(P<0.05). The severity of VUR was significantly correlated with renal scar formation(P<0.05). The duration of fever before treatmen($5.0{\pm}1.3$ vs $2.6{\pm}1.3$) and prolonged fever of over 5 days were significantly different between renal scar group and non-renal scar group(P<0.05). ESR($56.3{\pm}23.8$ vs $27.9{\pm}18.1mm/hr$, P<0.05) and CRP($12.8{\pm}7.3$ vs $3.9{\pm}3.8mg/dL$, P<0.05) at the diagnosis of UTI in the renal scar group were higher, compared to those of the non-renal scar group. There were no significant differences in age and sex between the two groups. Conclusion : The presence and grade of VUR, the duration of fever before treatment, prolonged fever over 5 days, ESR, and CRP were risk factors for renal scarring, irrespective of age and sex. Diagnosis and management of VUR, in children with UTI, is important to prevent renal scars.
Proceedings of the Korean Society for Food Science of Animal Resources Conference
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2000.11a
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pp.59-75
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2000
This study was carried out to develop a DNA marker for identifying between Korean cattle (Hanwoo) and other breeds. First experiment was performed to isolate Hanwoo specific DNA marker at sequence characterized amplified regions (SCARs). Five breeds of cattle including Hanwoo, Holstein, Hereford, Angus and Charolais were represented with the from 8 to 20 individuals. Fourteen primers of 300 arbitrary primers of 10 nucleotides showed reproducible polymorphism across the breeds. An amplified band of 0.9 kb in the primer MG-3 showed the specificity to Holstein breed. And MG-6 and MG-12 detected the Hereford and Hanwoo specific markers at the size of 2.0 kb and 1.0 kb, respectively. A 1.0 kb band of MG-12 was cloned and sequenced. A SCAR primer was designed based on the obtained sequences. It was possible to identify the Hanwoo from Holstein breed. Second experiment was carried out to observe the genotype frequencies of MC1R in 1,044 samples of imported beef and eight different cattle breeds including Hanwoo, Holstein, Angus, Brown-Swiss, Charolais, Limousin, Simmental and Hereford. The primers for the amplification of bovine MC1R gene were designed based on a bovine MC1R gene sequence (GenBank accession no.Y19103). A size of 350 bp was amplified by polymerase chain reaction(PCR), digested with two different restriction enzyme, BsrFI and MspA II, and electrophoresed in 2.5% Metaphore agarose gel for determination of genotypes. Genotype frequencies of Hanwoo were 0.10 in E+e and 0.90 in ee. Allele ED was shown in all of Holstein and Angus breeds tested which have black coat color phenotypes. We suggested that SCAR marker and the bovine MC1R gene could be used as a DNA marker for distinguishing beef between Hanwoo and Holstein.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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