• 한국어병학회지
• /
• 제9권2호
• /
• pp.169-176
• /
• 1996

연어과 어류의 이상유영 원인 바이러스 RVS의 ELISA법에 의한 신속 진단 방법을 개발하였다. 주화세포를 이용한 바이러스 배양액 및 감염 무지개송어의 뇌조직 마쇄액을 사용하여 실험하였다. 바이러스 배양액을 이용한 ELISA법의 검출 감도 조사에서 최소 바이러스 감염가 검출 한계치는 $10^{2.6}$ $TCID_{50}/100{\mu}l$ 이었다. 또한, 인공감염어의 뇌조직 마쇄액 내의 RVS 항원도 검출 되었다. 본 방법은 현장에서의 RVS 감염어 조사에 효과적으로 사용되어질 수 있는 방법으로 생각 되어진다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제30권10호
• /
• pp.1443-1457
• /
• 2020

The emergence and spread of antimicrobial resistance in pathogenic bacteria of fish and shellfish have caused serious concerns in the aquaculture industry, owing to the potential health risks to humans and animals. Among these bacteria, Aeromonas salmonicida, which is one of the most important primary pathogens in salmonids, is responsible for significant economic losses in the global aquaculture industry, especially in salmonid farming because of its severe infectivity and acquisition of antimicrobial resistance. Therefore, interest in the use of alternative approaches to prevent and control A. salmonicida infections has increased in recent years, and several applications of bacteriophages (phages) have provided promising results. For several decades, A. salmonicida and phages infecting this fish pathogen have been thoroughly investigated in various research areas including aquaculture. The general overview of phage usage to control bacterial diseases in aquaculture, including the general advantages of this strategy, has been clearly described in previous reviews. Therefore, this review specifically focuses on providing insights into the phages infecting A. salmonicida, from basic research to biotechnological application in aquaculture, as well as recent advances in the study of A. salmonicida.

• 한국어병학회지
• /
• 제10권2호
• /
• pp.165-176
• /
• 1997

양식넙치의 병원바이러스인 HRV 및 FBV, 연어과 유래 바이러스이면서 해산어에 병원성을 나타내는 RVS를 대상으로 넙치사육해수, 2차증류수 및 Hanks' BSS중에서의 바이러스 감염가의 변화를 관찰하고 사육해수중에 존재하는 미생물과의 상호작용을 검토하였다. HRV, FBV, RVS의 감염가는 2차증류수 및 Hanks' BSS중에서 21일간 안정적이었으나, 사육해수 중에서 HRV는 $0^{\circ}C$를 제외한 5, 10, 15, $20^{\circ}C$의 실험구에서 바이러스 현탁후 7일째 부터 감염가의 저하를 확인할 수 있었고, RVS에서도 감염가의 하락이 확인되었다. HRV 및 RVS를 고압멸균, 여과처리 및 무처리 사육해수에 현탁시켜 본 결과 무처리 사육해수에서 바이러스감염가의 하락을 나타내는데 비하여 고압멸균 및 여과 처리한 사육해수중의 바이러스 감염가는 비교적 안정적이었다. 사육해수에 1% MEM10을 첨가하여 $15^{\circ}C$에서 7일간 배양한 후 여과 처리하여 얻은 여과액에 HRV를 현탁시켜 감염가의 변화를 관찰한 결과 1일에서 3일째에 감염가가 검출한계 이하로 하락하였으며, 해수배양액내의 세균 수는 $8.1{\times}10^8$ cells/ml이었고, Pseudomonas, Achromobacter, Flavobacterium 및 Vibrio속 세균이 분리되었다. 분리된 Pseudomonas 및 Vibrio속의 대표주에서 항바이러스작용 물질의 생산이 확인되었다.

• 한국어병학회지
• /
• 제20권2호
• /
• pp.147-160
• /
• 2007

2005년 11월과 12월에 걸쳐 연어 수정란 (ChS-E0511, 강원 양양), 무지개송어 수정란 (RaT-E0511, 경남 밀양), 무지개 송어 성어 (Rat-A0512, 강원 평창) 및 산천어 자어 (MaS-F0512, 강원 평창)에서 물곰팡이를 분리하였다. 분리 곰팡이의 분류 결과, 형태학적 및 유전학적 연구를 통하여 4종 모두 Saprolegnia parasitica로 확인되었으며, 연어 수정란으로부터 분리된 ChS-E0511 균주는 조란기 (oogonia)와 무성아 (gemmae)를 형성하므로 S. parasitica group 1으로 분류되었다. 분리균주인 ChS-E0511을 이용하여 다양한 약물의 성장 억제 효과를 측정한 결과, 사용금지 약물인 malchite green에 대한 약물 효과가 높게 나타났으며, 손바닥선인장 (Opuntia ficus-indica) 추출물 (MBT-01108), 2-bronopol (BNP) 및 sodium chloride 등에 대한 무지개송어 수정란의 상대발안율이 높게 나타났다. 본 연구의 결과, 국내 연어과 어류의 질병과 관련한 곰팡이는 S. parasitica로서 2가지 이상의 group으로 구분되며 다양한 약물들에 대한 평가가 지속적으로 이루어 져야 할 것으로 사료된다.

• 한국수산과학회지
• /
• 제33권1호
• /
• pp.55-59
• /
• 2000

무지개 송어의 뇌하수체 및 배양액에 존재하는 GTH II 농도를 측정하기 위해 Avidin- Biotin complex를 이용한 sandwich EIA 계을 개발했다. Protein A sepharose affinity chromatography을 통해서 얻어진 연어 GTH II의 rabbit IgG에 biotinylation시킨 것 (Biotin-salmon GTH II rabbit IgG)을 제2 항체로 사용하였고, Non-Biotin salmon GTH II rabbit IgG는 단지 protein A sepharose affinity chromatography에서 얻어진 IgG를 제 1 항체로 사용하였다. EIA는 sandwich법에 의해서 이루어졌으며, 효소반응 기질로는 TMB(3,3'5,5-tetramethylbenzidine)를 이용했으며, 반응후 450 nm의 흡광도에서 automatic microplate reader로 측정하였다. 그 결과, $0.12\;{\~}\;125\;ng/ml$의 범위에서 용량반응곡선을 얻었으며, 측정감도 (최소 검출량)는 거의 0.58 ng/ml 정도 였다. 그리고 뇌하수체 추출물 및 배양액 각각의 희석곡선은 GTH II 표존곡선과 일치 하였다. 또한 이러한 GTH II의 표준곡선는 뇌하수체내 다른 peptide hormone와는 교차반응을 거의 나타내지 않았다. Testosterone을 처리한 미성숙 무지개 송어의 뇌하수체 세포배양계를 이용하여 sGnRH에 의한 GTH II 분비량을 본 sandwich EIA계와 RIA계를 비교 조사한 결과, 거의 같은 분비량을 나타냈을 뿐만아니라 같은 분비 pattern을 나타냈다. 이러한 결과로부터 본 sandwich법 EIA계에 의해서 연어과 어류의 뇌하수체 추출물 및 뇌하수체 배양액 중의 GTH II 함량 및 분비량을 측정하는데 있어서 안정된 assay계라고 생각되어진다.

• 한국어병학회지
• /
• 제11권2호
• /
• pp.129-136
• /
• 1998

1997년 3월 전라남도 및 경상남도의 해산어 육상 및 가두리 양식장에서 양성 중이던 넙치가 HRV(hirame rhabdovirus, Rhabdovirus olivaceus) 감염증과 유사한 증상을 나타내어 그 원인을 조사한 결과 새로운 rhabdovirus가 분리 되었다. 분리 바이러스(DF-9708)는 RTG-2 및 EPC 세포주에서 $15^{\circ}C$로 배양하였을 때 랩도바이러스 특유의 세포변성효과(CPE)를 나타내었으나 CHSE-214에서는 증식되지 않았다. 투과전자현미경으로 감염 세포내의 바이러스 입자 형태를 관찰해본 결과 bullet-shape의 크기 $70nm{\times}100\sim150nm$으로 인벨롭을 가진 바이러스였다. 분리바이러스는 pH 3 및 diethyl ether의 처리 조건에서는 감염성을 상실하였고, 열($50^{\circ}C$ 5 min, $60^{\circ}C$ 1 min)에도 약한 성상을 나타내었다. DNA 저해제인 IUdR $10^{-4}$M 처리에 의해서는 바이러스 감염가에 영향을 받지 않았다. 분리 바이러스는 Anti-HRV(8401-H) rabbit serum에 의해서만 중화 되었고, 전염성 조혈기 괴사증 바이러스(IHNV), 연어과 레오바이러스(CSV), 바이러스성 선회병 바이러스(RVS) 및 전염성 췌장괴사증 바이러스(IPNV) 등의 국내에서 분리되어지는 바이러스 항체로는 중화되지 않았다. 초원심법으로 정제한 분리 바이러스를 전기영동 한 결과 polymerase(L), glycoprotein(G), nucleoprotein(N) 및 2개의 matrix proteins(M1 및 M2)으로 구성되어져 있었으며, 각 단백질의 분자량은 L, 160 kDa; G, 55 kDa; N, 45 kDa; M1, 26 kDa; M2, 22 kDa의 크기로 계산되었다. 새롭게 분리된 바이러스는 외부증상으로는 기존의 HRV 감염과 유사한 점을 나타내었으나 그 바이러스학적 특성에 있어 약간의 차이점이 있어 본 분리바이러스를 우선 Nubchi rhabdovirus(NRV)(HRV-like)로 부르기로 한다.