The ultrastructures of the secretory acinar granules of submandibular and parotid salivary gland were examined in the Korean striped field mouse, Apodemus agraius. The acini of the submandibular salivary gland had serous and mucous acinar cells filled with numerous secretory granules. The serous acinar granules had uniformly fine dense contents and were round typed with a definite boundary between the granules. The mucous acinar granules were relatively coarse, with moderate density, and clustered together as a result of the indistinct boundaries between the granules. The acini of the parotid salivary glands contained only serous cells filled with numerous round-typed serous acinar granules. Serous acinar granules had uniformed dense matrix and definite boundaries. The ultrastructures without substructure in a matrix of serous and mucous acinar granules in the submandibular and parotid salivary glands of A. agraius were similar to those of species of Rodentia but different from those of Soricidae in Korea with a characteristic substructure in a matrix. This ultrastructure and charateristics in secretory acinar granules provide fundamental data for molecular comparisions of genetic relationships and are one of the key methods for classifying A. agraius.
We investigated the culture condition and effects of various growth factors on the culture of salivary gland acinar cells. Male, Sprague-Dawley rats (about 6 weeks old) were sacrificed and their submandibular, sublingual, and parotid glands were used as specimens. High oxygen level more than 90% and coating of Matrigel on culture dish were important factors to help increase the survival time of acinar cells, Proper concentration of enzymes such as collagenase and hyaluronidase during isolation steps was also important. Addition of various growth factors such as dexamethasone, insulin, transferrin, selenous acid, reduced glutathione, epidermal growth factor, isoproterenol, and putrescine in culture medium helped to increase lifetime of cultured salivary acinar cells.
Primary Sjögren's syndrome (pSS) is an autoimmune progressive disease characterized by dysfunction and inflammation of the salivary glands. The underlying mechanisms of salivary gland involvement in pSS remain unclear, and researchers have primarily focused on immunological phenomena, making it difficult to distinguish between the cause and effect of the disease. Consequently, our research aims to directly investigate changes in homeostasis occurring in acinar cells, specifically in the context of muscarinic signaling, mucins, aquaporins, and forkhead box protein O1, to elucidate the initial step of pSS. We compare the disease-related phenomena observed in salivary gland acinar cells in pSS with the overall process of salivary secretion.
Purpose: Chronic nicotine administration induce various effects in whole organs of the body; however, little is known about salivary gland. In the present study, we pursued the links between systemic nicotine and the histomorphological changes of the salivary gland in mice. Methods: Twenty-five C57BL6 mice were allocated into two groups. The control group (n=9) received distilled water only for 8 weeks by gavage. The experimental nicotine group (n=16) was administered nicotine $5{\mu}g/g$ with distilled water. Animals were sacrificed at 8 weeks; then, submandibular glands were excised and processed for histologic evaluation. Volumetric changes in acinar cells were evaluated by H&E staining. The expression of calponin-positive myoepithelial cells and Ki-67-positive proliferating acinar cells were evaluated by immunohistochemistry. Results: The nicotine group showed significantly decreased number of calponin-positive myoepithelial cell process compared with the control group. There were no significant differences in average volume of acinar cell and the number of Ki-67-positive acinar cells between both groups. Conclusions: These findings suggested that chronic nicotine administration may cause decreased function of myoepithelial cells in submandibular glands of mice, and these can partly explain xerostomic conditions in chronic smokers.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.32
no.2
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pp.81-93
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2006
Obstructive sialadenitis is one of common disease in salivary gland, and most common histologic features are loss of acinar cell and ductal dilatation associated with fibrosis, and infiltration of inflammatory cells. Although many experimental studies has been accomplished for the salivary acinar cell change in obstructive salivary gland disease, studies for myoepithelial cell were deficient. This study is designed for salivary gland tissue change, especially myoepithelial cell when nonspecific chronic sialadenitis or salivary duct injury by duct obstruction or cut can be occurred that is common encounted clinically. After ligation and cutting of submandibular gland of rabbit, groups of aminmal were sacrificed at 1, 2, 4 weeks postoperatively, submandibular gland were removed. The histopathologic evaluation was done with light microscopy. And, with immunohistochemical staining with ${\alpha}$-smooth muscle actin, characteristics of myoepithelial cell were examined. With transmission electron microscopy, ultrastructure of myoepithelial cell were examined for distribution and ultrastructure of myoepithelial cell. The results were obtained as follows: 1. In the histopathologic evaluation, ligation and cutting group of 1 week, linkage of myoepithelial cell associated with acinar atrophy and degeneration were disappeared in both group. 2. More prominent squamous metaplasia was seen in acinar cells of ligation group of 2 weeks experimental rabbit than cutting group. 3. Acinar cells are nearly disappeared in both ligation and cutting group of 4 weeks, and myoepithelial cell also disappeared associated with acinar cell atrophy, and duct-like structure composed by squamous cells by squamous metaplasia in acinar cells were distributed. 4. In immunohistochemical study, both ligation and cutting group ${\alpha}$-SMA distribution were diminished at 1 week experimental rabbits, but myoepithelial cell was more diminished in ligation group than cutting group, which were distributed around cells of squamous metaplasia. 5. Nuclear condensation, chromosome margination, and cytoplasmic vaculoation were appeared in myoepithelial cell of both cutting and ligation group after 1 week with transmission electron microscopy. But degenerative substance were seen in cytoplasm of myoepithelial cell of ligation group of 4 weeks. From the results obtained in this study, atrophy and degeneration of myoepithelial cell was more prominent in duct ligation group than duct cutting group, and myoepithelial cells were seen around cells squamous metaplasia of acinar cell.
Kim, Sang-Hee;Cho, Young-Kyung;Chung, Ki-Myung;Kim, Kyung-Nyun
International Journal of Oral Biology
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v.31
no.4
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pp.141-148
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2006
The effects of adenosine triphosphate(ATP) on salivary glands have been recognized since 1982. The presence of purinergic recepetors(P2Rs) that mediate the effects of ATP in various tissues, including parotid and submandibular salivary gland, has been supported by the cloning of receptor cDNAs and the expression of the receptor proteins. P2Rs have many subtypes, and the activation of these receptor subtypes increase intracellular $Ca^{2+}$, a key ion in the regulation of the secretion in the salivary gland. The apical pores of taste buds in circumvallate and foliate papillae are surrounded by the saliva from von Ebner salivary gland(vEG). Thus, it is important how the secretion of vEG is controlled. This study was designed to elucidate the roles of P2Rs on salivary secretion of vEG. Male Sprague-Dawley rats (about 200 g) were used for this experiment. vEG-rich tissues were obtained from dissecting $500-1,000\;{\mu}m$ thick posterior tongue slices under stereomicroscope view. P2Rs mRNA in vEG acinar cells were identified with RT-PCR. To observe the change in intracellular $Ca^{2+}$ activity, we employed $Ca^{2+}-ion$ specific fluorescence analysis with fura-2. Single acinar cells and cell clusters were isolated by a sequential trypsin/collagenase treatment and were loaded with $10\;{\mu}M$ fura -2 AM for 60 minutes at room temperature. Several agonists and antagonists were used to test a receptor specificity. RT-PCR revealed that the mRNAs of $P2X_4$, $P2Y_1$, $P2Y_2$ and $P2Y_3$ are expressed in vEG acinar cells. The intracellular calcium activity was increased in response to $10\;{\mu}M$ ATP, a P2Rs agonist, and 2-MeSATP, a $P2Y_1$ and $P2Y_2R$ agonist. However, $300\;{\mu}M\;{\alpha}{\beta}-MeATP$, a $P2X_1$ and $P2X_3R$ agonist, did not elicit the response. The responses elicited by $10\;{\mu}M$ ATP and UTP, a $P2Y_2R$ agonists, were maintained when extracellular calcium was removed. $10\;{\mu}M$ suramin, a P2XR antagonist, and reactive blue 2, a P2YR antagonist, partially blocked ATP-induced response. However, when extracellular calciums were removed, suramin did not abolish the responses elicited by ATP. These results suggest that P2Rs play an important role in salivary secretion of vEG acinar cells and the effects of ATP on vEG salivary secretion may be mediated by $P2X_4$, $P2Y_1$, $P2Y_2$, and/or $P2Y_3$.
The salivary glands secrete saliva, which plays a role in the maintenance of a healthy oral environment. Under physiological conditions, saliva secretion within the acinar cells of the gland is regulated by stimulation of specific calcium (Ca2+) signaling mechanisms such as increases in the intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i) via storeoperated Ca2+ entry, which involves components such as Orai1, transient receptor potential (TRP) canonical 1, stromal interaction molecules, and inositol 1,4,5-triphosphate (IP3) receptors (IP3Rs). Homer proteins are scaffold proteins that bind to G protein-coupled receptors, IP3Rs, ryanodine receptors, and TRP channels. However, their exact role in Ca2+ signaling in the salivary glands remains unknown. In the present study, we investigated the role of Homer2 in Ca2+ signaling and saliva secretion in parotid gland acinar cells under physiological conditions. Deletion of Homer2 (Homer2-/-) markedly decreased the amplitude of [Ca2+]i oscillations via the stimulation of carbachol, which is physiologically concentrated in parotid acinar cells, whereas the frequency of [Ca2+]i oscillations showed no difference between wild-type and Homer2-/- mice. Homer2-/- mice also showed a significant decrease in amylase release by carbachol in the parotid gland in a dose-dependent manner. These results suggest that Homer2 plays a critical role in maintaining [Ca2+]i concentration and secretion of saliva in mouse parotid gland acinar cells.
Ki, Su-Young;Cho, Young-Kyung;Chung, Ki-Myung;Kim, Kyung-Nyun
International Journal of Oral Biology
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v.41
no.2
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pp.97-103
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2016
Mammals have 3 pairs of major salivary glands i.e., the parotid, submandibular, and sublingual glands. Saliva secretion of these glands is modulated by taste perception. Salivary glands are composed mainly of acinar and ductal cells. Primary saliva is secreted by acinar cells and modified during ductal flow. Recently, of the murine 35 bitter taste receptors, Tas2r108 was expressed at highest levels in the submandibular gland by qPCR. Further, Tas2r108-transfected cells respond to a range of bitter compounds, such as denatonium, quinine, colchicine, diphenidol, caffeine and dapson. The objective of the present study was to characterize the expression of Tas2r108 mRNA in acinar and/or ductal cells of the submandibular gland using in situ hybridization (ISH). Male 42-60 days old DBA2 mice were used in the study. Messenger RNAs were extracted from the submandibular gland for generating digoxigenin (DIG) labeled-cRNA probes. These probes were transcribed in anti-sense and sense orientation using T7 RNA polymerase. Dot blot hybridization was performed using DIG labeled-cRNA probes, in order to estimate integrity and optimal diluting concentration of these probes. Subsequently, ISH was performed on murine submandibular gland to detect Tas2r108 mRNA. Dot blot hybridization data demonstrated that Tas2r108 DIG labeled-cRNA anti-sense probes specifically detected Tas2r108 cDNA. ISH results showed that the anti-sense probes labeled acinar and ductal cells in the submandibular gland, whereas no staining was visible in sense controls. Interestingly, the Tas2r108 expression levels were higher in acinar than ductal cells. These results suggested that Tas2r108 might be more associated with primary saliva secretion than with ductal modification of saliva composition.
The role of $Cl^-$ channels in regulatory volume decrease (RVD) in human salivary gland acinar cells was examined using a whole-cell patch clamp technique. Human tissues were obtained from healthy volunteers or from patients with oromaxillofacial tumors. During the measurements, $K^+$-free solutions were employed to eliminate contamination of whole-cell conductance by $K^+$ currents. When the cells were exposed to a 70% hypotonic solution, outward-rectifying currents, which were not observed in the resting state, were found to have significantly increased both in human labial and parotid gland acinar cells. The amplitudes of the currents were reduced in a low $Cl^-$ bath solution. Furthermore, the addition of $100{\mu}M$ 5-Nitro-2- (3-phenyl propylamino) benzoic acid (NPPB) or $100{\mu}M$ 4,4'-diisothio cyanatostilbene-2,2'-disulphonic acid (DIDS), known to partially block $Cl^-$ channels, significantly inhibited these currents. Its outward-rectifying current profile, shift in reversal potential in a low $Cl^-$ bath solution and pharmacological properties suggest that this is a $Ca^{2+}$-independent, volume activated $Cl^-$ current. We conclude therefore that volume activated $Cl^-$ channels play a putative role in RVD in human salivary gland acinar cells.
The acinar cells and secretory granules of the parotid salivary gland were examined in the lesser white toothed shrew, Crocidura suaveolens and the big white-toothed shrew, C. lasiura. The parotid gland of both species were a serous gland having only one kind of serous acinar cells, and had conventional arrangement of acini and intercalated, granular and striated ducts. In case of C. suaveolens, serous acinar cells had well developed rER, prominent Golgi complex, several large mitochondria and abundant moderate dense secretory granules with various stages of the maturing or fusing process. Immature acinar secretory granules were only or mainly filled with fine strong dense specks and had an indistinct limiting membrane, and mature granules were filled with homogeneous pale large round center and had fine strong dense specks at the periphery of the homogeneous pale center and a distinct limiting membrane. In case of C. lasiula, serous acinar cells had well developed rER, prominent Golgi complex, several large mitochondria and abundant dense secretory granules with maturing or fusing process. Immature acinar secretory granules were only filled with pale rough specks and had an indistinct limiting membrane, and mature granules were only filled with rough dense specks and had a distinct limiting membrane. Eventually The acinar secretory granules of C. suaveolens were seen moderate at the light and ultrastuctural level, those of C. lasiura were strong dense at the light microscopic level and dense at the ultrastructural level.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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