In order to detect constituents with similar actions to rutin in the genus Lespedeza plants growing in Korea, twelve species were collected in Chung Buk and Kyung Ki Provinces and subjected to systematic extraction. When the extract was examined for flavonoid by adding flavonoid reagents, all the species gave positive cofirmatory tests. The examination of the flavonoid consitituents by T.L.C. gave the following results: as rutin-like constituents, quercetin was detected in L. cyrtobotrya, L. maritima and L. bicolor var. melanantha and eriodictin-like constituents were detected in seven species. Of those twelve species, five species, L. cuneata, L. cyrtobotrya, L. maritima, L. bicolor var. melanantha and L. patentibicolor were found to contain kaempferol. All of them appear to contain lespedin and eriodictiol.
The effects of dietary buckwheat vegetables on the in vitro HMG-CoA reductase activity and lipids profiles of serum and liver in rats were evaluated . Buckwheat vegetables were cultivated in the range of 1-15cm of the plant height and dried. The content of rutin in the dried vegetables did not varied largely with the differences in the height of the vegetables. The water extract from buckwheat vegetables activited in vitro HMG-CoA reductase, activity up to 150% of control. Male rats were fed on purified diets. supplemented with0.12% cholesterol, containing dried buckwheat vegetables(BWV, 5% of diet) or rutin 90.25% of diet) . Dietary BWV and rutin, compared with basal diet tended to decrease the concentration of serum cholesterol. The ratio of HDL-cholesterol to total cholesterol were higher slightly in the rutin -fed group than in the other groups. The concentration of serum triacylglycerol was lower markedly in the rutin -fed groups than in the control groups, and BWV group being intermediate . The concentration of liver cholesterol was lower significantly in the BWV group than in the other groups. The results show an effective cholesterol-lowering action of buckwheat vegetables in serum and liver of rats fed on cholesterolemic diets. and that the hypocholesterolemic effects of buchwheat vegetables re not likely to be due to the modulation of the cholesterol synthesis rate.
기능성 물질로서 다양한 생리적 기능을 가진 ascorbic acid는 구조적으로 불안정하여 쉽게 산화되는데 이러한 ascorbic acid의 산화를 억제하기 위해 리포좀에 순수한 ascorbic acid를 봉입시켜 안정한 리포좀을 제조하였다. 안정한 리포좀의 제조를 위해 cholesterol이나 $\beta$-sitosterol 이 리포좀의 안정화에 미치는 영향을 측정하였으며 ascorbic acid의 산화방지를 위해 항산화제로 butylated hydroxytoluene(BHT), tertiary butylhydroquinone(TBHQ)와 $\alpha$-glycosyl rutin, natural concentrated tocopherol을 사용하였다. 리포좀 제조시 cholesterol이나 $\beta$-sitosterol을 사용한 경우 ascorbic acid의 산화가 감소하였는데 이는 cholesterol이나 $\beta$-sitosterol이 리포좀의 이중막을 강화하여 봉입한 ascorbic acid의 방출을 감소시켜 산화를 방지하는 것으로 생각된다 또한 cholesterol의 농도가 0.3%인 경우 가장 안정한 리포좀이 생성됨을 알 수 있었다. 사용된 항산화제는 ascorbic acid에 대하여 모두 산화억제효과를 나타내었으며 tertiary butylhydroquinone, $\alpha$-glycosyl rutin, butylated hydroxytoluene, natura] concentrated tocopherol 순으로 우수함을 보였다. 그러나 제약 및 화장붐에 사용되는 ascorbic acid의 산화억제에는 효과가 가장 좋은 합성 항산화제인 tertiary butylhydroquinone보다 천연물질에서 추출한 항산화제인 $\alpha$-glycosyl rutin이 더 적합할 것으로 생각된다.
Retinol에 대한 합성물질과 천연물질의 항산화력을 비교하였다. 수용성 합성 항산화제 tertiary butylhydroquulone(TBHQ)와 수용성 천연 항산화제 $\alpha$-glycosyl rutin($\alpha$-G rutin), licorice, pycnogenol, 지용성 합성 항산화제 butylated hydroxytoluene(BHT)와 지용성 천연 항산화제 $\alpha$-lipoic acid, ferulic acid, natural concentrated tocopherol(no-tocopherol)를 각각 0.0, 0.0l, 0.02, 0.05, 0.l0wt% 사용하여 리포좀에 봉입하였으며, 4$^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, 5$0^{\circ}C$에서 8주 동안 retinol의 잔류량 변화를 HPLC로 측정하였다. 사용된 항산화제는 retinol에 대하여 모두 산화억제효과를 나타내었으며, 수용성 항산화제는 licorice>pycnogenol>TBHQ>$\alpha$-G rutin 순으로, 지용성 항산화제는 $\alpha$-lipoic acid>BHT>no-tocopherol>ferulic acid 순으로 나타났다. 또한 $\alpha$-lipolc acid, BHT, licorice, pycnogenol을 흔합하여 retinol에 대한 항산화력 상승효과를 알아보았다. $\alpha$-lipoic acid와 BHT를 혼합하여 사용하였을 때 retinol에 대한 항산화력이 가장 좋게 나타났다.
Background: Rutin is decomposed by rutin-degrading enzymes (RDE) during the processing of buckwheat groats, resulting in a decrease in rutin content and a further increase in the bitterness of processed products. Thus, the present study aimed to examine RDE activity in groats and various tissues of domestic buckwheat varieties and to develop a method to reduce the loss of rutin during the groat processing. Methods and Results: RDE activity and isozymes patterns were determined in Tartary and common buckwheat. RDE activity, measured by quercetin production rate, was 273 and $70{\mu}g/g$ fresh weight/min in mature Tartary and common buckwheat groats, respectively. A total of six RDE isozymes were detected in mature groats of Tartary buckwheat on a non-denaturing gel. In Tartary buckwheat groats, RDE activity decreased by approximately 81 or 71% with roasting or steaming for 5 min respectively. As the roasting or steaming time increased to 30 min, RDE activity decreased by over 95%. These results indicated that RDE was inactivated in groats by roasting or steaming. When untreated Tartary buckwheat groats were kneaded with powder, RDE was activated and the quercetin production rate increased by 62%. However, when roasted groats were kneaded with powder, the quercetin production rate decreased by 93%, mainly due mainly to inactivation of RDE, as indicated by a decrease in band intensities of the six isozymes. Conclusions: These results suggested that the loss of rutin, due to RDE activity during processing, may be reduced by 71 to 100% by roasting or steaming groats for 5 to 30 min, due in large part to the inactivation of RDE isozymes.
본 연구에서는 최근 식생활의 서구화로 인해 발병률이 급증하고 있는 대장암의 진행을 억제하거나 감소시키고 인체 대장암 세포인 HT-29의 증식을 억제하며, 세포사멸을 유도하는 천연소재를 알아보기 위해서 flavonoid가 HT-29 인체 대장암 세포의 apoptosis 유도 및 기전에 미치는 영향을 알아보았다. MTT assay 결과 apigenin, rutin, naringenin, myricetin을 $100{\mu}M$ 농도로 처리하였을 때 62.71, 75.78, 74.24, 77.61%로 이 중 naringenin이 대장암 세포 성장에 억제 효과가 가장 높은 실험 결과를 나타내었다. Caspase-3 activity에서는 naringenin이 241.46%로 가장 높은 활성을 나타내었다. 이를 바탕으로 세포사멸과 관련된 유전자를 확인하고자 대장암 세포에 flavonoid인 apigenin, rutin, naringenin, myricetin에 $100{\mu}M$ 농도로 처리한 후 RTPCR을 실시한 결과, 세포사멸의 주요한 조절인자인 Bcl-2 family 단백질 중 Bcl-2는 rutin에 의해 감소되었고 Bax는 myricetin에 의해 증가하였으며, p53은 naringenin이 높게 발현되었다. 또한 western blotting을 통해 flavonoid인 apigenin, rutin, naringenin, myricetin에 $100{\mu}M$ 농도로 처리한 결과, Bcl-2 family 단백질과 더불어 세포사멸 조절에 중요한 역할을 하는 활성형인 cleaved caspase-3은 모두 증가하였고, 그중 myricetin이, PARP은 naringenin, E-cadherin은 rutin이 각각 높은 발현 양상을 나타내었다. 이번 실험 결과를 통해 flavonoid가 세포사멸의 주요한 조절 인자인 Bcl-2 family 단백질의 발현이나 caspase의 활성 등을 조절하여 암세포 사멸인자인 Bcl-2의 발현은 감소시키고 Bax, p53, PARP의 발현을 증가시키는 것을 통해 대장암 세포의 apoptosis를 유도하였다. 또한 암세포의 전이와 관련된 E-cadherin의 발현도 조절하는 것을 관찰하였다. 이상의 연구를 통해 flavonoid가 대장암 세포의 증식을 억제하는 효과가 있음을 확인하였으며, 세포사멸과 관련된 기전을 규명하였다. 이를 기초자료로 일상에서 쉽게 섭취할 수 있는 식품에 많이 존재하며 비교적 독성과 부작용이 적은 flavonoid를 이용한 천연 항암제 개발 가능성을 제시하였고, 추후 대장암의 암예방제 및 암치료제로 개발될 수 있도록 추가 연구 수행이 필요할 것으로 사료된다.
본 연구에는 메밀을 ${\alpha}$-amylase, ${\beta}$-amylase, glucoamylase 세 종류의 효소로 당화한 결과, 당도와 rutin, quercetin, 총 폴리페놀 함량이 증가하였고, 항산화 활성이 개선됨을 확인하였다. 당화 전 약 $1^{\circ}Brix$를 나타내던 메밀은 ${\alpha}$-amylase, ${\beta}$-amylase, glucoamylase로 당화하였을 때 최고 $10.27^{\circ}Brix$, $5.13^{\circ}Brix$, $11.13^{\circ}Brix$를 각각 나타내었다. Rutin과 quercetin의 함량도 당화 전보다 당화를 거치면서 증가하는 경향을 나타내었으며, ${\alpha}$-amylase로 당화하였을 때 rutin은 1.76배, quercetin은 2.09배 증가하였으며, ${\beta}$-amylase로 당화하였을 때 rutin은 1.58배 증가하였으며, glucoamylase로 당화하였을 때 rutin은 3.36배, quercetin은 6.58배 증가하였다. 총 폴리페놀과 DPPH radical 소거능을 측정한 결과, 당화를 하기 전과 비교하여 당화 후 총 폴리페놀 함량과 DPPH radical 소거능이 유의하게 증가하였다. 이러한 결과를 바탕으로 메밀의 당화는 메밀에 함유되어 있는 기능성 성분을 증가시켜 기능성 식품으로의 개발가능성을 높이는 것으로 판단된다.
본 연구에서는 한국형 프로바이오틱스와 볶은 쓴메밀을 배양하여 쓴메밀의 대표 성분인 rutin에서 quercetin으로 생물전환을 확인하였다. 프로바이오틱스 17종의 유전체 분석 결과 CBT BG7, LC5, LR5, LP3, LA1과 LGA1 등 6종에서 rutin에서 isoquercetin 전환에 관련된 α-rhamnosidase 유전자가 확인되었다. Isoquercetin에서 quercetin 전환에 관련된 β-glucosidase 유전자는 17종의 프로바이오틱스에서 모두 확인되었다. 17종의 프로바이오틱스 중 CBT BG7, LR5, LP3, LA1, LGA1과 ST3 등 6종의 균주가 배양 7일 후 rutin에서 quercetin으로 최대 21.5 ± 0.3%까지 생물전환 하였다. 생물전환 시간 단축을 위하여 프로바이오틱스와 복합 효소 Cellulase KN®을 함께 배양하였다. 그 결과, 효소 첨가 없이 가장 높은 생물전환율 21.5 ± 0.3%를 보였던 CBT LA1 균주는 효소와 함께 배양 1일 후 84.6 ± 0.5%의 생물전환율을 보였다. 특히 CBT ST3 (96.2 ± 0.4%), SL6 (90.1 ± 1.4%) 그리고 LP3 (90.0 ± 0.4%) 균주는 quercetin으로 90% 이상의 높은 전환율을 보였다. 추가로 프로바이오틱스 생물전환능이 우수하여 quercetin 함량이 높은 배양여액 동결건조물은 RAW264.7 세포에서 LPS에 의해 유도된 NO 생성 억제 효과를 보였다. 본 연구를 통해 한국형 프로바이오틱스와 효소를 조합하여 볶은 쓴메밀과 함께 배양하였을 때 rutin으로부터 항염증, 항산화, 항비만, 항당뇨 활성을 가지는 생리활성 물질 quercetin으로 생물전환이 증가하고 전환 시간이 단축됨을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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