Ginseng (Panax ginseng CA. Meyer) hairy root cultures, which are established via the infection of ginseng root discs with Rhizobium rhizogenes, have been used to construct profiles of both biomass growth and nutrient consumption in flask cultures. In a 250 mL shake flask culture, the maximum biomass was observed on the 59th day of the culture period, at 216.8 g (fresh wt) per liter or 11.4 g (dry wt) per liter. The hairy roots were determined to have a growth rate of 0.355 g-DW/g cells/day during the exponential growth phase and a maximum specific growth rate on day 7. Total ginseng saponin and phenolic compound contents were noted to have increased within the latter portion of the culture period. Linear correlations between increases in biomass weight and nutrient uptake were used to imply the conductivity yield $2.60g-DW/(L{\cdot}mS)$ and carbon yield 0.45 g-DW/(g sugar) in the 250 mL flask cultures. The biomass yield when two different nitrogen sources were used (ammonia and nitrate) was shown to remain approximately constant. at $0.47g-DW/(L{\cdot}mM\;NH_4$) and $0.33g-DW/(L{\cdot}mM\;NO_3$); it remained at these levels for 16 days with the ammonia. and for 24 days with the nitrate. The biomass yield when a phosphate source was used was also shown to remain approximately constant for 9 days, at $3.17g-DW/(L{\cdot}mM\;PO_4$), with an $R^2$ of 0.99.
This study was undertaken to investigate the influence of kinetin and 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid on the rate of growth, the contents of RNA, DNA, and protein. And also the effect of plant growth regulator on isoperoxidases in callus derived from root (root-callus) and petiole (petiolecallus) was investigated. The rate of growth in petiole-callus was higher than the rootcallus at 0.1 mg/l kinetin and 1mgfl 2,4-D. At 1mgll kinetic, the rate of growth increased, but at high concentration the rate of growth decreased fast. The contents of RNA, DNA and protein also increased, but it did not coincide with the increase of the growth rate of callus. The isoperoxidases of callus grown at various amounts of 2,4-D and kinetic occurred in an almost fashion, but those of root-callus appeared different from those of petiole-callus.
Kim Yun-Soo;Hahn Eun-Joo;Shin Cha-Gyun;Paek Kee-Yoeup
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.2
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pp.111-116
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2005
The two different ways to supply air inside the bioreactor were examined in the adventitious root cultures of Panax ginseng C.A. Meyer. First, the aeration rate varied at 0.05, 0.1, 0.2 and 0.3 vvm, respectively which were supplied during the whole culture period. Second, the amount of air supply was increased from 0.05 to 0.3 vvm at 10-day intervals in proportion to the root growth. Both the root growth and the ginsenoside accumulation were maximized to 175.8 g dry wt. of root growth and 4.3 mg/g dry wt. of ginsenoside accumulation when the aeration rate was increased gradually. The effect of the sparger pore size (15, 30 and $60\;{\mu}m$) in the bioreactor was also investigated, which suggested the greatest root growth (175.9 g dry wt.) in the $15{\mu}m$-sized sparger and the highest ginsenoside content (4.3 mg/g dry wt.) in the $60\;{\mu}m$ size. Finally, the diameter of a sparger ($15\;{\mu}m$-sized) varied at 1.5, 3.0, 5.0 and 8.0 cm, respectively. The highest root growth (191.9 g dry wt.) and the ginsenoside content (4.9 mg/g dry wt.) were obtained in the sparger diameter of 8.0 cm.
Kang, Young Min;Lee, Ka Youn;Kim, Mi Sun;Choi, Ji Eun;Moon, Byeong Cheol
Journal of agriculture & life science
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v.50
no.5
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pp.81-93
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2016
Rehmannia glutinosa(Gaertn.) DC. is a herbaceous perennial plant and belonging to the Scrophulariaceae and used as roots for medicinal part and purpose. R. glutinosa is and usually used for fresh rehmannia root or prepared rehmannia root. However, it is very difficult to propagate using the seeds because of lack germination so it is propagated using the vegetative method as the rootstock. Currently, propagation and harvesting using the rootstock of R. glutinosa has difficulties about production of the high quality and quantity in R. glutinosa because of root rot disease. To optimize in vitro cultures and to improve the rootstock and seedling of R. glutinosa after morphological and genetical determination, 5 plant culture media (MS, DJ, LS, QL, and WPM) were used in this study then WPM was selected for better growth, for multiplication condition(WPM + IAA 1.0 mg/L + IBA 0.5 mg/L), and for root enlargement condition(WPM + NAA 0.1 mg/L) of R. glutinosa. Based on these results, in vitro seedlings of R. glutinosa were transferred to soil for acclimation with environment adaptation and shown the positive effects about root enlargement and root formation. Therefore, it can be used for high quality of R. glutinosa production and production of the rootstock based on propagation using in vitro seedlings of R. glutinosa.
The effect of IBA and NAA on adventitious root cultures of Panax ginseng C.A. Mater were investigated. Results indicated differences in growth and development of the roots according to 5mg/L IBA and 2mg/L NAA. IBA resulted in a normal root development and a higher growth compared to NAA. The roots formed on NAA-containing media were shorter and thicker than those in IBA, showing a hypertrophy of the root tip. NAA induced more than 1.6 times higher ethylene production compared to IBA, which caused inhibition of the root growth. Under the ventilation, in the other hand, on difference was observed in ethylene concentration and the root growth between IBA and NAA treatments. Under ventilation ethylene production was not detected until 10 days of culture, while detected from the initial stage under on ventilation. The results suggested the importance of ventilation during the culture for the growth and development of ginseng adventitious roots.
A laboratory experiment was conducted to study the induction of constricting rings and test predation of Dactylaria brochopaga isolates against second stage juveniles (J2s) of Meloidogyne graminicola. Among the five fungal isolates, isolate D showed the greatest number of predatory rings and, consequently, trapped the maximum number of M. graminicola J2s in dual cultures. Another pot experiment was conducted to study the effect of D. brochopaga (isolate D) on the management of wheat root-knot disease. Applying a mass culture (10 g/pot) and a spore suspension of the fungus with and without cow dung manure to soil infested with 2,000 M. graminicola juveniles significantly improved plant height, root length, weights of shoots, roots, panicles and grains per hill compared to those in the control. Moreover, the fungus significantly reduced the number of root-knots, the number of egg masses, juveniles, and females per hill compared to those in the control. Bio-efficacy of the fungus was heightened when the mass culture and a spore suspensions were used in combination with cow dung manure to improve the plant growth parameters and reduce the number of root-knot and reproductive factors. Further investigations should be conducted to identify the impact of this fungus in the field.
Adventitious root culture was established in the Jawahar variety of Withania somnifera using MS basal medium supplemented with 0.5 (mg/l) IAA and 2.0 (mg/l) IBA. Root tips from germinated seedlings, MS0 maintained plants and adventitious roots were maintained in suspension medium (1/2 MS basal medium supplemented with 3% sucrose) for a period of 1 to 6 months. The weight gain in roots was noted and the withanolides were extracted from the dry roots using solvents petroleum ether, 50% ethanol and chloroform. The withanolides in the chloroform fractions of all root samples analyzed were compared using thin layer chromatographic analysis. Withanolide content in adventitious root sample was found to be superior compared to other roots at any given point of time during the 6month growth period.HPLC analysis of in vitro adventitious roots showed the presence of a new compound.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.35
no.4
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pp.995-1002
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2018
Hairy root culture of ginseng is industrially prospected because the cultivation period of ginseng is relatively long. In this study, the effect of medium concentration and sucrose concentration on hairy root culture of ginseng was evaluated. The optimization of ginseng hairy roots transformed by Agrobacterium rhizogene were performed liquid medium. The MS(Murashinge & Skoog basal medium) concentration was selected with 1/2 strength MS and the optimal sucrose concentration was determined at 2-3%(w/v). At the optimum culture condition, The yield (the ratio of weight of grown hairy root cultures to weight of fresh ginseng hairy roots) and production rate of ginseng root were 19.42 times and 5.73 g/l-day. The major ginsenosides were Rb group, Re and Rg1. The produced total ginsenoside content in the solid medium was 9.87 (mg/g) and increased 1.34 times in the liquid medium (13.23 mg/g). In solid culture, the contents of ginsenosides Rb, Re and Rg1 were 2.14, 3.65 and 1.87 mg/g, respectively. In liquid culture, the contents of ginsenosides Rb, Re and Rg1 were 3.54, 4.12 and 2.63 mg/g, respectively.
In bioreactor cultures of plants, inoculum density is an important factor affecting growth and proliferation of the plantlets. To maximize shoot growth and proliferation of grape rootstock '5BB' in bioreactors, inoculum density varied at 15, 30, 45 and 60 single nodes in a 3-liter scale balloon type bioreactor, respectively and cultured for 40 days. Results suggested that the growth and the photosynthesis of the plantlet were greatly affected by inoculum density in the bioreactor. The inoculum density of 45 nodes resulted in the greatest growth (910.4 mg/shoot FW, 764.4 mg/root FW) followed by 30 nodes. $CO_2$ assimilation rate, stomatal conductance, transpiration rate of the plantlet were also highest at the inoculum density of 45 nodes. Significant reduces in shoot and root growth (426.5 mg/shoot FW, 248.4 mg/root FW) were observed at the inoculum density of 60 nodes. When the inoculum density decreased by 15 nodes, plantlets were malformed due to hyperhydricity, resulting in the highest transpiration rate and the lowest $CO_2$ assimilation rate. The plantlets stressed by the inoculum density at 15 nodes and 60 nodes showed larger number and irregular shape of stomata compared to the plantlets inoculated with 45 nodes.
We have investigated the effect of culture conditions on tropane alkaloids (scopolamine, hyoscyamine) production in hairy root cultures of Hyoscyamus niger L. induced by Agrobacterium tumefaciens $A_4$T. SH medium was the best for tropane alkaloids production from the hairy root clones, HN18 and HN57. The optimum culture peroid was 5 weeks for HN18 clone and 6 weeks for HN57 clone, respectively. The optimum sucrose and dextrose concentrations in tropane alkaloids productivity were 3% and 2%, respectively. The growth of both HN18 and HN57 clones increased with as sucrose concentration increase up to 7% sucrose, but tropane alkaloid contents was significantly decreased. In the HN18 clone, the optimum concentration of sucrose for alkaloids productivity was 5% and those of dextrose was 2%. The productivity of tropane alkaloids for HN57 clone under dextrose treatments was quite a low level compared to sucrose treatments.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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