Malone, Emilia;Kopp, Mauricio Marini;Malone, Gaspar;Branco, Juliana Severo Castelo;Carvalho, Fernando Iraja Felix;Oliveira, Antonio Costa de
Journal of Crop Science and Biotechnology
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v.10
no.2
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pp.106-111
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2007
Increasing genetic variability with mutagenic agents has been broadly employed in plant breeding because it has the potential to alter one or more desirable traits. In this study, a molecular analysis assessed by Amplified Fragment Length Polymorphisms(AFLPs) and a morphological analysis based on seedlings subjected to aluminum stress were compared. Also, an analysis of allelic frequencies was performed to observe unique alleles present in the pool. Genetic distances ranging from 0.448 to 0.953 were observed, suggesting that mutation inducing was effective in generating variability. The genetic distances based on morphological data ranged from 0(genotypes 22 and 23) to 30.38(genotypes 15 and 29). In the analysis of allelic frequency, 13 genotypes presented unique alleles, suggesting that mutation inducing was also targeting unique sites. Mutants with good performance under aluminum stress(9, 15, 18 and 27) did not form the same clusters when morphological and molecular analyses were compared, suggesting that different genomic regions may be responsible for their better performance.
To develop rice (Oryza sativa L.) cultivars to be planted on salt-affected sites, cell lines with enhanced proline content and resistance to growth inhibition by Azetidine-2-carboxylic acid (AZCA), a proline analogue, were screened out among calli irradiated with gamma ray of 50, 70, 90, and 120 Gy. The calli had been derived from embryo culture of the cultivar Donganbyeo. Selected AZCA resistant lines that had high proline accumulation were used as sources for selection of NaCl resistant lines. To determine an optimum concentration for selection of NaCl resistant lines, Donganbyeo seeds were initially cultured on the media containing various NaCl concentrations (0 to 2.5%) for 40 days, and 1.5% NaCl concentration was determined as the optimum concentration. One hundred sixteen salt-tolerant (ST) lines were selected from bulked 20,000 seeds of the AZCA resistant $M_{3}$ seeds in the medium containing 1.5% NaCl. The putative 33 lines ($M_{4}$ generation) considered with salt-tolerance were further analyzed for salt tolerance, amino acid and ion contents, and expression patterns of the salt tolerance-related genes. Out of the 33 lines, 7 lines were confirmed to have superior salt tolerance. Based on growth comparison of the entries, the selected mutant lines exhibited greater shoot length with average 1.5 times, root length with 1.3 times, root numbers with 1.1 times, and fresh weight with 1.5 times than control. Proline contents were increased maximum 20%, 100% and 20% in the leaf, seed and callus, respectively, of the selected lines. Compared to control, amino acid contents of the mutants were 24 to 29%, 49 to 143%, 32 to 60% higher in the leaf, seed and callus, respectively. The ratio of $Na^{+}/K^{+}$ for most of the ST-lines were lower than that of control, ranging from 1.0 to 3.8 for the leaf and 11.5 to 28.5 for the root, while the control had 3.5 and 32.9 in the leaf and root, respectively. The transcription patterns for the P5CS and NHXI genes observed by RT-PCR analysis indicated that these genes were actively expressed under salt stress. The selected mutants will be useful for the development of rice cultivar resistant to salt stress.
This study examined the antioxidant activity of the dark purple rice seeds from the rice line, MGI079, derived from insertional mutagenesis. The contents of polyphenolic compounds were 1.3 and 1.9-fold higher in the MGI079-2-1 and MGI079-2-6 rice lines than in the donor cultivar MGI079. Flavonoid contents were 6.4-fold higher in the MGI079-2-1 line. The MGI079-2-1 line showed a 24.4-fold higher activity in DPPH free radical scavenging compared to the MGI079 line. The anthocyanin content of the MGI079-2-6 line was more than 106.4-fold higher than the MGI079 line and 1.4-fold higher than the Heugnam line. Anthocyanin content in colored rice grains was negatively correlated with Hunter's L, a, and b values, with the correlation coefficients of $-5.64^{**}$, $5.21^{**}$ and -1.15, respectively. The grain length/width of a mutant of MGI079 segregated to a medium and bold type compared to the medium type of MGI079. However, the 1,000 grain weight was decreased to 13.6~19.6 g compared to 19.8 g for MGI079. Amylose content of the endosperm was 5.6~23.8% higher than in the MGI079 line. The grain of mutants of MGI079 was distinguished by its starch characteristics. The higher antioxidant activity of the MGI079-2-1 and MGI079-2-6 lines indicated functional characteristics associated with high-value resources, so future breeding should focus on the development of pigments in colored rice in new varieties.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.84.2-85
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2003
Magnaporthee grisea causes the devastating blast disease of rice. Entensive research has been conducted on infection mechanisms, particularly on appressorium formation and penetration, of this fungus during the last decade. However, the role(s) of cell-wall-degrading enzymes (CWDEs) on pathogenesis is not clearly demonstrated at molecular level. Many CWDES in plant pathogenic fungi including M. grisea are redundant; that is, there are multiple genes encoding enzymes with a similar or overlapping spectrum of activities. It is laborious to isolate all of the genes encoding related enzymes and to construct mutants lacking all 9f them. Thus, we considered alternative strategies to address the role of CWDEs in pathogenesis. Since expression of CWDE genes Is repressed by a simple sugar, as the first step, we cloned a Snfl (sucrose non-fermenting) gene (MgSnf1) from M. grisea. The predicted amino acid sequence showed a high identity with other Snf1 genes from various fungi. To elucidate molecular function of MgSnf1, a transformant lacking MgSnf1 was created by targeted gene replacement. En glucose, sucrose, and xylan the MgSnf1 mutant grew normally but in pectin and complex media, it grew slower than wild type. Expression of various CWDEs in MgSnf1 mutant was investigated and found that expression of some CWDEs is repressed. However, no significant difference was observed in conidial germination, appressorium formation, and pathogenicity in MgSnf1 mutant. However, MgSnf1 functionally complemented a yeast MgSnf1 mutant. These results suggest that MgSnf1 is involved in regulation of CWDEs and MgSnf1 is dispensable in pathogenicity of M. grisea.
Brassinosteroids (BRs) are essential plant steroid hormones required for cell elongation, plant growth, development and abiotic and biotic stress tolerance. BRs are recognized by BRI1 receptor kinase that is localized in the plasma membrane, and the BRI1 protein will eventually autophosphorylate in the intracellular domain and transphosphorylate BAK1, which is a co-receptor in Arabidopsis thaliana. However, little is known of the role OsBRI1 receptor kinase plays in Oryza sativa, monocotyledonous plants, compared to that in Arabidopsis thaliana, dicotyledonous plants. As such, we have studied OsBRI1 receptor kinase in vitro and in vivo with recombinant protein and transgenic plants, whose phenotypes were also investigated. A OsBRI1 cytoplasmic domain (CD) recombinant protein was induced in BL21 (DE3) E.coli cells with IPTG, and purified to obtain OsBRI1 recombinant protein. Based on Western blot analysis with phospho-specific pTyr and pThr antibodies, OsBRI1 recombinant protein and OsBRI1-Flag protein were phosphorylated on Threonine residue(s), however, not on Tyrosine residue(s), both in vitro and in vivo. This is particularly intriguing as AtBRI1 protein was phosphorylated on both Ser/Thr and Tyr residues. Also, the OsBRI1 full-length gene was expressed in, and rescued, bri1-5 mutants, such as is seen in normal wild-type plants where AtBRI1-Flag rescues bri1-5 mutant plants. Root growth in seedlings decreased in Ws2, AtBRI1, and 3 independent OsBRI1 transgenic seedlings and had an almost complete lack of response to brassinolide in the bri1-5 mutant. In conclusion, OsBRI1, an orthologous gene of AtBRI1, can mediate normal BR signaling for plant growth and development in Arabidopsis thaliana.
Kim, Jong-Kun;Moon, Deok-Hun;Seo, Geon-Sik;Kang, Hee-Wan
The Korean Journal of Mycology
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v.39
no.3
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pp.231-234
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2011
This study was performed to develop new Hypsizygus marmoreus cultivars that have enhanced functional materials and improved physiological characteristics with mutagenesis by gamma ray irradiation. Protoplasts of H. marmoreus brown strain HYM-056 were irradiated by gamma ray for mutagenesis, and then 2,000 clones of mutants were randomly selected and the fruiting bodies were induced by bottle culture. Among them, 157 isolates with fast-growing, heavy and many fruiting body-producing were selected. The isolates were cultured in plastic bottle containing rice bran, barley hulls and fir sawdust to form the fruiting bodies. About 100 days after inoculation, characteristic of fruiting bodies were investigated. The isolates were divided into 6 groups based on color, shape and size of pileus, and length, diameter, number and weight of stipe. In addition, the genetic variation of the isolates was analyzed by URP-PCR fingerprinting.
Plant metabolomics is a plant biology field for identifying all of the metabolites found in a certain plant cell, tissue, organ, or whole plant in a given time and conditions and for studying changes in metabolic profiling as time goes or conditions change. Metabolomics is one of the most recently developed omics for holistic approach to biology and is a kind of systems biology. For holistic approach, metabolomics frequently uses chemometrics or multivariate statistical analysis of metabolic profillings. In plant biology, metabolomics is useful to determine functions of genes often in combination with DHA microarrays by analyzing tagged mutants of the model plants Arabidopsis and rice. This review paper attempted to introduce basic concepts of metabolomics and practical uses of multivariate statistical analysis of metabolic profiling obtained by $^1$H HMR and Fourier transform infrared spectrometry.
Park, Young-Hie;Kim, Tae-Heun;Lee, Hyun-Suk;Kim, Kyung-Min;Sohn, Jae-Keun
Korean Journal of Breeding Science
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v.42
no.4
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pp.413-418
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2010
A total of 424 plants was regenerated from the seed-culture of a rice cultivar, 'Ilpum'. The regenerated plants were grown in a greenhouse. The 297 plants with high fertility were selected among 424 plants. The harvested seeds from each plant were planted to each line at experiment field in 2008 and 2009. The each line was evaluated for the agronomic and morphological traits, also. The 64 lines (21.5%) showed significant differences in agronomic and morphological traits from donor cultivar 'Ilpum' among 297 lines. The heading date different from donor cultivar 'Ilpum' showed highest frequency in 297 lines, and accounts for 9.1% (29 lines). The phenotype of opaque endosperm and rolling leaf account for 1.7% and 1.3% in 297 lines, respectively. The genetic segregation was observed in dwarf/semi-dwarf, rolling leaf and opaque endosperm at $S_1$ generation, but not in $S_2$ generation. These results suggest that the mutant derived from a tissue-culture will be one of the promising genetic resources, due to its wide variation and high frequency of mutation, comparatively.
Several high protein mutant lines(M4 plant generation, 1974) obtained from X-ray irradiated Jinheung variety were examined at three different locations for their agronomic characters, protein and grain yields. On the other hand, high protein-short culmed-early maturity mutant line No. 398 (M$_{10}$ plant generation, 1974) induced from Hokwang was crossed back to its mother to investigate the gene(s) controlling protein and its pleiotropic relation to other mutated characters. Although variation of protein percent of mutant lines from Jinheung was comparatively large depending on year and location, most of the high protein mutant lines had higher protein yield per unit area than the mother variety and their grain yields were equal to or better than the mother, being resistant to both leaf and neck blast. They were several days earlier-maturing and had shorter-culm except one mutant line. The culm length and heading date of F$_1$ between high protein mutant 398 and its mother Hokwang were intermediate. Accurate assessment of segregation of culm length and heading date in F$_2$ generation and protein percent in F$_3$ seeds will be conducted in 1975.
Kim, Suk-Weon;Kwon, Yong-Kook;Kim, Jong-Hyun;Liu, Jang-R.
Journal of Plant Biotechnology
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v.37
no.1
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pp.12-24
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2010
Plant metabolomics is a research field for identifying all of the metabolites found in a certain plant cell, tissue, organ, or whole plant in a given time and conditions and for studying changes in metabolic profiling as time goes or conditions change. Metabolomics is one of the most recently developed omics for holistic approach to biology and is a kind of systems biology. Metabolomics or metabolite fingerprinting techniques usually involves collecting spectra of crude solvent extracts without purification and separation of pure compounds or not in standardized conditions. Therefore, that requires a high degree of reproducibility, which can be achieved by using a standardized method for sample preparation and data acquisition and analysis. In plant biology, metabolomics is applied for various research fields including rapid discrimination between plant species, cultivar and GM plants, metabolic evaluation of commercial food stocks and medicinal herbs, understanding various physiological, stress responses, and determination of gene functions. Recently, plant metabolomics is applied for characterization of gene function often in combination with transcriptomics by analyzing tagged mutants of the model plants of Arabidopsis and rice. The use of plant metabolomics combined by transcriptomics in functional genomics will be the challenge for the coming year. This review paper attempted to introduce current status and prospects of plant metabolomics research.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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