새로운 도열병균의 생태형에 대하여 감수성이 높은 수도 통일계 품종 밀양 23호의 도열병의 발생경과와 발생양상에 미치는 시비수준의 영향을 구명하기 위하여 이 연구를 시도하였다. 그 동안에 얻은 연구 결과는 다음과 같다. 대체로 시비수준이 높아짐에 따라 밀양 23호는 도열병에 대하여 감수성이 더욱 높아지며 발병과 시비 수준사이에 밀접한 관계가 인정되었다. 이와 같은 관계는 마디도열병이나 이삭목도열병의 발생보다도 잎도열병 발생에 있어서 더욱 뚜렷하게 나타난다. 시비수준이 낮은 경우에도 마디도열병이냐 목도열병이 상당히 많이 발생하며 시비수준이 높은 경우의 마디 또는 이삭목도열병의 발생과 차이가 크지 않았다. 따라서 시비수준을 조절하므로서 마디 또는 목도열병을 회피시킨다는 것은 불가능할지 모르며 또한 잎도열병의 발생상으로부터 목도열병을 예찰한다는 것도 곤란한 일이라 생각된다.
Rice blast caused by Pyricularia oryzae, which is a major threat to food security worldwide, markedly decreases the yield of rice. Some rhizobacteria called 'plant growth-promoting rhizobacteria' inhibit plant pathogens and improve plant growth by secreting iron-chelating siderophores. The decreased availability of iron adversely affects the survival of pathogens, especially fungal pathogens, in the rhizosphere. This study aimed to determine the morphological diversity of siderophore-producing bacteria, analyze the type of siderophores produced by the bacteria, and examine their growth-inhibitory activity against Pyricularia oryzae. The rhizobacteria were isolated from the rhizosphere of Sembada Hitam variety of black rice plants in Pakem, Sleman, Yogyakarta, Indonesia. In total, 12 distinct isolates were screened for the production of siderophores. It was found that 9 out of 12 bacteria produced siderophore and most of them were Gram positive bacteria. The best siderophore-producing isolates with different type of siderophore were used in further studies. The IS3 and IS14 isolates were found to be the best siderophore producer that produced hydroxamate and mixed type of hydroxamate-carboxylate type of siderophore, respectively. In the dual culture assay, IS14 showed a strong antagonistic effect against Pyricularia oryzae by the 81.17% inhibition.
한국식물학회 1999년도 제13회 식물생명공학심포지움 New Approaches to Understand Gene Function in Plants and Application to Plant Biotechnology
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pp.41-44
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1999
Magnaporthe grisea (Hebert) Barr (anamorph: Pyricularia grisea) is a typical heterothallic Ascomycete and the causal agent of rice blast, one of the most destructive diseases on rice (Oryza sativa L.) worldwide. The interactions between cells of the pathogen and those of the host involve a complex of biological influences which can lead to blast disease. The early stages of infection process in particular may be viewed as a sequence of discrete and critical events. These include conidial attachment, gemination, and the formation of an appressorium, a dome-shaped and melanized infection structure. Disruption of this process at any point will result in failure of the pathogen to colonize host tissues. This may offer a new avenue for developing innovative crop protection strategies. To recognize and capture such opportunities, understanding the very bases of the pathogenesis at the cellular and molecular level is prerequisite. Much has been learned about environmental cues and endogenous signaling systems for the early infection-related morphogenesis in M. grisea during last several years. The study of signal transduction system in phytopathogenic filamentous fungi offers distinct advantages over traditional mammalian systems. Mammalian systems often contain multiple copies of important genes active in the same tissue under the same physiological processes. Functional redundancy, alternate gene splicing, and specilized isoforms make defining the role of any single gene difficult. Fungi and animals are closely related kingdoms [3], so inferences between these organisms are often justified. For many genes, fungi frequently possess only a single copy, thus phenotype can be attributed directly to the mutation or deletion of any particular gene of interest.
Severity of panicle blast disease on the leading cultivars of rice was investigated at nine locations of Korea during summer in 1993 with frequent raining and low temperature conditions. Incidence of panicle blast was 26% on Jinmibyeo, 23% on Chuncheongbyeo and 40% on Odaebyeo. Race distribution of Pyricularia grisea was examined from 1993 to 1994. A total of 1,098 isolates of the fungus obtained from the blast nurseries and framers; fields were screened using Korean differential varieties. Twenty one races were identified in 1993 and 19 races in 1994. KI-181, KJ-103, KJ-104, KI-241 and KI-209 were identified as new races, and KJ-301 (15%), KJ-201 (13%), KJ-105 (12%) and KI-409 (12%) were major races during 1993 and 1994. Race KI-197, which has a wide spectrum of virulence on rice cultivars, was isolated in a ratio of 8.3% and evenly distributed in the whole country. Some of the major and newly identified races during 1993∼1994 were used for spray-inoculation on leading cultivars and differential varieties in a greenhouse. We found that most of the cultivars were resistant to the major races, KJ-301 and KI-409, but were very susceptible to the new races, KI-241, KI-209, KI-181 and KJ-103.
벼도열병균은 벼의 주요 병해인 벼도열병의 원인균이다. 식물병원균의 침입 시 식물체로부터 발생하는 ROS는 식물의 방어기작으로 중요하며, 특히 아미노산의 하나인 methionine은 ROS에 의해 산화되어 methionine sulfoxide로 변화될 수 있다. 식물병원균은 식물체로 부터의 ROS에 의한 산화반응을 회피하기 위해 methionine sulfoxide reductase B (MSRB)와 같은 항산화 효소를 가지는데 본 연구에서는 벼도열병균에서의 MSRB 유전자를 동정하고 분자적 특성을 살펴보았다. MSRB 유전자는 벼도열병균의 게놈 상에 단일 유전자로 존재하며 과산화수소 처리에 의해 유전자발현이 다소 증가하는 경향을 보였다. 이러한 결과로 MSRB 유전자는 벼도열병균의 항산화 기작에 관여할 가능성이 높다고 판단된다.
A 340-bp chitin synthase gene(CHS) fragment was cloned from the genomic DNA of Pyricularia oryzae using a PCR process with two primer DNAs corresponding to highly conserved sequences within fungal CHS genes. The entire DNA nucleotide sequences of the cloned DNA fragment were determined and analyzed. The amino acid sequences deduced from the nucleotide sequence of the amplified DNA fragment showed 86% homology to that of the Aspergillus fumigatus CHSE gene (9). Using this PCR-amplified DNA, about 2.3 kb of including the PCR fragment of CHSE gene was cloned from genomic library.
수도품종 농백, 진흥, 낙동, 태백 등 4품종과 도열병균 KJ-101과 KJ-301의 2race를 사용하여 peroxidase 활성증가와 저항성과의 관계를 관찰하였다. peroxidase 활성은 수도유균가 성장할수록 모든 품종에서 증가되는 경향은 있었으나 품종간 차이는 크지 않았다. 도열병균을 접종 후 시간이 경과함에 따라 이병 잎에서는 무접종 건전잎보다 효소활성이 높았고 접종된 균주에 비친화적인 품종보다 발병이 심한 친화적 품종에서 더욱 높았다. 전기영동법에 의한 peroxidase pattern은 이병잎에서는 도열병균의 peroxidase band를 관찰할 수 없었다. 질소시비량을 증가시켰을 지라도 peroxidase 활성은 변함이 없었다.
Histone methylation plays important roles in regulating chromatin dynamics and transcription in eukaryotes. Implication of histone modifications in fungal pathogenesis is, however, beginning to emerge. Here, we report identification and functional analysis of a putative JmjC-domain-containing histone demethylase in Magnaporthe oryzae. Through bioinformatics analysis, we identified seven genes, which encode putative histone demethylases containing JmjC domain. Deletion of one gene, MoJMJ1, belonging to JARID group, resulted in defects in vegetative growth, asexual reproduction, appressorium formation as well as invasive growth in the fungus. Western blot analysis showed that global H3K4me3 level increased in the deletion mutant, compared to wild-type strain, indicating histone demethylase activity of MoJMJ1. Introduction of MoJMJ1 gene into ${\Delta}Mojmj1$ restored defects in pre-penetration developments including appressorium formation, indicating the importance of histone demethylation through MoJMJ1 during infection-specific morphogenesis. However, defects in penetration and invasive growth were not complemented. We discuss such incomplete complementation in detail here. Our work on MoJMJ1 provides insights into H3K4me3-mediated regulation of infection-specific development in the plant pathogenic fungus.
잎도열병의 발생은 잎도열병병반수조사 4일전까지의 2개반순의 분생포자비산수와 고도의 정의 상관이 있었고 이삭도열병발생은 진흥품종에서 출수기 분생포자비산수와 정의 상관관계였다. 수잉기에 있어서 잎도열병의 병엽수와 이삭도열병발생은 고도의 정의 상관, 지엽의 규화도와는 부의 상관이 있었다. I-KI법은 30분이내에 도열병균 침입에 의한 감염부위를 알 수 있어 잎도열병의 초발은 4일전에 예찰이 가능하였으며 I-KI법과 잎도열병발생과의 양적인 관계를 구명하는 것도 가능한 것으로 나타났다.
도열병은 곰팡이 균(Magnaporthe grisea)에 의해 발병되는 것으로, 벼 수확량에 가장 큰 손실을 일으킨다. 본 연구에서는 벼 도열병 저항성 신호전달 체계에 관여하는 유전자를 분리하기 위하여 DEB(1, 3-Butadiene diepoxide) 처리를 통하여 벼 도열병 저항성 품종인 RIl260의 돌연변이 2,000여 종을 생산하고, 이들로부터 병 저항성 변이 개체를 조사하였다. 돌연변이 집단에서 백변종 돌연변이의 비율은 6.7%로 매우 높았으며, 이것은 DEB 처리에 의해서 생산된 집단 내에 돌연변이가 높은 빈도로 발생하였음을 보여준다. 돌연변이 집단의 병 저항성 분석을 통하여 완전히 혹은 부분적으로 벼 도열병에 저항성을 상실한 29개의 돌연변이체를 분리하였다. 이들 중에서 가장 심한 이병성 라인으로 확인된 M5465는 DNA 혼성화 반응 분석을 사용하여 분석하였으며, RIL260 품종에서 도열병 병 저항성과 밀접한 관련을 갖고 있는 것으로 보고된 Pi5(t) 유전좌위의 DNA 표지들이 실험에 사용되었다. 이 결과들은 M5465에서 Pi5(t) 유전좌위 내부에 DNA의 큰 결손 및 재배열이 있었음을 보여준다. 분리된 병 저항성 돌연변이 라인들은 Pi5(t)에 의해 매개된 도열병 저항성의 신호 전달 과정을 이해하는 데 유용하게 사용 될 수 있을 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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