Kim, Cheol-Hyeon;Yoo, Chul-Gyu;Lee, Choon-Taek;Han, Sung-Koo;Shim, Young-Soo;Kim, Young-Whan
Tuberculosis and Respiratory Diseases
/
v.45
no.5
/
pp.984-991
/
1998
Background: The 3p deletions has been shown to be the most frequent alteration in lung cancers, strongly suggesting the presence of at least one tumor suppressor gene in this chromosomal region. However, no solid candidate for the tumor suppressor gene(s) on 3p has as yet been identified. Recent attention has focused on a candidate 3p14.2 tumor suppressor gene, FHIT, which is located in a region that is homozygously deleted in multiple tumor cell lines and disrupted by the hereditary renal cell carcinoma t(3;8) chromosomal translocation breakpoint FHIT also spans FRA3B, the most common fragile sites in the human genome. In the present study, we have analyzed expression of the FHIT gene in lung cancer cell lines. Methods: RNA from 21 lung cancer cell lines (16 NSCLC, 5 SCLC) were extracted using standard procedures. Random-primed. first strand cDNAs were synthesized from total RNA and PCR amplication of coding exons 5 to 9 was performed. The RT-PCR products were electrophoresed in 1.5% ethidium bromide-stained agarose gels. Results: 12 of 21(57%) lung cancer cell lines exhibited absent or aberrant FHIT expression [7 of 16(44%) of non-small cell lung cancer and 5 of 5(100%) of small cell lung cancer cell lines]. Conclusion: The result shows that abnormal transcription of the FHIT gene is common in human lung cancer cell lines, especially in small cell lung cancer.
Although various raw plant materials have been demonstrated to exert anti-obesity effects to a greater or lesser extent in both humans and animals when they are used to supplement the diet, it has not been shown extensively that they influence adipocyte cell differentiation involving lipid metabolic gene expressions. Using a well-established 3T3-L1 preadipocyte differentiation system, we decided to look into molecular and cellular event occurring during adipocyte differentiation when raw plant materials aye included in the process, in an effort to demonstrate the potential use of a screening system to define the functions of traditionally well-known materials. To these ends, the effects of ethanol (EtOH) or EtOH/distilled water (DW) extracts of Wax Gourd were examined using cytochemical and molecular analyses to determine whether components of the extracts modulate adipocyte differentiation of 3T3-Ll preadipocytes in vitro. The cytochemical results demonstrated that EtOH or EtOH/DW extracts did not affect lipid accumulation and cell proliferation, although the degree of lipid accumulation was influenced slightly depending on the extract. EtOH extract was highly effective in apoptotic induction during differentiation of 3T3-Ll preadipocytes (p<0.05). Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis of lipoprotein lipase (LPL), Uncoupling protein (Ucp) 2, 3 and 4 also showed that while LPL expression was not influenced, Ucp2, 3 and 4 were up regulated in the EtOH extract-treated group and down regulated in the EtOH/DW extract-treated group. These changes in gene expressions suggest that the components in different fractions of Wax Gourd extracts may modulate lipid metabolism by either direct or indirect action. Taking these results together, it was concluded that molecular and cellular analyses of adipocyte differentiation involving lipid metabolic genes should facilitate understanding of cellular events occurring during adipocyte differentiation. Furthermore, the experimental scheme and analytical methods used in this study should provide a screening system for the functional study of raw plant materials in obesity research.
Productivity of a rice plant is greatly influenced by salt stress. One of the ways to achieve tolerance to salinity is to transfer genes encoding protective enzymes from other organisms, such as microorganisms. The bacterial gene, mtlD, which encodes mannitol-1-phosphate dehydrogenase (Mtl-DH), was introduced to the cytosol of a rice plant by an imbibition technique to overproduce mannitol. The germination and survival rate of the imbibed rice seeds were markedly increased by transferring the mtlD gene when it was delivered in either a pBIN19 or pBmin binary vector. When a polymerase chain reaction was performed with the genomic DNAs of the imbibed rice leaves as a template and with mtlD-specific primers, several lines were shown to contain an exogenous mtlD DNA. However, a reverse transcription (RT)-PCR analysis revealed that not all of them showed an expression of this foreign gene. This paper demonstrates that the growth and germination of rice plants transiently transformed with the bacterial gene, mtlD, are enhanced and these enhancements may have resulted from the experssion of the mtlD gene. The imbibition method empolyed in this study fulfills the requirements for testing the function of such a putative gene in vivo prior to the production of a stable transgenic plant.
An efficient molecular breeding technique for coffee plants was developed. In order to produce transgenic coffee plants, we established a model transformation procedure via Agrobacterium method. We isolated a gene encoding a protein possessing 7-methylxanthine methyltransferase (theobromine synthase) activity, and it was designated as Coffea arabica 7-methylxanthine methyl transferase; CaMXMT. Using this clone, we produced transgenic coffee plants, in which the expression of CaMXMT is suppressed by double-stranded RNA interference (RNAi) andlor anti-sense methods. The expression pattern of CaMXMT was analyzed by reverse transcription-PCR method and we found that, in the transformed cell lines, the level of transcripts were obviously suppressed by RNAi. The endogenous level of caffeine in the transformed cells was dramatically reduced in comparison with non-transformed cells.
Histone deacetylation mediated by histone deacetylases (HDACs) has been reported as one of the epigenetic mechanisms associated with tumorigenesis. The poor responsiveness of anticancer drugs found with cholangiocarcinoma (CCA) leads to short survival rate. We aimed to investigate mRNA expression of HDACs class I and II, and the effect of HDAC inhibitors, suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA) and valproic acid (VPA), in CCA in vitro. Expression of HDACs was studied in CCA cell lines (M213, M214 and KKU-100) and an immortal cholangiocyte (MMNK1) by semi-quantitative reverse transcription-PCR. SAHA and VPA, as well as a classical chemotherapeutic drug 5 -fluorouacil (5-FU) were used in this study. Cell proliferation was determined by sulforhodamine assay. $IC_{50}$ and $IC_{20}$ were then analyzed for each agent and cell line. Moreover, synergistic potentional of VPA or SAHA in combination with 5-FU at sub toxic does ($IC_{20}$) of each agent was also evaluated. Statistic difference of HDACs expression or cell proliferation in each experimental condition was analyzed by Student's t-test. The result demonstrated that HDACs were expressed in all studied cell types. Both SAHA and VPA inhibited cell proliferation in a dose-dependent manner. Interestingly, KKU-100 which was less senstitive to classical chemotheraoeutic 5-FU was highly was sensitive to HDAC inhibitors. Simultaneous combination of subtoxic doses of HDAC inhibitors and 5-FU signiicantly inhibited cell proliferation in CCA cell lines compared to single sgent treatment($P{\leq}0.01$), while sequentially combined treatments were less effective. The present study showed inhibitory effects of HDACIs on cell proliferation in CCA cell lines, with synergistic antitumor potential demonstrated by simultaneous combination of VPA or SAHA with 5-FU, suggesting a novel alternative therapeutic strategy in effective treatment of CCA.
Park, Sang-Jung;Cho, Jang-Eun;Kim, Yoon-Suk;Cho, Sang-Nae;Lee, Hye-Young
Biomedical Science Letters
/
v.18
no.3
/
pp.201-209
/
2012
Apoptosis is a physiological programmed cell death process. Tubercle bacilli inhibit apoptosis of alveolar macrophages and phagolysosome fusion. We investigated whether the Bcl-2 family anti-apoptotic member, Bfl-1/A1, plays an important role in the anti-apoptotic process during mycobacterial infection. PMA-treated human monocytoid THP-1 cells were infected with mycobacteria (H37Rv, BCG, and K-strain) at a multiplicity of infection (MOI) of 10 for 0, 1.5, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 48, or 72 h. In addition, PMA-treated THP-1 cells were pretreated with specific inhibitors for 45 min before stimulation with mycobacteria at an MOI of 10 for 4 h. After the indicated time, the cells were subject to reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis, and a Bfl-1/A1-specific Western blot was performed. In PMA-differentiated THP-1 cells, the expression level of Bfl-1/A1 mRNA was increased by Mycobacterium tuberculosis (MTB) H37Rv infection. The mRNA level of Bfl-1/A1 peaked 3 h after MTB infection, then declined gradually until 9 h. However, Bfl-1/A1 mRNA induction gradually re-increased from 24 h to 72 h after MTB infection. No difference in Bfl-1/A1 expression was detected following infection with MTB H37Rv, K-strain, or M. bovis BCG. These results were not dependent on mycobacterial virulence. Moreover, mRNA levels of other anti-apoptotic molecules (Mcl-1, Bcl-2, and Bcl-xL) were not increased after MTB H37Rv or K-strain infection. These results suggest that mycobacteria induce the innate immune host defense mechanisms that utilize Bfl-1/A1 molecules at early time points, regardless of virulence.
Xiang, Hong-Gang;Hao, Jun;Zhang, Wen-Jie;Lu, Wen-Jie;Dong, Ping;Liu, Ying-Bin;Chen, Lei
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
/
v.16
no.16
/
pp.6851-6855
/
2015
Background: This study aimed to examine the clinical significance of fatty acid synthase (FASN) expression in gastric cancer (GC), and investigate any prognostic role. Materials and Methods: FASN expression was assessed in gastric cancers by immunohistochemistry using 60 paraffin-embedded tissue specimens, and clinical data were collected by retrospective chart review. Moreover, FASN mRNA expression in 15 fresh resected specimens was evaluated by the reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Immunohistochemical staining of PTEN was performed to assess the correlation of PTEN with FASN in gastric cancer. Results: Increased expression of FASN was noted in gastric cancers. The frequency of FASN gene amplification was also significantly higher in gastric cancer than in adjacent normal tissue. FASN expression in human gastric cancer tissues was significantly correlated with patient TNM stage and peritoneal dissemination (p<0.05). Moreover, higher FASN expression significantly correlated with shorter overall survival (p<0.05). Here, upregulation of FASN negatively correlated with PTEN expression in gastric cancer. Conclusions: These findings indicate that FASN expression is upregulated in gastric cancer, and increased FASN may be critical to th peritoneal metastasis and survival. Our results suggest that FASN upregulation and PTEN downregualtion may be involved in peritoneal dissemination for gastric cancer progression.
Objectives: Expression of vascular endothelial growth factor C (VEGF-C)and vascular endothelial growth factor feceptor-3 (VEGFR-3) in laryngeal squamous carcinoma and its relationship to lymph node metastasis were investigated. Methods: VEGF-C and VEGFR-3 gene expression in 30 cases of normal laryngeal mucosa tissue (NLM), primary laryngeal carcinoma cell carcinomas (PLC) and cervical lymph nodes (CLN) was examined by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Protein levels of VEGF-C expression were determined by immunohistochemical staining in 60 cases of PLC. Results: Expression of VEGF-C and VEGFR-3 different among NLM, PLC and CLN in the same patient. In PLC, expression was significantly higher in lymph node positive group than in the lymph node negative group and associated with histological grade of differentiation; Expression of VEGF-C and VEGFR-3 was not linked with age, sex, site or T stage. Conclusions: A close correlation was found between VEGF-C/VEGFR-3 expression and lymph node metastasis in PLC, suggesting a role in metastasis of laryngeal carcinomas.
Kang, Dong-Geun;Lee, Hyun Jae;Kim, Kun Tae;Hwang, Sun-Chul;Lee, Choong Jae;Park, Jin Sung
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
/
v.21
no.2
/
pp.197-204
/
2017
In the present study, we tried to examine whether oleanolic acid regulates the activity, secretion and gene expression of matrix metalloproteinase-3 (MMP-3) in primary cultured rabbit articular chondrocytes, as well as the production of MMP-3 in the knee joint of rat to evaluate the potential chondroprotective effect of oleanolic acid. Rabbit articular chondrocytes were cultured in a monolayer, and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to measure interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$)-induced gene expression of MMP-3, MMP-1, MMP-13, a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs-4 (ADAMTS-4), ADAMTS-5 and type II collagen. In rabbit articular chondrocytes, the effects of oleanolic acid on IL-$1{\beta}$-induced secretion and proteolytic activity of MMP-3 were investigated using western blot analysis and casein zymography, respectively. The effect of oleanolic acid on in vivo MMP-3 protein production was also examined, after intra-articular injection to the knee joint of rat. The results were as follows: (1) oleanolic acid inhibited the gene expression of MMP-3, MMP-1, MMP-13, ADAMTS-4, and ADAMTS-5, but increased the gene expression of type II collagen; (2) oleanolic acid reduced the secretion and proteolytic activity of MMP-3; (3) oleanolic acid suppressed the production of MMP-3 protein in vivo. These results suggest that oleanolic acid can regulate the activity, secretion and gene expression of MMP-3, by directly acting on articular chondrocytes.
Objectives: Endodontically treated teeth with insufficient tooth structure are often restored with esthetic restorations. This study evaluated the cytotoxicity and biological effects of yttria partially stabilized zirconia (Y-TZP) blocks in combination with several dental cements. Materials and Methods: Pairs of zirconia cylinders with medium alone or cemented with three types of dental cement including RelyX U200 (3M ESPE), FujiCEM 2 (GC), and Panavia F 2.0 (Kuraray) were incubated in medium for 14 days. The cytotoxicity of each supernatant was determined using 3-(4,5-dimethylthiazole- 2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assays on L929 fibroblasts and MC3T3-E1 osteoblasts. The levels of interleukin-6 (IL-6) mRNA were evaluated by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), and IL-6 protein was evaluated by enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA). The data were analyzed using one-way ANOVA and Tukey post-hoc tests. A p < 0.05 was considered statistically significant. Results: The MTT assays showed that MC3T3-E1 osteoblasts were more susceptible to dental cements than L929 fibroblasts. The resin based dental cements increased IL-6 expression in L929 cells, but reduced IL-6 expression in MC3T3-E1 cells. Conclusions: Zirconia alone or blocks cemented with dental cement showed acceptable biocompatibilities. The results showed resin-modified glass-ionomer based cement less produced inflammatory cytokines than other self-adhesive resin-based cements. Furthermore, osteoblasts were more susceptible than fibroblasts to the biological effects of dental cement.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.