Myo-inositol monophosphate phosphatase (IMPP) is a key enzyme in the phosphoinositide cell-signaling system. This study found that incubating the IMPP from a porcine brain with pyridoxal-5'-phosphate (PLP) resulted in a time-dependent enzymatic inactivation. Spectral evidence showed that the inactivation proceeds via the formation of a Schiff's base with the amino groups of the enzyme. After the sodium borohydride reduction of the inactivated enzyme, it was observed that 1.8 mol phosphopyridoxyl residues per mole of the enzyme dimer were incorporated. The substrate, myo-inositol-1-phosphate, protected the enzyme against inactivation by PLP. After tryptic digestion of the enzyme modified with PLP, a radioactive peptide absorbing at 210 nm was isolated by reverse-phase HPLC. Amino acid sequencing of the peptide identified a portion of the PLP-binding site as being the region containing the sequence L-Q-V-S-Q-Q-E-D-I-T-X, where X indicates that phenylthiohydantoin amino acid could not be assigned. However, the result of amino acid composition of the peptide indicated that the missing residue could be designated as a phosphopyridoxyl lysine. This suggests that the catalytic function of IMPP is modulated by the binding of PLP to a specific lysyl residue at or near its substrate-binding site of the protein.
To mitigate the impacts of climate change on agricultural ecosystems, development of agricultural management for enhanced soil carbon sequestration is required. In this study, the effects of fertilizer types (chemical fertilizer and manure compost), cropping systems, and crop residue management on SOC(Soil Organic Carbon) sequestration were investigated. Summer corn and winter barley were cultivated on experimental plots under natural rainfall conditions for two years with chemical fertilizer and manure compost. Soil samples were collected conducted and analyzed for SOC for soil. To estimate long-term variation patterns of SOC, DNDC was run with the experimental data and the weather input parameters from 1981 to 2010. DNDC simulation demonstrated SOC reduction by chemical fertilizer treatment unless plant residues are returned; whereas compost treatments increased SOC under the same conditions and SOC increment was proportional to compost application rate. In addition, SOC further increased under corn-barley cropping system over single corn cropping due to more compost application. Regardless of nutrient input type, residue return increased SOC; however, the magnitude of SOC increase by residue return was lower than by compost application.
Kim, Gyeong-Ha;Ahn, Kyung-Geun;Kim, Gi-Ppeum;Hwang, Young-Sun;Lee, Young Deuk;Choung, Myoung-Gun
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.19
no.4
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pp.345-353
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2015
The aim of this study is to develop residue analysis method for fenoxanil, a MBI (melanin biosynthesis inhibitor) propionamide fungicide, had mainly been used to control rice blast, and disease of other crops, fruits, and vegetables by using GLC/NPD and GC/MS. Extraction with acetone and partition with n-hexane/dichloromethane (80/20, v/v) were performed from hulled rice, soybean, Kimchi cabbage, green pepper, and apple, then column clean-up with florisil was applied. Mean recoveries were 82.2%-109.1% with less than 7.2% of coefficients of variation and limit of quantitation was set at the concentration of 0.04 mg/kg from the five agricultural products through the determination by GLC/NPD equipped with DB-5 capillary column and single laboratory validation. As a confirmatory method, GC/MS selected ion monitoring (SIM) was set from m/z 125.0, 188.9, and 293.0. Developed method is expected to apply the single residue analysis of fenoxanil in agricultural products.
1) Caramel and original soybean sauce was obtained from under grade wheat flour. 2) Mixture of under grade wheat flour and ammonium Chloride or HCl was parched. Parch substance were mixed with water, and then were filtrated. This filtrated liquid is liquid of dextrin. The residue of the filtrated substance was contained protein and others. Liquid of dextrin were treated with HCl until reaction of $I_2$ is colorless. Liquid of dextrin was caramelized. The original soybean sause was obtained by the hydrolysis of residue. 3) Parching 200g of under grade wheat flour with 7g of ammonium chloride under $140^{\circ}C$. for 90mins. and then add about 200ml of water to it. About 150ml. of dextrin soln's can be obtain after filtration. 4) Caramelizing 150ml. of dextrin soln's was treated with liq. ammonia at $120^{\circ}C$ for 270mins. under $pH\;5{\sim}6$. it was possible to obtain 95g of $24^{\circ}B\acute{e}$ caramel. 5) When 25g of residue was hydrolysised with 75ml. of 18% HCl for 8hrs. boiling. it was possible to obtain 55ml. of $25^{\circ}B\acute{e}$ original soybean sauce. It is contain 2.20% of nitrogen.
This study was performed to develop a precise single residue analytical method of fungicide fenhexamid in representative crops for general residue analytical method which could be applied to most of crops. Korean cabbage, mandarin, apple and green pepper were selected, macerated, extracted with acetone, concentrated and partitioned with dichloromethane. Then the extracts were concentrated and cleaned-up through Florisil column with ethyl acetate/0.1% acetic acid in hexane [15:85, (v/v)] before concentration and analysis with HPLC. LOQ (Limit of Quantitation) of fenhexamid was 1 ng (S/N>10) and MQL (Method Quantitative Limit) was 0.01 mg/kg. Recoveries were measured at two fortification levels (10 MQL and 50 MQL) on crop samples and ranged from 85.2% to 94.8% (mean recoveries) and coefficients of variation were <10% regardless of sample type.
Journal of the Microelectronics and Packaging Society
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v.22
no.1
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pp.69-74
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2015
With difficulties during the cleaning of reflow flux residues due to the decrease of the part size and interconnection pitch in the advanced electronic devices, the need for the no-clean solder paste is increasing. In this study, an epoxy curable solder paste was made with SAC305 solder powder and the curable flux of which the main ingredient is epoxy resin and its reflow solderability, flux residue corrosivity and solder joint mechanical properties was investigated with comparison to the commercial rosin type solder paste. The fillet shape of the cured product around the reflowed solder joint revealed that the curing reaction occurred following the fluxing reaction and solder joint formation. The copper plate solderability test result also revealed that the wettability of the epoxy curable solder paste was comparable to those of the commercial rosin type solder pastes. In the highly accelerated temperature and humidity test, the cured product residue of the curable solder paste showed no corrosion of copper plate. From FT-IR analysis, it was considered to be resulted from the formation of tight bond through epoxy curing reaction. Ball shear, ball pull and die shear tests revealed that the adhesive bonding was formed with the solder surface and the increase of die shear strength of about 15~40% was achieved. It was considered that the epoxy curable solder paste could contribute to the improvement of the package reliability as well as the removal of the flux residue cleaning process.
We have designed a 20-residue hybrid peptide CA(1-8)-MA(1-12) (CAMA) incorporating residues 1-8 of cecropin A (CA) and residues 1-12 of magainin 2 (MA) with high bacterial cell selectivity. CAMA-P2 is an ${\alpha}$-helical antimicrobial peptide designed from a CAMA hybrid peptide and substitution of Gly-Ile-Gly hinge sequence of CAMA to Pro influences the flexibility at central part of CAMA. Based on structure-activity relationships of CAMA peptides, to investigate the effects of the total positive charges on antimicrobial activity of CAMA-P2, the $Ser^{14}{\rightarrow}$Lys analogue (CAMA-syn1) was synthesized. The role of tryptophan at C-terminal ${\alpha}$-helix on its antimicrobial activity as well as synergistic activity was also investigated using $Ser^{14}{\rightarrow}$Lys/$Phe^{18}{\rightarrow}$Trp analogue (CAMA-syn2). Also, we designed CAMA-syn3 by substitution of $Lys^{16}$ located opposite side of substituted $Lys^{14}$ of CAMA-syn1 with Leu residue, resulting in increase of hydrophobicity and amphipathicity of the peptide. All of CAMA-syn analogues showed good antimicrobial activities similar to those of CAMA and CAMA-P2. The CAMA-syn1 and CAMA-syn2 showed low hemolytic activity and cytotoxicity against human keratinocyte Haca-T cells while CAMA-syn3 showed hemolytic activity and cytotoxicity at its MIC value. We then investigated their abilities to act synergistically in combination with the antimicrobial flavonoids and synthetic compounds screened in our laboratory. The results showed that all peptides exhibited synergistic effects with dihydrobinetin, while only CAMA-syn2 exhibited synergistic effects with YKAs3001 against both S. aureus and MRSA, suggesting that Trp residue at C-terminus of CAMA-syn2 may facilitate the polar antibiotic flavonoids and synthetic compounds to permeabilize the membrane. This study will be useful for the development of new antibiotic peptides with potent antimicrobial and synergistic activity but without cytotoxicity.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.37
no.8
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pp.1079-1083
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2008
The purposes of this study were aimed to evaluate the antioxidant and antiproliferative activities of water, methanol, and 70% acetone extracts from pepper leaves. The antioxidant activity was evaluated by ABTS and DPPH radical scavenging activities, reducing power, and chelating effect. Moreover, the effects of the extracts on cell proliferation of breast (MCF7), colon (HCT116), and gastric (MKN45) tumor cells were investigated. Higher extraction yields were obtained with methanol than with 70% acetone and water. Among the three different solvents, 70% acetone extract showed the highest polyphenolic contents. 70% acetone extracts showed higher antioxidant activities compared with other extracts. Also, 70% acetone extract of pepper leaves exhibited higher antiproliferative activity (>80%) against HCT116 and MKN45 cells compared with other samples at the concentration of 1 mg/mL. These results indicate that pepper leaves may serve as potential dietary sources of natural antioxidants and antiproliferative substances.
Background: One of the important factors in the prognosis of chronic hepatitis B patient is the degree of replication of hepatitis B virus (HBV). It has been known that HBV DNA polymerase plays the essential role in the replication of HBV. HBV DNA polymerase is composed of four domains, TP (Terminal protein), spacer, RT (Reverse transcriptase) and RNaseH. Among these domains, tyrosine, the $65^{th}$ residue of TP is an important residue in protein-priming reaction that initiates reverse transcription. If monoclonal antibody that recognizes around tyrosine residue were selected, it could be applied to further study of HBV replication. Methods: To produce TP-specific scFv (single-chain Fv) by phage display, mice were immunized using synthetic TP-peptide contains $57{\sim}80^{th}$ amino acid residues of TP domain. After isolation of mRNA of heavy-variable region ($V_H$) and light-chain variable region ($V_L$) from the spleen of the immunized mouse, DNA of $V_H$ and $V_L$ were obtained by RT-PCR and joined by a DNA linker encoding peptide (Gly4Ser)3 as a scFv DNA fragments. ScFv DNA fragments were cloned into a phagemid vector. scFv was expressed in E.coli TG1 as a fusion protein with E tag and phage gIII. To select the scFv that has specific affinity to TP-peptide from the phage-antibody library, we used two cycles of panning and colony lift assay. Results: The TP-peptide-specific scFv was isolated by selection process using TP-peptide as an antigen. Selected scFv had 30 kDa of protein size and its nucleotide sequences were analyzed. Indirect- and competitive-ELISA revealed that the selected scFv specifically recognized both TP-peptide and the HBV DNA polymerase. Conclusion: The scFv that recognizes the TP domain of the HBV DNA polymerase was isolated by phage display.
The simultaneous analysis of multi-residual pesticides was developed using a gas chromatography (GC) method. In this study, a simple and reliable methodology was improved to detect 154 kinds of pesticides in sinseng extract sample by using a liquid-liquid extraction procedure, open column chromagraphy and chromatographic analysis by CC electron capture detector (ECD) and GC nitrogen-phosphorus detector (NPD). The 154 kinds of pesticides were classified in 4 groups according to the chemical structure. The extraction of pesticides was experimented with $70\%$ acetone and dichloromethane/petroleum ether in order, and cleaned up via open column chromatography $(3\times30cm)$ packed with florisil $(30g,\;130^{\circ}C,\;12hrs)$. The final extract was concentrated in a rotator evaporator at $40^{\circ}C$ until dryness. Then the residue was redissolved to 2ml with acetone, and analyzed by GC-ECD and GC-NPD. The applied concentration of pesticides was over $1\~10{\mu}g/ml$. The recovery tests were ranged from $70.7\%$ to $115.2\%$ with standard deviations between 0.3 and $5.7\%$ of the standard spiked to the ginseng extract sample (Group $I\~IV$). The limit of detection (LOD) ranged from 0.001 to $0.099{\mu}g/ml$ (Group $I\~IV$). The 9 kinds of pesticides were not detected. The developed method was applied satisfactory to the determination of the 154 kinds of pesticides in the ginseng extract with good reproducibility and accuracy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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