Embryo transfer (ET) technology is of high importance in modern cattle breeding programs. ET is one step in the process of removing one or more embryos from the reproductive tract of an outstanding donor female and transferring them to one or more recipient females. Embryos also can be produced in the laboratory via techniques such as in vitro fertilization (IVF). But the actual transfer of an embryo is only one step in a series of processes that may include some or all of the following: superovulation and insemination of donors, collection of embryos, isolation, evaluation and short-term storage of embryos, micromanipulation and genetic testing of embryos, freezing of embryos and embryo transfer. Cryopreservation and direct transfer of frozen-thawed embryos is common-place with pregnancy rates near that of fresh embryos. Polymerase chain reaction (PCR) technology is currently being used for sexing embryos, and this technology will be used for "embryo diagnostics" and "embryo genomics" in the future. Although, many limitations and problems remain to overcome, these and other new technologies promise to change livestock breeding drastically in the next decade.
Morphological and isozyme analyses were used to examine closely related species of Tridentiger obscurus and \ulcorner: brevispinis, a pair of cryptic species which has intricate problem with regard to species boundary, and to clarify the taxonomic position. In this study, it was revealed from their 17 allopatric streams that there are differences of band ornamentation on the lateral side and three genetic markers between two species. However, genetic relationship between them (S = 0.813, D = 0.192) was within the intraspecific level of similarity. However, at the sympatry of two species no hybrid was found except at Bangjuk stream where the electrophoretic hybrids with slight deficiency of heterozygosity were observed. It is shown that at sympatry there is a finer microenvironmental subdivision between two species at all populations including Bangjuk stream. To manifest the extent of assortative mating, four syrnpatric subpopulations at Bangjuk stream were analyzed for departure from Hardy-Weinberg equillibrium by F-statistics. All subpopulations were deviated significantly from the expectation under random mating. The evidences presented here supports the recognition of Tridentiger obscurus and T. brevispinis as semispecies in the late stage of reproductive isolation
Acute ischemic stroke results from sudden decrease or loss of blood supply to an area of the brain, resulting in a coinciding loss of neurological function. The antioxidant action of melatonin is an important mechanism among its known effects to protective activity during ischemic/reperfusion injury. The focus of this research, therapeutic efficacy of melatonin on recovery of neurological function following long term treatment in ischemic brain injured rats. Male Sprague-Dawley rats (n=40; 8 weeks old) were divided into the control group, and MCAo groups (Vehicle, MT7 : MCAo+ melatonin injection at 7:00, MT19 : MCAo+melatonin injection at 19:00, and MT7,19 : MCAo+melatonin injection at 7:00 and 19:00). Rat body weight and neurological function were measured every week for 8 weeks. After 8 weeks, the rats were anesthetized with a mixture of zoletil (40 mg/kg) and xylazine (10 mg/kg) and sacrificed for further analysis. Tissues were then collected for RNA isolation from brain tissue. Also, brain tissues were analyzed by histological procedures. We elucidated that melatonin was not toxic in vital organs. MT7,19 was the most rapidly got back to mild symptom on test of neurological parameter. Also, exogenous melatonin induces both the down-regulation of detrimental genes, such as NOSs and the up-regulation of beneficial gene, including BDNF during long term administration after focal cerebral ischemia. Melatonin treatment reduced the loss of primary motor cortex. Therefore, we suggest that melatonin could be act as prophylactic as well as therapeutic agent for neurorehabilitative intervention.
A cDNA clone encoding phytocystatin was isolated from Brassica rapa seedlings, through rapid amplification of cDNA ends (RACE). This gene (name as Brcpi1; GenBank accession no.: EF079953) had a total length of 881 bp with an open reading frame of 609 bp, and encoded predicted polypeptide of 203 amino acid (aa) residues including a putative N-terminal signal peptide. Other relevant regions found its sequence included the G and PW conserved aa motifs, and the consensus LARFAV sequence for phytocystatins and the reactive site QVVAG. The BrCPI1 protein shared 95, 94, 81, 80 and 78% identity with other CPI proterins isolated from Brassica oleracea (BoCPI-1), Arabidopsis thaliana (AtCY SB), Glycine max (GmCPI), Oryza sativa (OsCYS-2) and Zea may (ZmCPI) at amino acid level, respectively. Southern blot analysis showed that Brcpi1 was a low copy gene. Expression pattern analysis revealed that Brcpi1 was a tissue-specific expressing gene during reproductive growth and strongly expressed at mature seedling stages. Furthermore, overexpression of Brcpi1 in transgenic Arabidopsis was enhanced tolerance to salt and cold stresses. Meanwhile the juvenile seedling of Brcpi1 transgenic plants was not affected by various concentrations ABA in MS medium. Taken together, the results showed that Brcpi1 functioned as a cysteine protease inhibitor and it exhibited a protective agent against diverse types of abiotic stress, which induced this gene in a tissue- and stress-specific manner.
The aim of this study was to investigate what protein(s) of porcine epididymal fluid (pEF) are able to enhance the nuclear maturation of porcine germinal vesicle (GV) oocytes in vitro. Proteins of pEF were fractionated by affinity, ion exchange, and gel filtration chromatography. Porcine cumulus-oocytes complexes (COC) from follicles were cultured in tissue culture medium (TCM 199) containing various fractions obtained by chromatography. Porcine COCs were also cultured in TCM 199 containing various meiosis inhibitors and pEF. After 24 or 48 h culture, oocytes were examined for evidence of GV breakdown, metaphase I, anaphase-telophase I, and metaphase II. When porcine COCs were cultured in the medium with meiosis inhibitor such as, dibutyryl cAMP (dbcAMP) and forskolin (Fo), more than 80% of oocytes were unable to resume meiosis. However, porcine COCs supplemented with pEF were able to overcome the inhibitory effect of dbcAMP and Fo. Maturation rate of oocytes was significantly (p<0.05) increased in the media supplemented with cationic protein(s) during in vitro maturation than in those with anionic protein(s) (44.1% vs 20.0%). When oocytes were cultured in the TCM 199 with fractions obtained by gel filtration, the maturation rate of oocytes was significantly (p<0.05) higher in fraction 11 containing 18 kDa than other fractions. The present study suggests that 1) dbcAMP and Fo prevent the spontaneous maturation of oocyte after isolation from follicles, and that pEF contain a substance(s) that improves meiosis resumption in vitro of porcine COCs, 2) cationic 18 kDa protein(s) are responsible for promotion of Mil stage.
In the Doritaenopsis hybrid, like most of the orchid species and hybrids, temperature is crucial for the vegetative-to-reproductive transition, and low temperature is required for bud differentiation. To understand the molecular mechanism of this process, an orchid GIGANTEA (GI) gene, DhGI1, was isolated and characterized by using the rapid amplification of cDNA ends (RACE) PCR technique. Sequence analysis showed that the full-length cDNA is 4,022 bp with a major open reading frame of 3,483 bp, and the amino acid sequence showed high similarity to GI proteins in Zea mays, Oryza sativa, Arabidopsis thaliana and other plants. Semi-quantitative RT-PCR revealed that DhGI1 was expressed throughout development and could be detected in roots, stems, leaves, peduncles and flower buds. The expression level of DhGI1 was higher when the plants were flowering at low temperature (22/$18^{\circ}C$ day/night) than the other growth stages. Further analysis indicated that the accumulation of DhGI1 transcripts was significantly increased at low temperature, and concomitantly, initiation of the peduncle was observed. However, DhGI1 levels were low under high temperature (30/$25^{\circ}C$) conditions, and flower initiation was inhibited. These results indicate that the expression of DhGI1 is regulated by low temperature and that DhGI1 may play an important role in inflorescence initiation in this Doritaenopsis hybrid at low temperatures.
The taxonomic status of Moroco Jagowskii and M oxycephalus a pair of sibling species inhabiting in Korean fresh waters, has been unclear up to date. Recently a sympatric area of these species was found (Kang, 1987). The purpose of this study was to clarify their specific status by analysing specimens collected from the sympatric area of these species. Isozyme analysis and morphometric comparison were performed. Among 26 loci screened 6 loci (Aco, Est-2, E-X, Gk-3, Ipo, Me) showed fixed allelic difference between them and these loci could be used as genetic markers to distinguish them. Isozyme analysis indicates that no hybridization occurs and therefore it is assumed that isolating mechanism is completed and they are distinct species. The mean number of scales above lateral line (SAL) of M Jagowskii and M oxycephalus at sympatric area was 24.93 $\pm$1.95 and 17.33$\pm$0.72 respectively, and it seems as the result of character displacement. A finer microhabitat segregation between them is noticed. M oxycephalus is found along the effluent streams whereas M lagowskii is distributed mostly in the main stream at sympatric area.
This study describes pathological, immunohistochemical, and bacteriological findings in adult dogs and fetuses naturally infected with Brucella (B.) canis. A total of 42 dogs including 40 dogs and 2 aborted fetuses were examined. The most common gross lesions in infected dogs were swelling of lymph nodes and spleen. The testes showed marked swelling with multifocal to diffuse reddish discoloration. The most significant histopathological lesions were observed in the placenta. Placental trophoblasts were markedly hypertrophied due to the accumulation of intra-cellular gram-negative bacteria. Lymphocytic inflammation of varying severity was observed in the reproductive organs such as male testis, epididymis, and prostate gland and female uterus. Strong immunolabelling was observed in the cytoplasm of most trophoblasts in the placental tissues using immunohistochemistry. However, immunohistochemical staining did not demonstrate any organisms in other organs of dogs and fetuses. B. canis isolates were most frequently obtained from the whole blood (82.5%) and superficial inguinal lymph node (77.5%) in both sexes. In addition, the isolation rate was higher in male genital organs than in those of females. Hence, management of male dogs is most important because infected dogs can play a role as carriers.
A number of management issues can be used as drivers for change in order to improve animal welfare and nursing capacity of the hyperprolific sow. Group housing of sows during gestation is a recommended practice from the perspective of animal welfare. Related health issues include reproductive health and the locomotor system. It appears that management of pregnant sows in groups is challenging for a producer and considerable skill is required. We explored the benefits and challenges of group housing, including feeding issues. Increasing litter size requires additional attention to the mammary gland and its ability to provide sufficient nursing for the growing litter. We discuss the fundamentals of mammary development and the specific challenges related to the hyperprolific sow. We also address challenges with the farrowing environment. It appears that the old-fashioned farrowing crate is not only outdated in terms of welfare from the public's perspective, but also fails to provide the environment that the sow needs to support her physiology of farrowing, nursing, and maternal behaviour. Studies from our group and others indicate that providing the sow with a loose housing system adequate in space and nesting material, along with reasonable chance for isolation, can be considered as fundamental for successful farrowing of the hyperprolific sow. It has also been shown that management strategies, such as split suckling and cross fostering, are necessary to ensure proper colostrum intake for all piglets born alive in a large litter. We thus conclude that welfare and nursing capacity of the sow can be improved by management. However, current megatrends such as the climate change may change sow management and force the industry to rethink goals of breeding and, for instance, breeding for better resilience may need to be included as goals for the future.
Sameer-ul-Salam Mattoo;Ram Prasad Aganja;Seung-Chai Kim;Chang-Gi Jeong;Salik Nazki;Amina Khatun;Won-Il Kim;Sang-Myeong Lee
Journal of Veterinary Science
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v.24
no.1
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pp.11.1-11.14
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2023
Background: Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) are commonly used to assess in vitro immune responses. However, PBMC isolation is a time-consuming procedure, introduces technical variability, and requires a relatively large volume of blood. By contrast, whole blood assay (WBA) is faster, cheaper, maintains more physiological conditions, and requires less sample volume, laboratory training, and equipment. Objectives: Herein, this study aimed to develop a porcine WBA for in vitro evaluation of immune responses. Methods: Heparinized whole blood (WB) was diluted (non-diluted, 1/2, 1/8, and 1/16) in RPMI-1640 media, followed by phorbol myristate acetate and ionomycin. After 24 h, cells were stained for interferon (IFN)-γ secreting T-cells followed by flow cytometry, and the supernatant was analyzed for tumor necrosis factor (TNF)-α. In addition, diluted WB was stimulated by lipopolysaccharide (LPS) and polyinosinic:polycytidylic acid (poly I:C), reference strain KCTC3557 (RS), field isolate (FI), of heat-killed (HK) Streptococcus suis, and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV). Results: The frequency of IFN-γ+CD3+ T-cells and concentration of TNF-α in the supernatant of WB increased with increasing dilution factor and were optimal at 1/8. WB TNF-α and interleukin (IL)-10 cytokine levels increased significantly following stimulation with LPS or poly I:C. Further, FI and RS induced IL-10 production in WB. Additionally, PRRSV strains increased the frequency of IFN-γ+ CD4-CD8+ cells, and IFN-γ was non-significantly induced in the supernatant of re-stimulated samples. Conclusions: We propose that the WBA is a rapid, reliable, and simple method to evaluate immune responses and WB should be diluted to trigger immune cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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