• 제목/요약/키워드: repetitive-sequence-based polymerase chain reaction (rep-PCR)

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Current Classification of the Bacillus pumilus Group Species, the Rubber-Pathogenic Bacteria Causing Trunk Bulges Disease in Malaysia as Assessed by MLSA and Multi rep-PCR Approaches

  • Husni, Ainur Ainiah Azman;Ismail, Siti Izera;Jaafar, Noraini Md.;Zulperi, Dzarifah
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제37권3호
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    • pp.243-257
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    • 2021
  • Bacillus pumilus is the causal agent of trunk bulges disease affecting rubber and rubberwood quality and yield production. In this study, B. pumilus and other closely related species were included in B. pumilus group, as they shared over 99.5% similarity from 16S rRNA analysis. Multilocus sequence analysis (MLSA) of five housekeeping genes and repetitive elements-based polymerase chain reaction (rep-PCR) using REP, ERIC, and BOX primers conducted to analyze the diversity and systematic relationships of 20 isolates of B. pumilus group from four rubber tree plantations in Peninsular Malaysia (Serdang, Tanah Merah, Baling, and Rawang). Multi rep-PCR results revealed the genetic profiling among the B. pumilus group isolates, while MLSA results showed 98-100% similarity across the 20 isolates of B. pumilus group species. These 20 isolates, formerly established as B. pumilus, were found not to be grouped with B. pumilus. However, being distributed within distinctive groups of the B. pumilus group comprising of two clusters, A and B. Cluster A contained of 17 isolates close to B. altitudinis, whereas Cluster B consisted of three isolates attributed to B. safensis. This is the first MLSA and rep-PCR study on B. pumilus group, which provides an in-depth understanding of the diversity of these rubber-pathogenic isolates in Malaysia.

우리나라에 분포하는 고추와 토마토 풋마름병균(Ralstonia solanacearum) 계통들의 유전적 다양성 (Genetic Diversity of Ralstonia solanacearum Strains Isolated from Pepper and Tomato Plants in Korea)

  • 서상태;박종한;한경숙;정승룡;이승돈
    • 식물병연구
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    • 제13권1호
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    • pp.24-29
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    • 2007
  • 풋마름병징을 나타내는 고추와 토마토 식물체로부터 35개의 풋마름병균 계통들을 분리하여 생리.생화학 실험, 병원성 실험, 유전학적 실험을 통해 유전적 다양성을 연구하였다. 생리 생화학 실험과 종특이적 polymerase chain reaction(PCR)을 실시한 결과 풋마름병균 계통들은 모두 Ralstonia solanacerum biovar 4로 동정되었다. 분리균은 고추와 토마토 유묘를 이용해 병원성이 확인되었다. Repetitive sequence-based PCR(rep-PCR) 결과를 토대로 계통도 분석을 한 결과 고추와 토마토 분리균은 6개의 group으로 나뉘었으며, 유전적 다양성은 높게 나타났다. 풋마름병균 계통들의 그룹간에는 지역별, 기주별 특이성은 관찰되지 않았다.

PCR 방법을 이용한 우유 및 유제품에서 발생하는 식중독 균의 신속 검출법 (Rapid Detection Methods for Food-Borne Pathogens in Dairy Products by Polymerase Chain Reaction)

  • 곽혜림;한선경;김이슬;홍연;김해영
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제31권2호
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    • pp.171-177
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    • 2013
  • The dairy industry has consistently grown via the expansion of dairy-based food categories. Dairy product consumption is stable since the nutrient composition in dairy products is ideal for human health. However, dairy products are highly susceptible to food-borne pathogens. Controlling the safety of dairy products is thus important when considering the nutrient-rich matrix of this food category. Currently, immunoassays or molecular biology techniques have been used to evaluate the safety of dairy products in Korea. These methods are based on the detection of proteins and thus have low reproducibility and sensitivity. Recent techniques to detect food-borne pathogens have focused on genetic analyses. Rapid detection methods for food-borne pathogens in milk and dairy products using polymerase chain reaction (PCR) techniques, such as conventional PCR, real-time PCR, repetitive sequence-based (rep)-PCR, PCR-denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE), and digital PCR, are reviewed in this article. The aim of this review was to contribute knowledge of the relationship between microflora and the quality of dairy products. This study will also assist in the immediate monitoring of food-borne pathogens in milk and dairy products when an outbreak related to this food category occurs.

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고추에서 분리된 Ralstonia solanacearum 계통의 생리, 생화학 및 유전적 특성 (Physiological, Biochemical and Genetic Characteristics of Ralstonia solanacearum Strains Isolated from Pepper Plants in Korea)

  • 이영기;강희완
    • 식물병연구
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    • 제19권4호
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    • pp.265-272
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    • 2013
  • 전국 7개도 14개 시 군의 주요 고추 재배지에서 시들음 증상을 나타내는 식물체의 땅가 줄기에서 분리 선별된 63개 풋마름병균들의 특성을 조사하였다. 고추에서 분리된 풋마름병균들은 고추(cv. 대왕)와 토마토(cv. 서광)에 강한 병원성을 나타냈다. 모든 병원균들은 배양적, 생리 생화학적 특성 및 특이 PCR 검출에 의하여 Ralstonia solanacearum으로 동정되었다. 고추에서 분리된 63개 풋마름병균들은 race 1 계통으로 2가지 biovar로 구분되었는데, biovar 3은 17개 균주로 27%였고 biovar 4는 46개의 균주로 73%였으며, biovar 4의 생리형이 우점계통이었다. Rep-PCR에 의한 국내 고추 풋마름병균들의 유전적 다양성을 확인한 결과, 70%의 유사성을 기준으로 12개의 group으로 구분되었다. 이러한 결과들은 국내 고추 풋마름병에 대한 방제와 저항성 품종 육성에 중요한 기초 자료를 제공할 것이다.

어린잎채소의 생산 및 가공 공정 중 식중독 미생물 분석 (Analysis of Foodborne Pathogens in Brassica campestris var. narinosa microgreen from Harvesting and Processing Steps)

  • 오태영;백승엽;최정희;정문철;구옥경;김승민;김현정
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제59권1호
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    • pp.63-68
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    • 2016
  • 어린잎 채소의 생산 및 가공 공정에서 원료농산물과 토양 및 용수 등 환경 시료를 채취하여 미생물학적 품질을 평가하고 식중독을 유발시킬 수 있는 주요 병원성 미생물을 분석하였다. 생산단계 어린잎 채소와 환경 시료의 일반 세균수는 모두 6.8 log CFU/g 이상 분석되었으며 대장균군은 어린잎 채소와 토양에서 각각 3.2 log CFU/g 및 3.5 log CFU/g 수준으로 오염되어 있었다. 가공공정 단계에서는 일반세균수와 대장균군 모두 세척공정이 진행됨에 따라 최종제품 단계에서는 오염수준이 감소되었다. B. cereus의 경우 생산단계에서는 어린잎 채소와 토양 또는 지지토에서 오염도가 높았으며, 가공공정에서는 원료 대비 최종 제품에서 약 1.4 log CFU/g 정도 감소되었다. 병원성 미생물의 정성분석 결과 생산단계에서는 S. aureus를 제외한 모든 병원성 미생물이 음성이었다. 본 연구에서 분리된 B. cereus를 이용하여 rep-PCR에 의한 유전적 상동성을 분석한 결과 생산단계의 경우 지지토와 시료에서 분리된 균주의 유전적 상동성이 높아 반복적으로 이용되는 지지토에 오염된 균주가 어린잎 채소로 이행되었을 가능성을 보여준 반면 가공공정에서 분리된 균주의 경우 유전적 상동성이 낮아 공정 중 재 오염될 가능성이 낮음을 시사하였다.

Analysis of intraspecific genetic diversity in Acidovorax citrulli causing bacterial fruit blotch on cucurbits in Korea

  • Song, Jeong Young;Oo, May Moe;Park, Su Yeon;Seo, Mun Won;Lee, Seong-Chan;Jeon, Nak Beom;Nam, Myeong Hyeon;Lee, Youn Su;Kim, Hong Gi;Oh, Sang-Keun
    • 농업과학연구
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    • 제45권4호
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    • pp.575-582
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    • 2018
  • Bacterial fruit blotch (BFB) caused by Acidovorax citrulli is a devastating disease found in many cucurbits cultivation fields. The genetic diversity for 29 strains of A. citrulli collected from various cucurbits in South Korea was determined by DNA fingerprinting with a pathogenicity test, multi locus analysis, Rep-PCR (repetitive sequence polymerase chain reaction), and URP (universal rice primers) PCR bands. Two distinct groups (Korean Clonal Complex, KCC1 and KCC2) in the population were identified based on group specific genetic variation in the multi locus phylogeny using six conserved loci and showed a very high similarity with DNA sequences for representative foreign groups [the group I (CC1-1 type) and the group II (CC2-5 type)] widely distributed worldwide, respectively. Additionally, in the case of phaC, a new genotype was found within each Korean group. The KCC1 was more heterogeneous compared to the KCC2. The KCC1 recovered mainly from melons and watermelons (ratio of 6 : 3) and 15 of the 20 KCC2 strains recovered from watermelons were dominant in the pathogen population. Accordingly, this study found that two distinct groups of differentiated A. citrulli exist in South Korea, genetically very similar to representative foreign groups, with a new genotype in each group resulting in their genetic diversity.