Objective : Ssangwha-tang is a traditional medicine formula widely prescribed for a decrease of fatigue after an illness in Korea. The aim of this study is to investigate the effect of Ssangwha-tang fermented by Lactobacillus fermentum (SF) on osteoclast differentiation in vitro and on bone metabolism of an ovariectomized rat in vivo. Methods : Tartrate-resistant acid phosphatase activity and staining were applied to evaluate the formation of osteoclasts. Ovariectomized rats were orally administrated with SF (30 ml/kg/day) for 12 weeks. Serum aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, total cholesterol, high-density lipoprotein-cholesterol, low-density lipoprotein-cholesterol, triglyceride, phosphate, calcium levels were determined. Effect of SF on bone loss were studied by histological analysis and the measurement of bone mineral density. Results : SF significantly inhibited tartrate-resistant acid phosphatase activity and formation of osteoclasts in RAW264.7 cells stimulated by receptor activator for nuclear factor ${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$) ligand (RANKL). In addition, SF significantly decreased the level of triglyceride and increased the level of low-density lipoprotein. Moreover, the decrease of trabeculae of the femur was partially prevented in ovariectomized rats administrated with SF. Conclusions : SF treatment could prevent ovariectomy induced bone loss and its effects could be medicated by the inhibition of osteoclastogenesis.
Osteoporosis is a growing global health concern primarily associated with decreased estrogen in postmenopausal women. Recently, some strains of probiotics were examined for potential anti-osteoporotic effects. This study intended to evaluate the impacts of Lactiplantibacillus plantarum MGE 3038 strain (MGE 3038) in ovariectomized rats. For this purpose, twelve weeks old female Wistar rats (n=21; 250-300 g) were divided into 3 groups; ovariectomy (OVX) group, OVX/MGE 3038 group and Sham group (control). In these groups; two went through respective OVX and one had daily MGE 3038 administration through oral gavage. Prior to 16 weeks after OVX, we collected blood samples and extracted the tibiae. We scanned the extracted tibiae by in-vivo micro-computed tomography (micro-CT) and evaluated pathology by hematoxylin and eosin (H&E) and Masson's trichrome staining. The serum levels of C-telopeptide of type I collagen (CTX), osteocalcin (OC), and the receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL) were examined. The OVX/MGE 3038 group showed increases in bone mineral density, trabecular bone volume, trabecular number, and trabecular thickness (Tb.Th), and a decrease in trabecular spacing than the OVX group. However, OVX/MGE 3038 group and control group were measurably comparable in Tb.Th. Micro-CT, H&E, and Masson's trichrome findings exhibited increased preservation and maintenance of trabecular bone structure in the OVX/MGE 3038 group in comparison to the OVX group. In serum, the levels of CTX, OC and RANKL were significantly different between the OVX and OVX/MGE 3038 groups. Taken together, L. plantarum MGE 3038 could be helpful for the treatment of osteoporosis.
Steroid hormone is known to cause the dynamic changes of mammalian uterus during reproductive cycle. However there is little information about the effect of estrogen (E) and progesterone (P) on the expression of various transcription factors involved in gene expression. Thus the present study was designed to demonstrate E and/or P-induced expression of c-Fos, CREB, ATF and HSP70 in rat uterus. Rats, ovariectomized (OVX) for two weeks, were divided into 6 experimental groups, 1) OVX, 2) OVX+V, 3) OVX+E, 4) OVX+P, 5) OVX+E+V, 6) OVX+E+P, and western blotting assay for nuclear extract and immunohistochemical staining were carried out for each experimental group. Treatment of E $(10{\mu}g)$ showed to increase the expression of c-Fos, CREB, ATF, and HSP70, and maximal expression was occured at $3\sim6$ hr after E administration. P (1mg) also increased, but much less than E, the expression of c-Fos, ATF, and HSP70. However, P did not reveal any effect on the expression CREE. P treatment 4 hr after E injection decreased c-Fos, CREB, and ATF expression, but did not show any change in the E-induced HSP70 expression. In immunohistochemical study c-Fos-, CREB-, and ATF-immunoreactivities were confined to the cells of luminal epithelium of uterine endometrium. These results suggest that proliferation and differentiation of rat uterus during reproductive cycle may mediated via expression of transcription factors, such as c-Fos, CREB, ATF, and HSP70.
Jin, Eun-Sun;Kim, Ji Yeon;Lee, Bora;Min, JoongKee;Jeon, Sang Ryong;Choi, Kyoung Hyo;Jeong, Je Hoon
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제61권5호
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pp.559-567
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2018
Objective : The aim of this study was to evaluate the effect for biodegradable screws containing bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) in an osteoporotic rat model. Methods : Twenty-four female Wistar rat (250-300 g, 12 weeks of age) were randomized into four groups. Three groups underwent bilateral ovariectomy (OVX). Biodegradable screws with or without BMP-2 were inserted in the proximal tibia in two implantation groups. The extracted proximal metaphysis of the tibiae were scanned by exo-vivo micro-computed tomography. Evaluated parameters included bone mineral density (BMD), trabecular bone volume (BV/TV), trabecular number, trabecular thickness, and trabecular separation (Tb.Sp). The tibia samples were pathologically evaluated by staining with by Hematoxylin and Eosin, and trichrome. Results : Trabecular formation near screw insertion site was evident only in rats receiving BMP-2 screws. BMD and BV/TV significantly differed between controls and the OVX and OVX with screw groups. However, there were no significant differences between control and OVX with screw BMP groups. Tb.Sp significantly differed between control and OVX and OVX with screw groups (p<0.05), and between the OVX and OVX with screw BMP group (p<0.05), with no statistically significant difference between control and OVX with screw BMP groups. Over the 12 weeks after surgery, bone lamellae in direct contact with the screw developed more extensive and thicker trabecular bone around the implant in the OVX with screw BMP group compared to the OVX with screw group. Conclusion : Biodegradable screws containing BMP-2 improve nearby bone conditions and enhance ostoeintegration between the implant and the osteoporotic bone.
홍화씨는 예로부터 국내에서 재배되어 한방 및 민간에서 특히 뼈에 우수한 작용이 있는 것으로 생각되어 오랫동안 복용되어 왔다. 최근 홍화씨를 성분분석한 바에 의하면 칼륨과 마그녜슘, 칼슘이 다량 함유되어 있어서 뼈의 발달과 유지에 도움이 있을 것이라고 추측된다. 그러나 아직까지 확실한 실험적 자료가 제시된 것은 별로 없다. 이에 저자들은 홍화씨 분말이 골다공증의 예방에 미치는 효과를 알아보기 위하여 본 실험을 실시하였다. 실험동물은 체중 230g의 12주령의 Sprague-Dawley Rats를 사용하였으며, 양쪽난소를 제거한 후 홍화씨 분말을 매일 0.3g씩 복용시키면서 1, 3, 5 및 7주 후에 경골을 채취하여 관찰하였다. 채취된 조직은 통상적인 주사전자현미경 시료제작법으로 고정과정을 거친 후 10% 질산으로 12시간 탈회하여 뼈의 단면을 노출시키고 탈수, 건조 및 금도금 과정을 거쳐 주사전자현미경(Hitachi, S-450)으로 관찰하여 촬영하였다. 관찰결과 난소적출 후 골소실이 일어나기 시작하여 7주 후에 대조군은 골수강에서 피질골까지의 두께의 감소와 골수강의 확장이 심하였으나, 홍화씨 분말을 투여한 실험군에서는 1주에서 7주까지 거의 같은 소견을 나타내었다. 이상의 결과를 종합해보면 홍화씨 분말은 여성호르몬 결핍으로 인한 골다공증의 예방에 효과가 있는 것으로 사료된다.
Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH)은 척추동물의 시상하부로부터 합성, 분비되어 시상하부-뇌하수체간의 문맥계를 통해 뇌하수체 전엽에 작용하여 Growth Hormone (GH)의 분비를 촉진한다. 시상하부에서 발현되는 일부 Releasing Hormone 들이 여러 시상하부외 조직에서도 검출되고 조직특이적인 기능을 수행한다는 사실이 여러 연구자들에 의해 밝혀졌다. 이러한 사실들을 배경으로 본 연구자는 GHRH가 흰쥐의 뇌하수체 전엽과 뇌하수체로부터 유래된 종양세포주들에서 발현될 가능성을 조사하였다. GHRH 펩타이드와 mRNA의 존재와 구조를 규명하기 위하여 뇌하수체와 배양 세포를 사용하여 GHRH immunocytochemistry, 방사면역측정법, GHRH PCR과 RNase protection assay를 시행하였다. Immunocytochemistry의 결과 gonadotrope (대형)와 somat-olactotrope (중간형)로 추정되는 세포들에서 GHRH 염색이 나타났고, Somatolactotrope성 종양세포인 GH3 cell 추출물에서 immunoreactive GHRH가 방사면역측정법으로 검출되었다. 3'rapid amplification of cDNA end (3'-RACE)를 시행한 결과, 흰쥐 뇌하수체에 GHRH transcript가 존재하고, 그 3'end 부분이 다른 조직내의 GHRH와 동일함을 확인하였다. GHRH RT-PCR에서도 뇌하수체와 종양세포주들인 $\alpha$T3 cell (gonadotrope성)과 GH3 cell에서 예상 산물들이 증폭되었다. RNase protection assay를 시행한 결과 난소절제에 의해 뇌하수체내 GHRH 유전자 발현이 증가됨을 확인하였다. 이상의 결과는 GHRH가 뇌하수체 전엽의 gonadotrope와 somatotrope에서 발현되고, paracrine 또는 autocrine조절물질로 작용하여 GH 분비 외에도 뇌하수체 전엽 세포들의 분화와 분열등에 관여함을 시사한다.
Purpose: The aim of this study was to observe the bony change in the OVX rat longitudinally and to study the alendronate effect. Materials and Methods: Eighteen Sprague-Dewley rats, eight-week old each, were randomly assigned into three groups: one of those sham-operated (N=4), the other two were OVX: saline-treated (N=7) and alendronate-treated group (N=7). The saline-treated group was administered with saline solution (0.1mL/100g) daily, while the alendronate-treated group was given alendronate (1mg/kg, Sigma-Aldrich Corp. Korea) daily. Micro-CT scannings of the lumbar were consecutively done at baseline, at 3-week intervals during 9 weeks. Two and three dimensional bony analysis were done. Bone mineral density (BMD) was measured with Piximus (GE Lunar Co. USA). The average values of these three methods were compared with each group. Results: After 6 weeks the BMD of the OVX group showed lower tendency than that of sham group. After 6 weeks many 3D parameters of micro-CT showed higher values in the OVX-alendronate group compared with the OVXsaline group. Most 2D bony parameters were higher in the OVX-alendronate group compared with the OVX-saline group at 9 weeks. Conclusion: This study showed low BMD of the OVX group after 6 weeks and showed the effect of alendronate on the BMD and bony structures of ovariectomized rats. This study also showed usefulness of in vivo micro-CT in monitoring individual bone changes over time.
The aim of this study was to evaluate the effects of Artemisia Princeps Var. Orientalis (AP) on serum lipids and the collagen content of the connective tissues in ovariectomized rats. From day 2 until day 37 after the ovariectomy, Sprague-Dawley female rats were randomly assigned to the following groups: sham-operated rats (Sham), ovariectomized control rats (OVX-control), and ovariectomized rats supplemented with the AP 50 mg/kg bw/day (OVX-AP). The AP ethanol extracts were orally administrated 1 mL per day. The OVX rats were significantly heavier than the sham-operated rats at all time points, but supplementation with the AP extracts tended to gain weight less than OVX-control. Although total-cholesterol was increased at OVX-control, supplementation with the AP extracts tended to result in less than OVX-control. Triglyceride was significantly decreased after supplemented with the AP extracts (p<0.05). HDL-cholesterol is appeared higher AP extracts group than OVX-control. According to the results, we could know the fact that AP extracts were effective on serum lipids content throughout decreasing total-cholesterol, triglyceride and increasing HDL-cholesterol in ovariectomized rats. Supplementation with the AP extracts prevented a decrease in the collagen level in bone and cartilage tissues. These results are consistent with the conclusions based on the estrogenic activities of AP. Therefore, it may be used to possibly improve the quality of life in menopausal women.
Aging in females is associated with a reduced metabolic function, increased incidence of neurodegenerative diseases, and cognitive dysfunction, as a result of loss in gonadal function. The change can alter the states of phosphorylation on the proteins, which cause dramatic changes in the cellular location or activity of the proteins. In this study, the differential phosphorylation of the proteins responsible for the functions related to cognition was studied using the ovariectomized adult rats. Phosphoproteomic analysis using the cerebral and hippocampal tissues could identify 51 differentially phosphorylated proteins including 12 proteins for energy metabolism, 8 cytoskeletal proteins, 6 signaling proteins, and other functional proteins in the ovariectomized rats. Further, anti-oxidative enzymes, superoxide dismutase and peroxiredoxin-2, which are known to be inactivated by phosphorylation, were found to be differentially phosphorylated in the cerebellum and hippocampus of the ovariectomized rats, respectively. Many of the deactivated proteins by differential phosphorylation identified in this study were overlapped to those of Alzheimer's disease cases. These results will provide information for neurodegenerative learning and memory impairments in women as brought about by menopause.
The purpose of this research was to investigate the effect of the boron supplementation on lipid profiles and antioxidant capacities in ovariectomized (OVX) rats. Rats were divided into 3 groups and fed diet with intake levels of boron (0.5 ppm,50 ppm,100 ppm) for 4 weeks. The half of rats in each group was ovariectomized and the others were sham-operated. And rats were fed same diets for 8 weeks after operation. Feed intake and weight gain were significantly increased by increasing boron intake and higher in OVX group than those in sham-operated. FER was significantly higher in OVX group than that of sham-operated. There were no significant differences in serum lipid profiles among the groups. The contents of hepatic total lipid were significantly higher in OVX group than those of sham-operated and the lowest in high-boron group. Hepatic GST activity was significantly decreased by ovariectomy and the lowest in very high-boron group. Hepatic catalase activity was the lowest in high-boron group of OVX. Hepatic TBARS level of high-boron group was the lowest in sham-operated groups. Hepatic TBARS level induced by AAPH was significantly decreased by increasement of boron supplementation. Taken together, this results suggest that the boron supplementation have the potential role for improving lipid profiles and antioxidant capacities in OVX rats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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