The electrophoretic patterns of plasma membrane surface proteins of normal rat liver cells and rat hepatomas were compared in 10% non-denaturing and 7-15% gradient non-denaturing gel. Chemical carcinogens, 2-Me DAB (2-methyl-4-dimethylaminoazobenzene) and DENA (diethylnitrosamine), were used to induce hepatoma in rats. One protein which disappeared in hepatoma was identified in normal rat liver by non-denaturing gel electrophoresis. Rabbit antisera were raised against this specific protein, and the protein was purified by Sephacryl S-200 column and immunoaffinity chromatography using the purified antibody. The purified protein showed two bands of molecular weights approximately 50 $kD_{\alpha}$ and 52 $kD_{\alpha}$ by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, which reacted specifically with the antibody. However only one band was observed in non-denaturing gel and also in isoelectric focusing with a pI value of 6.6. This study showed the existence of an unique protein on the plasma membrane surface of normal rat liver cells which disappeared in rat hepatomas induced by chemical carcinogens.
Rat liver LDH A-cDNA has been isolated from a .lambda.gt11-rat lover cDNA library and partially characterized. The size of the isolated rat liver LDH A-cDNA if shown to be 1.6Kb and restriction enzyme sites for the rat liver LDH A-cDNA are also mapped. 682-nucleotide sequence coding for 3'-end of rat liver LDH A-cDNA has been analyzed and compared to the nucleotide sequence of the same region of rat $C_6$-glioma cell LDH A-cDNA which has been cloned from the hormonally stimulated cell cultures. The result shows that 177 nucleotide sequences coding for the C-terminal 59-amino acids are identical but 505 nucleotide sequences of 3'-nontranslated region of the two LSH A-cDNA exhibit characteristic differences in thier nucleotide sequences. Computer analysis for the folding structures for 3'-end 400 nucleotide sequences of the two LDH A-cDNA shows a possibility implying that the two LDH A-mRNAs isolated from different tissues of rats may have different half life and therefore their translational efficiency may be different. It has been previously demonstrated that isoproterenol stimulated rat $C_6$ -glioma cell cultures produce LDH A-mRNA showing 2 to 3-fold longer half life in comparison to that of noninduced LHD A-mRNA. The result therefore support for the idea that hormonally stimulated rat $C_6$-glioma cells may produce LDH A-mRNA containing different nucleotide sequences at the 3'-end nontranslated region by which the hormonally induced LDH A-mRNA could have more stable secondary mRAN structure in comparison to that of noninduced LDH A-mRNA.
In order to understand the mechanism if the regulation of CYP 1A1 gene expression and ethoxyresorufin deethylase (EROD) activity in ex vivo system, we have studied the action of TCDD and 3MC in the isolated perfused female rat liver. CYP1A1 mRNA level and EROD activity were measured in rat liver that was isolated and perfused with various chemicals such as 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD), 3-methylcholanthrene (3MC), 17$\beta$-estradiol (E$_2$), morin. TCDD or 3MC alone perfusion into female rat liver resulted in increase of CYP 1A1 mRNA level and the magnitude of stimulation was six times higher with TCDD treatment than 3MC treatment. However E$_2$ perfusion into female rat liver showed inhibition of CYP 1A1 mRNA level. When 10$^{-8}$ M E$_2$ was administered concomitantly with either 10$^{-9}$ M TCDD or 10$^{-9}$ M 3MC, stimulated CYP 1A1 mRNA by either TCDD or 3MC was inhibited. Morin was examined for its effects on CYP 1A1 mRNA level and result was similar to that was observed with estrogen. EROD activity was also stimulated with either TCDD or 3MC perfusion, and the magnitude of EROD stiumlation was smaller than that of CYP 1A1 mRNA stimulation in response to TCDD or 3MC perfusion. Unlike CYP1A1 mRNA level, stimulation of EROD activity was greater with 3MC than TCDD. Concomitant perfusion either E$_2$ or morin with TCDD or 3MC inhibited 3MC perfusion or TCDD perfusion stimulated EROD activity. These data suggested that TCDD and 3MC might act diffrently in terms of regulation of CYP 1A1 gene expression in rat liver.
Yeon, Kue-Jeng;Byun, Si-Myung;Lee, Henry J.;Lee, Sean-Hyang;Kim, Hyun-Pyo
Archives of Pharmacal Research
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제12권2호
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pp.68-72
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1989
The hydrolysis rates of ester and amide derivatives of 20-dihydroprednisolonic acid were measured in rat serum and liver homogenate. The hydrolysis rate of the esters in serum was found to be faster than that in liver homogenate on the basis of blood volume and liver weight, while the amide derivatives showed much slower change. And it is also found that the size of substituents at C-21 and C-20 configuration expressed considerable effects on the hydrolysis rate of these derivatives.
Proceedings of the Korean Society of Veterinary Pathology Conference
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한국수의병리학회 2002년도 추계학술대회초록집
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pp.136-136
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2002
A rat (Rottus norvegicus) infected with C. hepatica was trapped incidentally. At necropsy, grossly yellowish-white nodules were scattered on the liver surface. Microscopically, granulomatous and fibrotic nodules containing eggs and/or adult worms of C. hepatica were detected in the liver. Septal fibrosis forming pseudolobules was observed as a diffuse change throughout the liver. In double staining with immunostaining of -SMA and toluidine blue, myofibroblasts and mast cells were generally observed within the fibrous septa with mast cells being along the myofibroblasts. In this case, we hypothesized that myofibroblast and mast cell might playa role in septal fibrosis of rat liver induced by C. hepatica infection.
Ngaione isolated from leaves of Myoporum deserti was dosed to the phenbarbitone and SKF 525 A pretreated male rat and studied the liver lesions. The results obtained were summarized as follows: 1. The liver lesions are mostly zonally distributed and involved the midzonal parenchyma chiefly with tendence to include also associated periportal hepatocytes. 2. The histopathology of liver due to ngaione after phenoharbitone pretreatment is characterized by the consistent pretence of degeneration and necrosis of the periportal parenchyma. 3. Zonal liver lesions caused by ngaione in the SKF 525 A pretreated rat are consistently periacinar in location.
Sulfasalzine is a widely administered drug against inflammatory-based disorders in human. However several cases of liver injury are associated with its administration. There is no stabilized safe protective agent against sulfasalazine-induced liver injury. Current investigation was designed to evaluate if N-acetylcysteine (NAC) and dithioteritol (DTT) as thiol reducing agents and/or vitamins C and E as antioxidants have any protective effects against sulfasalazine-induced hepatic injury in an ex vivo model of isolated rat liver. Rat liver was canulated and perfused via portal vein in a closed recirculating system. Different concentrations of sulfasalazine and/or thiol reductants and antioxidants were administered and markers of organ injury were monitored at different time intervals. It was found that 5 mM of sulfasalazine caused marked liver injury as judged by rise in liver perfusate level of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), and lactate dehydrogenase (LDH) (p < 0.05). A significant amount of lipid peroxidation and hepatic glutathione depletion were detected in drug-treated livers, accompanied with significant histopathological changes of the organ. Administration of NAC ($500{\mu}M$), DTT (${400\mu}M$), Vitamin C ($200{\mu}M$), or vitamin E ($200{\mu}M$) significantly alleviated sulfasalazine-induced hepatic injury in isolated perfused rat liver. The data obtained from current investigation indicate potential therapeutic properties of thiol reductants and antioxidants against sulfasalazine-induced liver injury.
To evaluate an effect of toluene application to skin on the enhancement of liver damage in $CCl_4$-pretreated rats, toluene (35 mg/$cm^2$) was sequentially applied for 5 days to the skin of liver damaged rats with $CCl_4$ (6 times every other day: 0.1 ml/100 g body weight-50% $CCl_4$ in olive oil) On the basis of the functional and morphological findings in rat liver, appling toluene to the skin in liver damaged animals led to the more enhanced liver damage. In addition, by applying toluene to skin of liver damaged rats, the hepatic cytochrome P450 content was somewhat more increased, but the hepatic benzylalcohol dehydrogenase activity was significantly decreased (P<0.001), whereas benzaldehyde dehydrogenase activity was not statistically changed. In conclusion, the toluene application to skin in liver-damaged rat led to enhancement of liver injury that may be due to the accumulation of toluene metabolite in liver.
This study was conducted to assess the relation between threonine (Thr) oxidation rate and threonine efficiency on rat and chicken fed with graded levels of protein and threonine. The increase in threonine content from 0.28 to 0.72% in a diet containing 12.0% crude protein (CP) caused a gradual increase in threonine dehydrogenase (TDG) activity in rat liver. Similar, but more pronounced results were observed after 18.0% CP in the diet. Both protein levels in combination with the highest level of threonine supplementation increased liver TDG activity significantly, indicating enhanced threonine catabolism. Parameters of efficiency of threonine utilization calculated from parallel nitrogen balance studies decreased significantly and indicated threonine oversupply after a maximum of threonine supplementation. At the lower levels of threonine addition the efficiency of threonine utilization was not significantly changed. In the chicken liver up to 0.60% true digestible threonine (dThr) in the 18.5% CP diet produced no effect on the TDG activity. However, TDG activity in the liver was elevated by the diet containing 22.5% CP (0.60% dThr) and the efficiency of threonine utilization decreased, indicating the end of threonine limiting range. In conclusion, the in vitro TDG activity in the liver of rat and growing chicken has an indicator function for the dietary supply of threonine.
We investigated the expression profiles of rat fibrotic liver induced by bile duct ligation and scission (BDL/S) using the 3'-directed cDNA libraries. The possibility that the 3'-directed cDNA library represents the mRNA population faithfully was examined by northern blots. During the northern analysis based on fibrotic liver expression profile, we found for the first time that purine specific sodium nucleoside cotransporter (SPNT) was upregulated in BDL/S-induced fibrotic liver. To determine whether the accumulation of bile juice could affect the expression of SPNT mRNA or not, we examined the change of SPNT mRNA expression at 3, 14, 28 days after BDL/S operation. No change in SPNT expression was observed in rat liver at 3 days after surgery. In contrast, there were significant increases in SPNT expression at 14 and 28 days after surgery. We also examined whether chronic liver damage affected SPNT mRNA expression. SPNT mRNA level was significantly increased in BDL/S-induced fibrotic rat liver, whereas no significant change was obserbed in fibrotic livers chronically exposed to carbon tetrachloride or dimethylnitrosamine. From the above results, although further study might be needed, it was considered that the increment of SPNT mRNA in BDL/S liver morphological compatibility to human was remarkable.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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