A rapid, user-friendly and simple immune-chromatographic dipstick kit named 'rapid immune-gold strip' (RIGS) kit was developed in a novel single strip format to detect on-site detection of Tomato spotted wilt virus (TSWV). Immunoglobulin G (IgG) from polyclonal antisera raised in rabbits against TSWV was purified through protein-A affinity chromatography and then the purified TSWV-IgG was conjugated to colloidal gold nano-particles which served as a test line on nitrocellulose membrane. Protein A that non-specifically binds to TSWV antibody was used as a control line on the same strip. The diagnosis process with the TSWV-RIGS involves simply grinding the suspect plant sample in a bag that contains the extraction buffer and inserting the strip the bag. Results can be seen in 2-5 minutes. The flow of the complexes of gold particles coated with TSWV-IgG and a crude sap from TSWV-infected pepper, tobacco and tomato plants resulted in intensive color formed on the test lines proportional to the concentrations of TSWV. The RIGS-TSWV kit did not show any cross-reactions against other tomato-infecting viruses unrelated to TSWV. These results indicate that the TSWV-RIGS kit is highly sensitive and is not required for laboratory training and experience prior to testing. The TSWV-RIGS kit is suitable for on-site detection of suspect TSWV-infected plants as well as for laboratory diagnosis.
Wilson disease (WD) is an autosomal recessive disorder of copper metabolism that results in accumulation of copper primarily in the liver, the brain and the cornea. Mutations in the WD gene, ATP7B cause failure of copper excretion from hepatocyte into bile and a defective synthesis of ceruloplasmin. More than 370 mutations are now recognized, scattering throughout the ATP7B gene. Since WD has protean clinical presentations, awareness of WD in clinical practice is important for the early diagnosis and prevention of accumulated copper toxicity. None of the laboratory parameters alone allows a definite diagnosis of WD. There are numerous pitfalls in the diagnosis of WD. Low serum ceruloplasmin concentrations, increased 24 hour urinary copper excretion, increased hepatic copper concentrations and the presence of Kayser-Fleischer rings in the cornea are major diagnostic points. A combination of any two of these 4 laboratory findings is strong support for a diagnosis of WD. Molecular methods are now being used to aid diagnosis. Molecular genetic testing has confirmed the diagnosis in individuals in whom the diagnosis is not clearly established biochemically and clinically. Siblings should be screened for WD once an index case has been diagnosed. Discrimination of heterozygotes from asymptomatic patients is essential to avoid inappropriate lifelong therapy for heterozygotes. Genetic testing, either by haplotype analysis or by mutation analysis, is the only reliable tool for differentiating heterozygote carriers from affected asymptomatic patients. Currently, genetic testing is of limited value in the primary diagnosis. However, genetic testing will soon play an essential role in diagnosing WD as rapid advancement of biomedical technology will allow more rapid, easier and less expensive mutation detection.
The polymerase chain reaction(PCR) assay was used for rapid diagnosis from blood and organ samples experimentally infected with Listeria monocytogenes. This method used a pair of primers based on a unique region in the 16S rRNA sequence of L monocytogenes. Procedure A was based on dilution of the blood sample followed by lysis of bacterial cell and direct analysis of the lysate with PCR. In artificially infected blood samples with L monocytogenes, it was possible to detect fewer than 40 cells per ml of blood. However, L monocytogenes was detected low rates on infected organs by the direct PCR. In procedure B, enrichment cultivation was used to increase numbers of bacteria before lysis and PCR. L monocytogenes was detected from 23 samples of 24 liver and spleen, respectively, and 18 samples of 24 blood were found to be positive by PCR on a subset of 72 organ samples, whereas L monocytogenes were detected on 63 organ samples in classical culture technique. It was required to analyze including enrichment steps were 6h and 18h on the procedure A and B, respectively.
For the effective control of Syphilis, many investigators have developed a more rapid, simple and economical screening serological test which is adequately sensitive and specific. To fulfill the requirements of a more rapid serologic test for syphlis, a substitute for the conventional serum specimen was needed since considerable time and labor are involved in the processing of blood to serum. Burdon suggested the use of plasma in the serologic tests for syphilis as a substitute for serum. He noticed that plasma was more sensitive than serum in the Kline and Kahn tests, and attributed this to the presence of more antibody-like substance, "reagin" in plasma than in serum. However, to make plasma sufficiently sensitive, it was necessary to inactivate plasma by heating at a temperature of $56^{\circ}C$ for about 30 minutes. Heating of plasma resulted in the precipitation of fibrinogen which made centrifugation necessary to obtain dear plasma. Since the chief disadvantage to the use of unheated plasma(or serum) was a reduction in sensitivity of results-which probably was due to a labile factor such as complement-Portnoy et al began to consider rapid chemical methods of inactivation of plasma(or serum). They experienced that choline chloirde was shown to be anticomplementary which suggested its use as an inactivating agent for unheated plasma(or serum). In 1959 Portnoy et al reported the Rapid Plasma Reagin(RPR) Test for syphilis which is a more rapid, economical and simple. But still this test has many disadvantages as a rapid performing, field and office procedure, because it requires the usual laboratory equipments such as centrifuge, rotating machine, microscope etc. To substitute these disadvantages of the RPR test, in 1962, Portnoy et al developed the Rapid Plasma Reagin(RPR) card test for syphilis, which has the following advantages: a) Simplicity and rapidity of performance, b) Requires no laboratory equipments, c) Stable antigen suspension, d) Adequate sensitivity and specificity. This RPR card test can be used as a rapidly performing and screening test in field investigation, outpatient clinics, small laboratories and hospitals doing limited syphilis serology, and predonor in blood bank. Private clinic which has limited laboratory equipment and technic for syphilis serology can also use this RPR card test as a tool in the rapid diagnosis of syphilis. It was thought that this RPR card test is a useful tool in Korea for private physician and mass survey for syphilis diagnosis. But Portnoy patented the reagents needed for the performing the RPR card test. Therefore authors developed newly the reagents and according to Portnoy's method evaluated the newly developed. RPR card test compared with the VDRL, Kolmer CF, and RPCF tests. The RPR card and VDRL tests were performed plasma and serum from the total 1,132 cases. Among these 1,131 cases, 521 were syphilis suspected laboratory specimens, and 611 were syphilis unsuspected healthy young men. After screening with these two tests, the RPR card and VDRL tests, reactive specimens to the above one or both tests were retested by the Kolmer CF and RPCF tests.
Yang, Jin Seo;Cho, Yong Jun;Kang, Suk Hyung;Choi, Hyuk Jai
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제54권5호
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pp.426-430
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2013
The prognosis of solitary plasmacytoma varies greatly, with some patients recovering after surgical removal or local fractional radiation therapy, and others progressing to multiple myeloma years later. Primary detection of progression to multiple myeloma is important in the treatment of solitary plasmacytoma. There have been several analyses of the risk factors involved in the early progression to multiple myeloma. We describe one case of solitary plasmacytoma of the lumbar vertebra that was treated with surgical decompression with stabilization and additional radiotherapy. The patient had no factors associated with rapid progression to multiple myeloma such as age, size, immunologic results, pathological findings, and serum free light chain ratio at the time of diagnosis. However, his condition progressed to multiple myeloma less than two months after the initial diagnosis of solitary plasmacytoma. We suggest that surgeons should be vigilant in watching for rapid progression to multiple myeloma even in case that the patient with solitary plasmacytoma has no risk factors for rapid progression to multiple myeloma.
첫 번째 에볼라 출혈열 발발은 1976년 콩고 민주 공화국과 수단에서 발생했으며, 이후 2014년서 아프리카에서 27,741건, 11,284건의 사망자가 발생했다. 발열은 Filoviridae 계열에 속하며 ssRNA 게놈을 가진 에볼라 바이러스에 의해 발생했다. 바이러스의 알려진 아형은 Bundibugyo ebolavirus, Reston ebolavirus, Sudan ebolavirus, Tai Forest ebolavirus 및 Zaire ebolavirus이다. 역사적으로 에볼라의 주요 발생 지역은 동부 및 중부 아프리카 열대 지방에서 발생했다. 서아프리카에서의 발발로 인해 전세계 사회에서 수많은 사망과 공포가 확산되었다. 효과적인 치료와 백신이 없는 상황에서 전염병을 관리하고 통제하는 가장 중요한 방법은 정확한 진단을 통해서이다. WHO(세계 보건기구)는 체외진단(IVD) 검사에서 에볼라의 선택과 사용에 관한 긴급 지침을 발표했다. RealStar Ebolavirus Screen RT-PCR 키트 1.0 (Altona), Liferiver-Ebola Virus (EBOV) 실시간 RT-PCR 키트, Xpert 에볼라 검사 및 ReEBOV 항원 검사를 통해 수많은 회사 및 연구 기관에서 진단을 받고 4가지 WHO 조달 승인 진단을 확인했다. 또한, 신속한 검사 키트 Rapid Diagnosis Test (RDT)와 같은 새로운 진단법이 현재 연구 중이다.
In this study, a biosensor was developed to rapidly diagnose the swine sarcoptic mange (Sarcoptes scabies var. suis). The ELISA was modified to reduce the processing time for rapid diagnosis. The biosensor consists of a biological reaction part, and a measurement and control part. The biological reaction part was designed for using micro-pumps and valves for fluid transportation, and the measurement control part composed of a photodiode, a light-emitting diode fur light measurement, and a microcomputer to implement assay A polystyrene covet was used as a reaction chamber. Signal output was read as the rate of change in optical density at 645nm. Eighteen pigs diagnosed with sacroptic mange and 19 control pigs were tested. Fifteen sacbies-infested pigs showed positive results ($83.3\%$ sensitivity). Sixteen control pigs showed negative results ($84.2\%$ specificity). The system could execute a diagnosis cycle in about 45 min. The results suggest that this biosensor is useful for the rapid diagnosis of swine sacroptic mange.
Human gnathostomiasis is a parasitic disease caused by Gnathostoma nematode infection. A rapid, reliable, and practical immunoassay, named dot immuno-gold filtration assay (DIGFA), was developed to supporting clinical diagnosis of gnathostomiasis. The practical tool detected anti-Gnathostoma-specific IgG4 in human serum using crude extract of third-stage larvae as antigen. The result of the test was shown by anti-human IgG4 monoclonal antibody conjugated colloidal gold. The sensitivity and specificity of the test were both 100% for detection in human sera from patients with gnathostomiasis (13/13) and from healthy negative controls (50/50), respectively. Cross-reactivity with heterogonous serum samples from patients with other helminthiases ranged from 0 (trichinosis, paragonimiasis, clonorchiasis, schistosomiasis, and cysticercosis) to 25.0% (sparganosis), with an average of 6.3% (7/112). Moreover, specific IgG4 antibodies diminished at 6 months after treatment. This study showed that DIGFA for the detection of specific IgG4 in human sera could be a promising tool for the diagnosis of gnathostomiasis and useful for evaluating therapeutic effects.
Yoon, Sung-Jin;Park, Young-Jun;Kim, Hyun Ju;Jang, Jinwoo;Lee, Sang Jun;Koo, Sunwoo;Lee, Moo-Seung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권10호
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pp.1683-1690
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2018
Accurate and rapid diagnosis of influenza infection is essential to enable early antiviral treatment and reduce the mortality associated with seasonal and epidemic infections. Immunochromatography is one of the most common methods used for the diagnosis of seasonal human influenza; however, it is less effective in diagnosing pandemic influenza virus. Currently, rapid diagnostic kits for pandemic influenza virus rely on the detection of nucleoprotein (NP) or hemagglutinin (HA). NP detection shows higher specificity and is more sensitive than HA detection. In this study, we time-dependently screened expression conditions, and herein report optimal conditions for the expression of recombinant nucleoprotein (rNP), which was 48 h after infection. In addition, we report the use of the expressed rNP in a rapid influenza diagnostic test (SGT i-flex Influenza A&B Test). We constructed expression vectors that synthesized rNP (antigen) of influenza A and B in insect cells (Sf9 cells), employed the purified rNP to the immunoassay test kit, and clearly distinguished NPs of influenza A and influenza B using this rapid influenza diagnostic kit. This approach may improve the development of rapid test kits for influenza using NP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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