This study was conducted to identify the soluble carbohydrates in soybean seeds using on-line HPLC-RID-ES/MS and HPLC behavior, and to determine their contents for high quality soybean breeding. The monosaccharide (glucose) and three oligosaccharides (sucrose, raffinose, and stachyose) were identified in Korean soybeans by their chromatographic behavior and results of on-line HPLC-RID-MS with Electrospray Ionization mode. On the basis of HPLC with a RID detector, the 32 Korean major soybeans contain $0.37{\pm}0.26\%$ glucose, $4.55{\pm}0.91\%$ sucrose, $1.19{\pm}0.19\%$ raffinose, and $2.72{\pm}0.37\%$ stachyose on a dry basis. In 468 soybean germplasms, the ranges of glucose, sucrose, raffinose, and stachyose were $0.03 - 0.98\%$, $2.33 - 6.96\%$, $0.08 -1.87\%$ and $0.75 - 3.18\%$, respectively. Among 500 soybean samples, oligosaccharide contents of 32 Korean major cultivated soybeans and 468 soybean germplasms were varied $5.83 - 10.06\%$ and $3.66 - 10.32\%$, respectively. The composition of glucose, sucrose, raffinose, and stachyose in soluble carbohydrates of 500 soybean samples were $2.07 {\pm} 1.75\%$, $58.01{\pm}5.82\%$, $10.13{\pm}2.28\%$ and $29.80{\pm}4.54\%$, respectively. Sucrose appeared to be most prevalent in soybean soluble carbohydrates.
Gu, Ming-Yao;Kwon, Hak Cheol;Song, Min Ok;Ko, Hyeonseok;Cha, Jin-Wook;Lee, Won Jong;Yang, Hyun Ok
Natural Product Sciences
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v.19
no.3
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pp.242-250
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2013
The autophagy-lysosomal pathway is an important protein degradation system, and its dysfunction has been implicated in a number of neurodegenerative diseases, including Parkinson's disease. Raphani Semen, one of the herbs of Yeoldahanso-tang (YH), has neuroprotective effects via the autophagy pathway. The activity-guided method was used to isolate and identify the components of Raphani Semen. In this experiment, the total extract of Raphani Semen was partitioned to n-butanol, methylene chloride, and water fractions. Flow cytometry data showed that only the water fraction showed autophagy-inducing activity in vitro. Compounds 1 and 2 were isolated from this water fraction by preparative HPLC separation. The structures of compounds 1 and 2 were identified as stachyose and raffinose, respectively, by the analysis of various spectral data ($^1H$ NMR, $^{13}C$ NMR, and MS) and comparisons with standard stachyose and raffinose. Of these two compounds, raffinose showed autophagy-inducing activity in PC12 cells through the mTOR pathway.
Kotiguda, Girigowda;Kapnoor, Shankar S.;Kulkarni, Dhananjay;Mulimani, Veerappa H.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.9
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pp.1430-1436
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2007
[ ${\alpha}$ ]-Galactosidase was immobilized in a mixture of k-carrageenan and locust bean gum. The properties of the free and immobilized enzyme were then determined. The optimum pH for both the soluble and immobilized enzyme was 4.8. The optimum temperature for the soluble enzymes was $50^{\circ}C$, whereas that for the immobilized enzyme was $55^{\circ}C$. The immobilized enzyme was used in batch, repeated batch, and continuous modes to degrade the raffinose-family sugars present in soymilk. Two hours of incubation with the free and immobilized ${\alpha}$-galactosidases resulted in an 80% and 68% reduction in the raffinose oligo saccharides in the soymilk, respectively. In the repeated batch, a 73% reduction was obtained in the fourth cycle. A fluidized bed reactor was also designed to treat soymilk continuously and the performance of the immobilized ${\alpha}$-galactosidase tested at different flow rates, resulting in a 90% reduction of raffinose-family oligosaccharides in the soymilk at a flow rate 40 ml/h. Therefore, the present study demonstrated that immobilized ${\alpha}$-galactosidase in a continuous mode is efficient for reducing the oligosaccharides present in soymilk, which may be of considerable interest for industrial application.
${\alpha}$-Galactosidase from Aspergillus niger as a possible enzyme for removal of flatulence factors in soybean foods was produced the highest in 120 hours in either Czapeck-Dox liquid medium or wheat bran solid medium. The most efficient carbon and nitrogen sources in Czapeck-Dox medium were raffinose and sodium nitrate, respectively, whereas the addition of the sources showed negative effects in wheat bran. pH optima for enzyme activity and stability were 4.0-5.0 and 3.5-6.5, respectively, and optimum temperature for stability was $40-50^{\circ}C$. Upon reaction on p-nitrophenyl-${\alpha}$-D-galactoside, Michaelis constant was 0.42 mM and maximum velocity was 152 ${\mu}moles$ substrate/minute/kg solid medium. Mercuric chloride acted as a strong noncompetitive inhibitor and p-chloromercuribenzoate, even in low concentration, acted as a competitive inhibitor. Crude ${\alpha}$-galactosidase hydrolyzed raffinose and stachyose completely, giving spots of monosaccharides only on thin-layer chromatogram.
Studies were conducted to seek reasonable methods of rapid freezing of mouse embryos using liquid nitrogen. The effects of the cryoprotectants concentration and the substitution of raffinose to sucrose in freezing and dilution medium on mouse embryo survival rates were determined using the FDA-test. The summarized results are as follows : 1. When 0.3M of sucrose was added into the freezing and dilution medium, FDA scores of embryos were 1.48(1.5M), 3.81(3.0M) and 4.10(4.5M). Higher FDA scores of embryos were obtained in 3.0M and 4.5M glycerol concentrations (P<0.05). 2. With the addition of 0.3M raffinose to the freezing and dilution medium, FDA scores of embryos did not significantly differ between glycerol levels ; 3.97(1.5M), 4.11(3.0M) and 3.54(4.5M). Higher scores of embryos existed in 3.0M glycerol concentration. 3. Concentration of sucrose or raffinose in freezing and dilution medium affected FDA scores of embryos. When sucrose concerations of 0.3, 0.5 and 1.0M were added to the freezing medium, FDA scores of embryos were 3.12, 2.38 and 0, respectively. However, when the same concentrations of raffinose were added to freezing medium, the FDA scores were 4.21, 2.91 and 0. In both cases, better FDA scores of embryos were attained in 0.3M of sucrose or raffinose (P<0.01).
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.12
no.4
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pp.401-406
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1983
Changes in the soluble sugar content contained in the soybean, soybean milk, soybean curd and soybean whey were determined to investigate the method of reducing the introductions of soluble oligosaccharides like sucrose, raffinose and stachyose, which cause flatulence in human, to soybean curd from soybean by extending the soaking time of soybean. The soybean curd yields according to the extention of the soaking time were also determined. Markedly increased glucose, slightly reduced fructose and sucrose and noticeably reduced raffinose in soybean milk were observed with extended soaking time. Most of sucrose, raffinose and all of maltose were transferred to soybean whey. Gradual increase of soybean curd yields were obtained by extending soaking time within the experimental conditions.
The experiment was carried out to the find variation of the sugar contents in the tip and basal part of the cotyledon and remaining portion of embryos in Phaseolus vulgahs seeds during germination with HPLC analysis method. Water content in cotyledon of kidney bean seed was about 6.4~6.5 of fresh weight and incresed to 45.8~71.2% during germination showing that tip part of cotyledon has more water content by 1.1~3.8% compared to the lower part of it. Higher water onten was observed in the rest parts of the seed except cotyledon such as plumule, radicle and hypocotyl showing that it increased to 72.2~93.3% depending on the different tissue organs. Main important sugars in kidney seeds during germination stages are; raffinose, sucrose, glucose and fructose, and the amount are differed with the kinds of embryo in kidney bean seed organs and stages of germination. Raffinose amount in kidney bean is increasing repeatly when seeds become wet but disappear it soon after seed have germinated especially in growing embryo parts. Raffinose in basal parts of cotyledons were still presented some an amount after germination. Sucrose is synthesized highly in plumule embryo at the beginning stage of germination but disappeared it from 5 days after seeding stages. Amount of sucrose in cotyledon of kidney seeds and seedlings increased continuously after germination. The amount of glucose and fructose in the cotyledons of kidney seeds during germination varied 5~10% or 5~15% but in the germinating and growing organs, plumule, they increased continuously after germination.
Some chemical properties were investigated for barley kernels at different growth stages. Crude fat, crude protein, starch, alcohol-insoluble solids(AIS), and ${\beta}-glucan$ increased until $31{\sim}36\;days$ from ear emergence and thereafter remained relatively constant, whereas ash and crude fiber contents were gradually decreased through the whole period of maturation. As barley kernels became mature, their water contents kept decreasing, and the content of milky stage barley kernel at $31{\sim}36th\;days$ from ear emergence ranged from $40{\sim}50%$. Free sugars including glucose, fructose, sucrose, raffinose, maltose, and kestose were identified in the growing kernels. Glucose, sucrose and kestose decreased with maturation while raffinose slightly increased. Barley kernels on the 43rd day from ear emergence contained 0.62% sucrose, 0.46% raffinose, 0.33% kestose, 0.19% glucose, 0.17% fructose, 0.04% maltose. Analysis of minerals for barley kernels at different growth stages showed that the growing kernels contained K, P, Mg, Ca, Na, Fe, Zn, Mn, Cu in decreasing order. Vitamin $B_1$ content tended to increase with kernel growth, showing maximum value of $350\;{\mu}g\;per\;100\;g$ dry weight on 36th day from ear emergence.
For the removal of raffinose and stachyose related to flatulence in soybean, ${\alpha}-Galactosidase$ activity of six commercial enzyme preparations was compared and their enzymatic characteristics were investigated. Among the tested enzymes, one product from Aspergillus niger was shown to be the most potent in ${\alpha}-Galactosidase$ activity. The enzyme characteristics of the selected preparation were shown to be pH 4.0-4.5 for optimum activity, pH 4-5 for optimum stability and $45^{\circ}C$ for optimum activity. Upon reaction on a synthetic substrate, $p-nitrophenyl-{\alpha}-D-galactoside$, Michaelis constant was 2.08 mM and maximum velocity was 435 micromoles of substrate/minute/g enzyme preparation. The enzyme was proved to be essential for SH group for its activity and capable of hydrolyzing raffinose, sucrose and $p-nitrophenyl-{\alpha}-D-galactoside$ almost completely. Thin-layer chromatographic analysis exhibited that the enzyme treatments of raffinose and stachyose were resulted to produce only monosaccharides in 2 hours of hydrolysis. It was, therefore, assumed that the flatulence factor in soybean foods can be easily removed by the use of enzymes showing ${\alpha}-Galactosidase$ activity.
Kim Hyun Suk;Lee Kyung-Seob;So Jae Ho;Yoon Ki-Hong
Korean Journal of Microbiology
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v.40
no.4
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pp.328-333
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2004
The maximum productivity of ${\alpha}-galactosidase,$ capable of hydrolyzing completely ${\alpha}-D-l,6-galactopyranosyl$ linkages within oligomeric substrates such as melibiose, raffinose and stachyose to liberate galactose residue, was reached to 718 mU/ml in the culture filtrate of Bacillus licheniformis at death phase. The ${\alpha}-galactosidase$ was identified to show different efficiencies for hydrolyzing the ${\alpha}-galactooligosaccharides$ according to analysis of reaction products by both TLC and quantification of the liberated reducing sugars. The enzyme was active on ${\alpha}-galactooligosaccharides$ in the order of melibiose, raffinose, and stachyose. Though the hydrolyzing activity of enzyme was faintly inhibited by reaction products such as galactose, glucose and sucrose with amounts of five folds more than the added substrates (20 mM), the largest inhibition of enzyme activity was caused by galactose among the end products. Unknown compound, which migrated slower than melibiose on TLC, was detected during hydrolysis reaction of melibiose, suggesting that the ${\alpha}-galactosidase$ has a glycosyl transferase activity. In addition, the enzyme was able to hydrolyze efficiently raffinose and stachyose existed in the soluble extract of soybean meal.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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