본 연구는 유기농 채소종자의 소독방법으로 가장 적합한 온탕침지법을 개발하고자 수행하였다. 엽채류 중 열에 비교적 민감한 상추 종자의 최적 온탕침지 조건은 $45^{\circ}C$ 25분이었으며 배추와 무 종자 $50^{\circ}C$ 25분이었다. 온탕침지로 이들 종자의 발아율과 생장은 무처리와 비슷하거나 촉진되었고, Alternaria, Aspergillus, Penicillium, Mucor 등의 종자감염 곰팡이는 90% 이상 혹은 100% 억제되었으며 상추 종자에 감염된 세균 억제효과는 98.5%였다 오이, 고추, 호박 등 과채류 종자 중에는 호박이 가장 온수에 감수성이었는데 $50^{\circ}C$ 15분 침지가 적합하였고 오이와 고추 종자는 $50^{\circ}C$ 25분 처리가 가장 효과적이었다. 온탕 침지한 오이 및 호박 종자의 발아율 및 생장은 무처리와 비슷하거나 약간 높았는데, 고추의 경우에는 발아율은 50% 이상 증가되었으며 뿌리생장은 5배 이상 신장되었다. 이들 종자에 감염된 곰팡이 중 Rhizopus, Aspergillus, Penicillium, Mucor등의 억제율은 $72%{\sim}95.4%$였고 감염세균의 억제율은 $65.5%{\sim}86.0%$였다. 본 시험의 결과로 볼 때 온탕침지의 최적 조건은 종자에 따라 다소 다르며, 온탕침지는 모든 종자전염성 병원균을 방제할 수는 없으나 이들을 효과적으로 억제할 수 있는 기술로 유기농업에서 유용하게 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
건강웰빙식품의 하나로서 수요가 증가하고 있는 새싹채소는 미생물학적 관점에서 안전성 확보방안이 요구되고 있다. 따라서 새싹채소의 병원성 미생물을 제거하기 위해 적무종자의 발아 전 침지동안 종자 소독처리에 따른 미생물 제어 효과와 발아율을 평가하였다. L. monocytogenes ATCC 19111가 3~4 log CFU/g의 농도로 접종된 적무 종자는 20,000 ppm calcium hypochlorite, 50 ppm과 100 ppm 염소수, 오존수, 전해산화수 및 전해환원수로 처리하였으며, 증류수에 침지시킨 종자를 대조군과 비교하였다. 발아율은 각 처리군에 대해 48시간 동안 조사하였다. 일반세균과 L. monocytogenes 모두 20,000 ppm calcium hypochlorite에 침지 후 3 logs 이상의 가장 큰 감소효과를 보였고, 염소수, 전해산화수와 전해환원수 침지 후 일반세균과 L. monocytogenes 수는 각각 3 logs와 2 logs 감소되었으며, 염소수와 오존수를 제외하고는 온도변화에 따른 유의적인 차이는 없었다. 종자 발아 후 일반세균 수는 모든 처리군에서, L. monocytogenes 수는 염소수 50 ppm과 오존수를 제외한 모든 처리군에서 대조군보다 유의하게 낮았으며, 염소수 100 ppm을 제외하고는 온도변화에 따른 유의적인 차이는 없었다. 발아율은 48시간 후 calcium hypochlorite(82.3~84.8%)를 제외하고 다른 모든 소독제 처리 시 93.5~97.7%로 나타났으며 대조군과 유의한 차이가 없었다. 이 연구에서 사용된 소독제 처리가 적무 종자에 접종된 L. monocytogenes를 완전히 사멸시키지는 못했지만, 발아 동안 재배수의 소독처리가 추가 병행된다면 생존한 균의 급속한 성장을 지연시킬 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구는 열처리 방법에 의한 국내산 새싹채소 종자 3종(무, 배추, 다채)과 수입산 2종(무, 적양배추)의 발아율과 총 호기성세균 및 병원성 미생물의 저감화에 대해 실시하였다. 열처리는 40, 50, 60, 70$^{\circ}C$의 온도조건에서 각각 15, 30분 동안 실시하였다. 발아율은 60$^{\circ}C$ 이하 조건에서 열처리 후 배양 24시간 후 45-97%로 나타났으며, 대부분 70$^{\circ}C$ 이상의 조건에서 발아율이 감소하였다. 열처리에 의한 미생물 저감화 효과는 국내산 무 종자의 경우 총 호기성세균은 70$^{\circ}C$, 30분 열처리 조건에서 1.71 log CFU/g 감소하였으며 대장균군은 60$^{\circ}C$ 이상의 조건에서 검출한계이하로 나타났다. 국내산 배추 종자는 60$^{\circ}C$ 이상의 조건에서 총 호기성 세균과 대장균군은 각각 1.23-1.34, 2.77 log CFU/g 감소하였다. 국내산 다채 종자는 70$^{\circ}C$, 15분 열처리시 0.3 log CFU/g 감소되었다. 수입산 무 종자는 60$^{\circ}C$ 이상의 조건에서 2.12-2.30 log CFU/g 감소하였다. 수입산 적양배추 종자는 40$^{\circ}C$ 이상의 조건에서 0.66-0.84 log CFU/g 감소하였으며 대장균군은 검출한계 이하의 수준으로 검출되지 않았다. 대부분의 시료에서 B. cereus는 열처리에 의한 유의적인 차이가 나타나지 않았으며, 대장균, S. aureus 및 Salmonella sp.는 검출한계 수준에서 검출되지 않았다.
묵은 배추와 무 종자에 저선량 ${\gamma}$선을 조사하여 종자발아율과 발아유식물의 효소활성 변화를 조사하였다. 발아율은 대조구에 비해 저선량 조사구에서 증가하는 경향을 보였는데 특히 발아초기단계에 효과가 뚜렷하게 나타났으며 배추는 2 Gy와 8 Gy조사구에서 4-ll % 정도, 무는 2 Gy, 6 Gy, 10 Gy 조사구에서 25-41% 정도 증가하였다. 저선량 ${\gamma}$선이 조사된 배추와 무의 유묘초장도 저선량 조사구에서 증가하였는데 특히 배추의 경우는 4 Gy와 l0 Gy 조사구에서, 무는 6 Gy 조사구에서 뚜렷한 증가효과를 보였다. 저선량 조사구의 단백질 함량은 발아초기단계에 대조구에 비해 증가하였으며 POD와 CAT 활성은 4 Gy와 l0 Gy 조사구에서 증가하였다. 이에 저선량 $\gamma$선에 의해 묵은 종자의 발아와 효소활성이 촉진됨을 확인할 수 있었다.
Glucosinolates (GSLs), beneficial secondary metabolites for human health are abundantly present in radish vegetable. Radish is a member of Brassicaceae family and its seed, leaf and root contain very important GSLs. The objective of this study was to determine the variation of individual and total GSL contents in leaves and roots of 44 radish (Raphanus spp.) germplasm (26 R. sativus L., 3 R. raphanistrum, and 15 R. sativus L. var. raphanistroides Makino), and compare the GSL contents between leaves and roots among three Raphanus species. Thirteen GSLs were identified, being the glucoraphasatin (GRS) and glucobrassicin (GBS) the most abundant aliphatic and indolyl GSLs in both the leaves and roots. Variation in individual and total GSL contents was found among the germplasm of three Raphanus species. The GRS content was higher in roots than that of leaves in all three Raphanus species but the GBS content was higher in leaves than roots. GRS was represented 87.0%, 92.7% and 94.7% of the total GSL in roots of R. sativus L., R. raphanistrum and R. sativus L. var. raphanistroides (Makino) germplasm, respectively. Germplasm of R. raphanistrum exhibited the highest (average, $79.5{\mu}mol/g\;dw$) total GSL with a ranged from 62.7 to $92.9{\mu}mol/g\;dw$. The germplasm IT119288, Joseonmu and IT119262 from R. sativus L., RA 504 and K046542 from R. raphanistrum, and Gyeongju-2003-32 (G2003-32) and IT302373 from R. sativus L. var. raphanistroides (Makino) had high total GSL contents and these could be good candidates for developing the functional compounds-rich varieties in radish breeding program.
Kim, Sunggil;Lim, Heerae;Cho, Kang-Hee;Park, Pue Hee;Park, Suhyung;Sung, Soon-Kee;Oh, Daegeun;Kim, Ki-Taek
한국육종학회지
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제41권3호
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pp.194-204
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2009
Cytoplasmic male sterility (CMS) and fertility restoration have been utilized as valuable tools for $F_1$-hybrid seed production in many crops despite laborious breeding processes. Molecular markers for the selection of CMS-related genes help reduce the expenses and breeding times. A previously reported genomic region containing the Ppr-B gene, which is responsible for restoration of fertility and corresponds to the Rfo locus, was used to develop gene-based or so-called "functional" markers for allelic selection of the restorer-of-fertility gene (Rfo) in $F_1$-hybrid breeding of radish (Raphanus sativus L.) Polymorphic sequences among Rfo alleles of diverse breeding lines of radish were examined by sequencing the Ppr-B alleles. However, presence of Ppr-B homolog, designated as Ppr-D, interferes on specific PCR amplification of Ppr-B in certain breeding lines. The organization of Ppr-D, resolved by genome walking, revealed extended homology with Ppr-B even in the promoter region. Interestingly, PCR amplification of Ppr-D was repeatedly unsuccessful in certain breeding lines implying the lack of Ppr-D in these radishes. Ppr-B could only be successfully amplified for analysis through designing primers based on the sequences unique to Ppr-B that exclude interference from Ppr-D gene. Four variants of Rfo alleles were identified from 20 breeding lines. A combination of three molecular markers was developed in order to genotype the Rfo locus based on polymorphisms among four different variants. These markers will be useful in facilitating $F_1$-hybrid cultivar development in radish.
Self-incompatibility (SI) prevents self-fertilization by inhibiting the pollen tube growth of self-pollen. Molecular analysis has revealed that the S locus comprises a number of genes, such as the S-locus glycoprotein (SLG), the S-locus receptor kinase (SRK), and SP11 (SCR). Although molecular markers related to those genes have been developed, a simple S-haplotype detecting method has not been reported due to the highly polymorphic and relatively small coding regions. In this study, the sequence characterized amplified region (SCAR) markers were used to establish an efficient radish genotyping method. We identified the S-haplotypes of 192 radish accessions using 19 different markers, which proved to be highly reliable. The accessions were assigned to 17 types of S-haplotypes, including 8 types of SRKs and 9 types of SLGs. Since the developed SCAR markers are based on their gene sequences, we could easily identify the S-haplotypes by a single specific band, with the highest frequencies detected for SLG 5, SRK 1, and SLG 1, in order. Among the tested markers, the SLG 1, SRK 1, and SRK 5 markers exhibited high reliability, compared to phenotypic results. Furthermore, we identified the seven types of unreported SLGs using SLG Class -I and -II specific markers. Although the developed SCAR markers still need to be improved for the genotyping of all S-haplotypes, these markers could be helpful for monitoring inbred lines, and for developing the MAS in radish breeding programs.
In the present study, we analyzed the defensin protein deduced from Korean radish (Raphanus sativus L.) seeds.To express the genes in E. coli, we constructed a recombinant expression vector with a defensin gene, named rKRs-AFP gene isolated from Korean radish seeds. Over expressed rKRs-AFP proteins was separated by SDS-PAGE to determine the purity, and protein concentration was determined by the Bradford method. Antifungal activity was assessed by disk assay method against the tested fungi. As a result, when 500 mL of cell culture were disrupted by sonicator, 32.5 mg total proteins were obtained. The purified protein showed a single band on SDS-PAGE with estimated molecular weight about 6 KDa, consistent with the molecular mass calculated from the deduced amino acid sequence. The purified rKRs-AFP protein showed remarkable antifungal activities against several fungi including Aspergillus niger, Botrytis cinerea causing the gray mold disease, and Candida albicans. In field tests using the purified rKRs-AFP protein, the protein showed the reducing activity of disease spot and the mitigating effect of spreading of disease like agrichemicals. The immuno-assay of rKRs-AFP protein showed that the purified protein entirely accumulated at B. cinerea cytoplasm through the hyphal septa shown by fluorescence imaging. There was no fluorescence inside the cell, when the hypha was incubated without the protein. These all results indicate that the recombinant rKRs-AFP proteins can be utilized as a potential antifungal drug to control harmful plant fungal pathogens.
천연물기원 신농약 개발을 위한 기초 단계로서 국내에 자생하고 있는 31과 59종의 식물체를 대상으로 생물활성을 평가하여 생리활성물질 함유 식물자원을 탐색한 결과는 다음과 같다. 1. 벼멸구 살충성분 함유 식물자원 탐색결과 21과 38종 식물체중 피마자잎의 조추출물은 1%(w/v) 농도수준에서 100%의 살충력을 보였으며, 고삼의 잎, 줄기, 뿌리와 상치, 할미꽃은 각각 82%, 84%, 80%, 75%의 벼멸구 살충효과를 나타냈다. 2. 벼흰잎마름병에 대해 활성을 나타낸 식물은 사철쑥을 비롯한 8종이었으나, 저지원효과는 0${\sim}$2㎜로서 저조하였다. 3. 식물 조추출 혼합물의 벼멸구에 대한 살충 공력효과는 고삼뿌리+때죽잎 혼합조합이 134${\sim}$142%, 고삼뿌리+먹구슬나무종자 조합이 128${\sim}$155%이었다. 4. 적송 등 21종 식물체를 물과 MeOH로 추출하여 그 조추출물의 생리활성을 조사한 결과 무와 피의 종자에 대해 발아억제 효과를 보인 것은 적송, 상수리 2종이었다. 5. 적송의 MeOH 조추출 농도별 allelopathy 평가결과 2%(w/v) 농도수준에서 무종자에 대한 발아억제 효과는 100%이었으며, 5%(w/v) 농도에서는 무와 피종자 모두 완전억제 반응을 나타냈다.
배무채의 형태적 특성은 양친인 배추와 무의 중간형태이다. 잎은 윗부분이 배추이고 아래 부분이 무를 닮았다. 잎의 중륵은 무처럼 둥글지만 직경이 3cm 이상으로 크고 배추처럼 흰 색이다. 뿌리는 처음에 중간부위가 부풀어져 무 모양이었는데 유전적 안정화 과정을 거치면서 재래종 배추(뿌리배추)처럼 큰 직근으로 바뀌었다. 꽃은 흰 색이며 종자 꼬투리는 선명하게 두 부분으로 나누어진다. 윗부분이 무로서 길이가 약 4cm 정도이며 그 속에 3-4개의 종자가 들고 아래 부분이 배추로서 길이가 약 3cm 정도이며 그 속에 7-8개의 종자가 들어있다. 종자는 배추와 비슷한 적갈색이며 천립중이 5.5g이고 mL당 약 120립 정도이다. 가을에 배추와 같이 재배하면 약 5kg 정도까지 자라며 외엽이 아주 무성하고 억세게 보인다. 속잎은 노란색을 띠며 엉성하지만 약 900g 정도의 구를 형성한다. 잎과 뿌리 모두 항암과 항균작용이 큰 기능성 물질 썰포라펜(sulforaphene)을 다량으로 함유하고 있다. 배무채는 복2배체 식물로서 자가불화합성이 없고 따라서 자가수정이 잘되지만 벌이 많이 오는 타가수분식물이다. 배무채는 그의 모계였던 배추와의 교잡에서 자방친일 때는 교잡이 아주 잘 되지만 부계일 때는 완전한 불화합이며 부계였던 무 및 양배추와 흑겨자 사이에는 상반교잡 모두 불화합성이다. 그러나 복2배체 식물인 유채 및 황겨자와의 사이에는 상반교잡 모두 화합성이며 갓과의 사이에는 상반교잡 모두 부분화합성이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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