A sensitive enzyme immunoassay for serum TSH has been developed utilizing the tight binding between biotin and avidin, and three layered protein polystyrene beads as solid phase. To increase binding capacity of TSH and sensitivity of the assay, the polystyrene beads were coated sequentially with mouse immunoglobulin as first layer, rabbit antimouse immunoglobulin as second layer and monoclonal anti-TSH as third layer. A serum sample was incubated simultaneously with a monoclonal anti-TSH immobilized polystyrene beads and a second monoclonal anti-TSH covalently attached to biotin. After washing, the antibody bound serum TSH-anti-TSH-biotin complex is reacted with horseradish peroxidase (HRP)-labeled avidin. Following second wash, the bound HRP activity was measured calorimetrically. Reproducible results were obtained within 4 hours for serum TSH in the range between $0{\mu}\textrm{IU}$ml and ${50}{\mu}\textrm{IU}$ml with detection limit of $0.1{\mu}\textrm{IU}$ per test.
The ability of chemicals, 10% sodium hypochlorite, 28% ammonium hydroxide, 5% sodium hydroxide, 5% sodium bicarbonate, 0.1% hydrochloric acid, 5% hydrogen peroxide, and 5% acetone, to destroy aflatoxins in laboratory waste water containing 3.26 ppb of B$_{1}$ 7.64 ppb of B$_{6}$3 ppb of G$_{1}$, and 11.39 ppb of G$_{2}$ with the total of 29.11 ppb was investigated. High performance liquid chromatograph (HPLC) was used for the separation and quantitation of aflatoxins. Treatment for 2 hours by the chemicals affected the destruction of aflatoxins and the most effective chemical was 10% sodium hypochlorite (p<0.05). Sodium hypochlorite concentrations more than 1% significantly reduced aflatoxin B$_{2}$, G$_{1}$, G$_{2}$ and total aflatoxins and more than 3% reduced B$_{1}$ (p<0.05). No further significant decreases were observed above the concentration of 5% for all 4 aflatoxins. Complete destruction of aflatoxins B$_{2}$, G_{1}$, and G$_{2}$ was achieved by 5% sodium hypochlorite at 48 hours and B$_{1}$ at 72 hours.
In competitive PCR, which is used to quantify target DNA an internal standard is needed. Here we present a simple method to construct homologous competitive standards. The method, which is based upon deletion of a portion of the target DNA, does not require any additional primers. This is the simplest method developed thus far to construct a competitive standard. The whole procedure. from construction of a competitive standard to quantitation by PCR, can be completed within a single day.
Functional genomics aims at uncovering useful information carried on genome sequences and at using it to understand the mechanisms of biological function. Elucidating the unknown biological functions of new genes based upon the genomics rationales will greatly speed up the extensive understanding of biocatalysis and biodegradation in biological world including microorganisms. DNA microarrays generate a system for the simultaneous measurement of the expression level of thousands of genes in a single hybridization assay. Their data mining (transcriptome) strategy has two categories: differential gene expression and coordinated gene expression. Furthermore, measurement of proteins (proteome) generates information on how the transcribed sequences end up as functional characteristics within the cell, and quantitation of metabolites yields information on how the functional proteins act to produce energy and process substrates (metabolome). Various composite functional genomics databases containing genetic, enzymatic and metabolic information have been developed and will contribute to the understanding of the life blue print and the new discoveries and practices in biocatalysis and biodegradation that could enrich their industrial and environmental applications.
A new technique is proposed for the determination of alkylphenols, chlorophenols and bisphenol A in tap water. The sample preparation consists of a solid phase extraction (SPE) of alkylphenols, chlorophenols and bisphenol A from a water sample with XAD-4 and subsequent conversion to isobutyloxycarbonyl (isoBOC) derivatives or tert.-butyldimethylsilyl (TBDMS) derivatives for sensitive analysis with the GC/MS-SIM mode. The recoveries were 86.6∼105.2 % (isoBOC derivatization) and 97.6∼484.5 % (TBDMS derivatization), respectively. The limit of quantitation of alkylphenols, chlorophenols and bisphenol A for SIM were 0.001∼0.050 $\mu\textrm{g}$/l (isoBOC derivatization) and 0.003∼0.050 $\mu\textrm{g}$/l (TBDMS derivatization). The SIM responses were linear with the correlation coefficient varying 0.9755∼0.9981 (isoBOC derivatization), and 0.9908∼0.9996 (TBDMS derivatization). The derivative methods and their application to tap water samples will be disscussed.
Mycotoxins are a group of toxicants giving a risk potential to human health in connection with the daily food intake. Food commodities once contaminated with mycotoxins can not be detoxified by any economic means and prevention was suggested as the only measure. In order to minimize the economic loss and health hazard posed by mycotoxins and toxicoses, systematic and toxicological studies on the subject should be undertaken. Most reports in Korea were concentrated on the mycological studies of relatively easy techniques and the confirmation or quantitation of mycotoxins was rarely done. Research topics to be undertaken in future may be exemplifid below: (1) Establishing assay methods for individual or multi-residue of mycotoxins (2) Monitoring of mycotoxins for suspicious food or feed samples in Korea (3) Epidemiological survey of mycotoxicoses (4) Etiological survey of disease outbreaks associated with mycotoxins (5) Accumulation of testing method and data on the toxicity of mycotoxins (6) Legal regulation to control mycotoxins and development of their detoxification / elimination methods
The quantitation of inorganic anions in various drinking waters were investigated using capillary electrophoresis(CE) and the results were compared with ion chromatography(IC). With CE, in contrast to IC, was demonstrated rapid analysis, good efficiency, a low detection limit and the low comsumption of a solvent and samples. CE analysis was used 5 mM sodium chromate(pH 8.0) containing 20 mM tetraalkylammoniumbromide at -25kV applied voltage with indirect UV detection at 254 nm. This results in exceedingly short analysis time within 3 min. with efficiencies approaching 200,000 theoretical plates. The coefficients of variants of migration time are less than 0.8% and those of peak area are less than 2.3%. Detection limits for quantitative determination were 300 ppb-50 ppm level. These optimum conditions are applicable to various samples without pretreatment.
Lee, Sang Tak;Lee, Jae-ung;Kim, Joo-Hyon;Oh, Han Bin
Mass Spectrometry Letters
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제10권4호
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pp.112-116
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2019
In this study, a chloroform consumer chemical product (CCP) reference material (RM) is successfully developed, with potential to be used in the proficiency testing of hazardous compounds in CCPs for analysis and testing agencies. Validation experiments are rigorously conducted to evaluate whether the RM meets the requirements set by the ISO 13528 and ISO Guide 35, using a reliable GC/MS method for the analysis of chloroform. The obtained calibration plot linearity, limit of detection (LOD), and limit of quantitation (LOQ) are excellent. The developed RM meets the homogeneity and stability requirements; the between-unit (sbb) and within-unit (swb) standard deviations are less than 2.5%, and the stability is found to be guaranteed for 50 days.
The objective of this study was to compare 3 extraction methods including, solid phase extraction (SPE), acetonitrile extraction, and methanol extraction, for their usefulness as extraction methods to determine capsaicinoids. The determination of capsaicinoids in the extracts was carried out on a reverse-phased high performance liquid chromatography (HPLC) using a fluorescence detector. Three extraction methods, i.e., SPE, acetonitrile extraction, and methanol extraction were compared for the quantification of capsaicinoids using raw peppers and pepper powder. The highest analytical values were observed using methanol extraction and the lowest values using SPE. Also, the analytical method validation parameters such as accuracy, precision, limit of detection, limit of quantitation, and specificity were calculated to ensure the method's validity. This method provides a fast and accurate approach for the determination of capsaicinoids in peppers.
Extraction and Clean-up procedures coupled with quantitation by high performance liquid chromatography(HPLC) was evaluated for the detection of 4 aflatoxins, B1, B2, G1 and G2, in peanut butter. The Sep-pak clean-up method showed poorer separation and repeatability than did the modified DeVries' and an immunoaffinity column clean-up methods. No significant difference of detected aflatoxins between the affinity column clean-up and modified DeVries' method. The coefficients of variation for the 4 aflatoxins were ranging from 6.3∼32.3 by the modified DeVries' method and 5.3∼9.8 by the affinity column clean-up.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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