• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제4권3호
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• pp.139-143
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• 1983

${\beta}$-N-Acetyl-D-glucosaminidase B was highly purified with the following sequence of steps; DEAE-cellulose, CM-cellulose, and Sephadex G-200 gel filtration chromatograpies. The specific activity of the purified ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B was 2.2 units/mg protein with 12.9 % yield and 196.2 fold purity. The purified ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B showed single band on polyacrylamide gel electrophoresis. The final preparation of ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B was completely free friom arylsulfatase and ${\beta}$-glucuronidase. ${\beta}$ -N-Acetyl-D-glucosaminidase B had pH optimum of 4.5 in 0.5 M sodium citrate buffer. The molecular weight of ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B was 133,000 by Sephadex G-200 gel filtration. The Km value of ${\beta}$-N-acetyl-D-glucosaminidase B using p-nitrophenyl-N-acetyl-${\beta}$-D-glucosaminide as substrate was 1.0 mM and $V_{max}$ was 0.014 ${\mu}$ mole/min. ${\beta}$-N-Acetyl-D-glucosaminidase B was stable at $55^{circ}C$ for 70 minutes. The crude ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosamiinidase in 70 % ammonium sulfate retained 93 % activity after 7 months storage at -$55^{circ}C$. Bovine serum albumin, sodium chloride, and phosphate activated ${\beta}$ -N-Acetyl-D-glucosaminidase B. N-Acetyl-D-glucosamine, ${\alpha}$-methyl-D-mannoside, and acetate inhibited ${\beta}$ -N-acetyl-D-glucosaminidase B.

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제52권1호
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• pp.40-44
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• 2014

고순도의 CHMI 입자를 제조하는 공정을 개발하기 위해서, CHMAIE로부터 CHMI를 합성하고 정제한 후 형상화하는 공정 전반에 대한 실험적 연구를 수행하였다. CHMI 합성에 있어서는 n-헵탄 환류 이미드화 반응이 톨루엔 put-out 이미드화 반응보다 CHMI의 평형 전화율이 높을 뿐 아니라, CHMI의 석출공정에도 유리한 것으로 나타났다. 합성된 CHMI를 n-헵탄으로 2회 세척하면 11.7%의 무게 감소율이 발생하지만, 99.7%의 고순도 CHMI를 얻을 수 있었다. CHMI 입자의 제조에서는 3 mm 나선형 노즐을 통하여 $1.5{\sim}2.0kg/cm^2$의 압력으로 CHMI 용융액을 토출시키면 가장 효과적으로 CHMI 입자를 제조할 수 있었다.

• 약학회지
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• 제37권2호
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• pp.149-157
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• 1993

Protein methylase inhibitor which is a modulator of biological methylation has been purified and characterized from porcine liver soluble fraction by cell fractionation, Sephadex G25 chromatography, reverse phase HPLC, size exclusion HPLC. The results are summarized as follows. 1) The purified inhibitor shows apparent homogeneity, as judged by HPLC. 2) A molecular weight of the purified inhibitor which is composed of 18 amino acid residues is about 1,400 daltons. 3) A single absorption peak of ultraviolet spectrum was observed at 260nm. 4) The inhibitor was not inactivated by heating at $100^{\circ}C$ until 60min. and its activity was not influenced by treatment with digestive enzymes, such as trypsin, pepsin, pronase, chymotrypin, lysozyme, DNase, and RNase. 5) The purified inhibitor inhibited protein rnethylase I, II, III and phospholipid methyltransferase activities. 6) The purified inhibitor inhibited noncompetitively protein methylase II from porcine liver, spleen, and testis. 7) The $K_{i}$ values for protein methylase II from porcine liver, spleen, and testis were 300nM, 250nM, 297nM, respectively.

• BMB Reports
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• 제32권4호
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• pp.321-325
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• 1999

NAD(P)H-quinone oxidoreductase (EC 1. 6. 99. 2) was purified form S. cerevisiae. The enzyme readily reduced 2,6-dichlorophenolindophenol, a quinonoid redox dye, as well as substituted benzo- and naphthoquinones, and could accept electrons from either NADH or NADPH. The purified NAD(P)H-quinone oxidoreductase turned out to be capable of reducing nitrosoarenes as well as a variety of quinones. A chemical-trapping technique using 4-chloro-1-naphthol was used to show that the N,N-dimethyl-p-benzoquinonediiminium cation was produced in the reduction of 4-nitroso-N,N-dimethylaniline catalyzed by NAD(P)H-quinone oxidoreductase.

• KSBB Journal
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• 제14권2호
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• pp.192-197
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• 1999

해양세균 Pseudomonas sp. CHCS-2는 배양과정 중에 포도당 첨가에 의해 생물유화제의생산이 증가되었으며, 196시간 배양시 원유에 포함되어 있는 paraffine계 탄화수소 중에서 $_nC_{12}~_nC_{22}$까지 범위의 carbonchain이 거의 대부분 분해됨을 알 수 있었다. chloroform : metahnol = 1 : 1(V/V)로 추출하여 얻은 8.5g/L의 crude 생물 유화제를, Amberlite XAD-7, Sepharose CL-4B, DEAE-sepharose CL-6B 수지를 사용하여 정제한 결과 최종적으로 0.21g/L의 정제된 생물유화제를 얻었다. 본 균주가 생산하는 생물유화제는 단백질과 octadecanoic acid가 결합된 분자량이 약 67kDa인 lipoprotein으로 확인되었으며, 정재된 생물유화제중 단백질성분만을 분리하여 N-말단 아미노산배열을 분석한 결과, Ser-Val-He-Asn-Thr-Asn-IIe-Thr-X-Met-Ile-Gly-Gin-Gln-의 배열을 가지는 것으로 확인되었다. 이는 기존에 보고된 lipoproten과 다른 형태의 것으로, 본 균주가 생산하는 생물유화제의 경우 구성성분, 분자량 등을 고려해 볼 때 새로운 형태의 lipoprotein 계열 생물유화제로 추정된다.

• 한국균학회지
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• 제33권2호
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• pp.69-74
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• 2005

민자주방망이버섯으로부터 분리한 혈전용해효소의 비활성은 22.78 U/mg 이었으며, fibrin를 직접 용해하는 fibrinolytic enzyme 이었다. 15번째까지 N-terminal amino acid 서열 분석 결과, Tyr-Pro-Ser-Pro-Ser-His-Gln-Thr-Ala-Val-Asn-Ala-Ile-Ile-X로 지금까지 발표되지 않은 새로운 효소였다. 분자량은 34 KDa 이고 pH 7.0 부터 pH 9.5의 넓은 영역에서 높은 활성을 나타내는 alkaline protease 였으며, $55^{\circ}C$에서 가장 큰 활성을 보이는 이 효소는 serine protease 저해제인 phenylmethylsulfonyl fluoride를 첨가한 경우 효소의 활성이 전혀 나타나지 않는 것으로 미루어 높은 혈전용해 활성을 갖는 새로운 serine protease로 생각된다. 또한 $Hg^{2+}$의 금속이온을 첨가한 경우에도 효소의 활성은 완전히 사라졌다.

• 대한의생명과학회지
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• 제8권4호
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• pp.245-250
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• 2002

Fibrinolytic enzyme has been purified from the edible mushroom, Tricholoma sejunctum using DEAE-cellulose chromatography, Phenyl-Sepharose chromatography and Mono-S column chromatography. The apparent molecular mass of purified enzyme was estimated to be 17100 Da by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and 19000 Da by gel filtration, Indicating that it was a monomer. The N-terminal amino acid sequence of the enzyme was Ala-Thr-Tyr-Lys-Ile-X-Ser-Ala-Thr-His-Gln-X-X-Leu-Val. It has a pH optimum at pH 9.5, suggested that purified enzyme was a alkaline protease. The activity of purified enzyme was inhibited by EDTA and 1,10-phenanthroline, indicating that purified enzyme is a metalloprotease. The activity of purified enzyme was increased by Zn$^{2+}$ and Co$^{2+}$, however, the enzyme activity was totally inhibited by Hg$^{2+}$.

• 한국재료학회:학술대회논문집
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• 한국재료학회 2003년도 춘계학술발표강연 및 논문개요집
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• pp.136-136
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• 2003

카본나노튜브는 상용되는 기존의 센서에 비해 표면적이 넓어 감도가 놀고 응답속도가 빠르다. 또한 나노 스케일의 크기를 가지므로 고직접화를 실현할 수 있으며 기능복구성이 뛰어나 상온동작을 통한 저전력화가 가능하다. 본 실험에서는 아크방전법으로 합성한 카본나노튜브를 가스센서로 제작하여 상온에서 NH$_3$, NO 가스와의 반응 특성을 평가하였다. 또한 origin soot와 이를 정제한 purified CNT를 SEM(주사전자현미경), TEM(투과전자현미경), Raman scattering spectroscopy(라만 산란 분광기)를 통해 재료적 특성을 조사하고 이를 가스 감응 곡선과 연관하여 비교, 분석하였다. 전극에 CNT막을 형성시키기 위해 3g의 N,N dimethylformamide 용액에 CNT 10mg을 분산시킨 후 2시간동안 초음파 처리하였다. 이 용액을 mask를 이용해 전극 위에 막을 형성시킨 후 20$0^{\circ}C$에서 열처리하였다. 이렇게 제조된 origin soot와 purified CNT센서는 flow system을 이용하여 측정하였고 $N_2$분위기 하에서 센서를 안정화시킨 후 측정가스와의 반응을 살펴보았다 센서의 반응속도, 회복속도, 감도 등의 측정결과 origin soot는 NH$_3$ 25ppm에서 20%, purified CNT는 1%의 감도를 보여 20배 높은 감도를 보았다. NO 25ppm의 경우에도 origin soot가 8%, purified CNT는 0.8%의 감도를 보여 10배 높은 감도를 보였다. 이는 탄소입자가 많은 origin soot가 purified CNT 보다 표면적이 넓어 보다 많은 가스 흡착 싸이트를 가지기 때문이다. 하지만 origin soot는 반응시간과 회복속도가 Purified CNT 보다 2배 이상 느려 표면적 증가에 따른 가스 흡착과 탈착 능력이 떨어짐을 알 수 있었다. 또한 CNT와 가스사이의 전하 이동 방향에 따라 NH$_3$는 양의 감도를 NO는 음의 감도를 보였다 이는 전하의 이동 방향에 따라 전하와 캐리어 사이의 결합 및 해리가 일어나게 되고 결국 카본나노튜브 내의 캐리어 수를 증감시킴에 따라 나타나는 현상이다. 이러한 가스의 감도는 농도에 따라 증가하였으며 origin soot를 이용하여 1ppm이하의 NH$_3$ 가스를 검출할 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제8권2호
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• pp.111-118
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• 1998

A bacterium producing unique antistaphylococcal substance (ASS) was isolated from soil samples. The isolated strain KUH-001 was identified to belong to Pseudomonas species from the characteristic properties of its fluorescence and cellular 3-hydroxy fatty acid composition, etc. The ASS component was purified by procedures employing activated carbon adsorption, column chromatography with silica gel, preparative TLC and HPLC. This compound could also be purified mainly by repeating of trituration and precipitation with chilled ether. Purified ASS with a m.p. value of $140~142^{\circ}C$ showed marked stability at high temperature (at $121^{\circ}C$ for 10 min) and extreme pHs (in 1N HC1 and 1N NaOH for 1 day) without significant loss of antibiotic activity. From spectral data of UV, IR, NMR, and FAB-MS, the compound was elucidated as 2-heptyl-4-hydroxyquinoline N-oxide (HHQO). Under the conditions employed, HHQO exhibited a narrow antimicrobial spectrum. active particularly against Staphylococcus aureus including the methicillin resistant strain. Moreover, it did not induce resistance, and besides, interacted synergistically with certain antibiotics such as vancomycin or erythromycin.

• Applied Biological Chemistry
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• 제46권3호
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• pp.176-182
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• 2003

한국재래간장으로부터 혈전용해효소를 강하게 생산하는 균주를 선발하고 이를 Bacillus subtilis K7로 동정하였다. B. subtilis K7이 생산하는 혈전용해성 protease를 정제하여 분자량을 확인한 결과 21,500 Da이었다. 정제된 효소의 최적반응조건은 $40^{\circ}C$와 pH 9.0이었으며 pH 5.0라서 12.0까지 안정하고 $50^{\circ}C$에서 20분간 열처리한 후에도 50%이상의 효소활성을 가지며 EDTA, CDTA 및 iodoacetat에 실활하는 효소이었다. 이 효소의 fibrin에 대한 Km 값은 $1.8{\times}10^{-2}$ M이었다.