• KSBB Journal
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• 제9권2호
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• pp.140-146
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• 1994

A. pullulans로부터 polyol 생산 특성을 검토하기 위하여 탄소원, 수분활성의 영향을 검토하였다. 생산된 polyol 중에서 mannitol이 주성분이었고 소량의 glycerol이 함께 생산되었다. 검토된 탄소원 중 sucrose, glucose, fructose, mannose를 단일 탄소원으로 사용하였을 때 mannitol을 생산할 수 있었으며, 20% sucrose 배지에서 polyol 생산량이 최대였고 이때 대당 mannitol의 수율($Yp_{p/s}$)은 0.227이었다 두 종류의 유용한 탄소원인 glucose와 sucrose에 대한 초기기질농도에 대한 $Yp_{p/s}$는 거의 일정한 값을 보여, 일반적인 내삼투성 미생물과는 달리 첨가된 염(NaCl, KCI)의 농도가 증가할수록, 즉 수분활성이 낮은 조건에서는 오히려 mannitol의 생산량이 낮아졌으며, 상대적으로, glycerol의 양은 증가하였다 실험결과를 종합해 볼 때, A. pullulans에 의한 polyol 중, glycer이의 경우는 다른 내삼투성 미생물의 경우와 같이 생산되지만, mannitol의 경우는 sucrose, glucose 등의 유용한 탄소원들의 대사과정 중에 인산화경로(phosphate pathway)과 환원효소작용(enzymatic dehydrogenation)을 통해 생성되는 발효산물 이라는 결론을 얻었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권10호
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• pp.1491-1498
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• 2006

The feasibility of pullulan acetate nanoparticles (PAN) with ionic strength (IS) sensitivity as a radioisotope carrier to inhibit tumor growth is demonstrated. PAN was radiolabeled with rhenium 188 (Re-188) without any chelating agents. The labeling efficiency of Re-188 into PAN (Re-188PAN) was $49.3{\pm}4.0%$ as determined by TLC. The tumor volumes of mice treated with 0.45 mCi of Re-188-PAN were measured and compared with that of free Re-188 after 5 days of intratumoral injection. For the histological evaluation of apoptotic nuclei of tumor cells, hematoxylin and eosin (H&E), and terminal deoxynucleotidyl transferase biotinylated deoxyuridine triphosphate nick end labeling (TUNEL) staining were performed. The mean tumor volume of the Re-188-PAN-treated group was decreased by 36% after 5 days, whereas that the free Re-188-treated group was decreased by only 15% (P<0.05). The mean number of TUNEL-positive cells in Re-188-PAN-treated tumors at $144.3{\pm}79.9$ cells/section was significantly greater than the control ($26.7{\pm}7.9$ cells/section, P=0.03). The numbers of leukocyte and lymphocyte were decreased in both free Re-188- and Re-188-PAN-treated mice. These results indicated that the intratumoral injection of Re-188-PAN effectively inhibits the tumor growth by prolonging Re-188 retention time in tumor site induced by the IS sensitivity.

• 한국축산식품학회지
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• 제39권3호
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• pp.459-473
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• 2019

Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) has low resistance to low pH and bile salt in the gastrointestinal juice. In this study, the gel made from whey protein concentrate (WPC) and pullulan (PUL) was used as the wall material to prepare the microencapsulation for LGG protection. The gelation process was optimized and the properties of gel were also determined. The results showed the optimal gel was made from 10% WPC and 8.0% PUL at pH 7.5, which could get the best protective effect; the viable counts of LGG were 6.61 Log CFU/g after exposure to simulated gastric juice (SGJ) and 9.40 Log CFU/g to simulated intestinal juice (SIJ) for 4 h. Sodium dodecyl sulphite polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) confirmed that the WPC-PUL gel had low solubility in SGJ, but dissolved well in SIJ, which suggested that the gel can protect LGG under SGJ condition and release probiotics in the SIJ. Moreover, when the gel has highest hardness and water-holding capacity, the viable counts of LGG were not the best, suggesting the relationship between the protection and the properties of the gel was non-linear.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제41권4호
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• pp.391-397
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• 2013

본 연구에서 584개의 아미노산(68.7 kDa)으로 구성된 cyclomaltodextrinase (LLCD)의 유전자를 Lactococcus lactis subsp. lactis KCTC 3769 (ATCC 19435)로부터 클로닝하였다. LLCD는 일반적인 CDase 계열 효소들과 약 40% 전후의 아미노산 서열 상동성을 나타내었다. C-말단에 6개의 히스티딘 잔기를 가진 재조합 효소는 dimer의 형태로 대장균에서 발현되고 정제되었다. LLCD는 pH 7.0 및 $37^{\circ}C$에서 최대의 ${\beta}$-CD 가수분해 활성을 나타내었다. 특히, 이 효소는 starch 및 pullulan에 대해 극히 낮은 활성을 보였으나, 반면에 CD에 대한 가수분해 활성은 starch에 비해 약 80배 이상 높았다. 이처럼 높은 CD에 대한 활성을 근거로 LLCD는 CDase 계열 효소로 분류될 수 있으나, starch, pullulan, 그리고 acarbose에 대한 매우 낮은 활성은 다른 유사효소와 비교하여 차별화되는 특징이다.

• 미생물학회지
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• 제53권3호
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• pp.208-215
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• 2017

Streptococcus pyogenes ATCC 700294 유전체로부터 cyclomaltodextrinase (SPCD)로 예상되는 유전자를 발견하였다. SPCD는 총 567개의 아미노산으로 이루어진 66.8 kDa의 효소이며, 기존에 알려진 CDase 계열 효소들과 37% 미만의 아미노산 서열 상동성을 가진다. 본 연구에서는 SPCD 유전자를 클로닝하였으며, 대장균 내에서 카복시 말단에 6개의 histidine 잔기가 결합된 dimer 형태로 발현 및 정제되었다. SPCD는 pH 7.5, $45^{\circ}C$의 반응조건에서 최대의 활성을 나타내었으며, ${\beta}$-cyclodextrin, starch, maltotriose를 기질로 반응하여 maltose를 주산물로 생성하였다. 또한 pullulan을 panose 단위로 분해하며, acarbose를 glucose와 acarviosine-glucose로 가수분해하는 CDase 계열의 효소로 확인되었다. 그러나, SPCD는 다른 효소에 비해 저분자 소당류인 ${\beta}$-cyclodextrin에 대한 활성이 매우 높고, starch 및 pullulan과 같은 고분자 기질에 대해 매우 낮은 활성을 보였다. 또한 maltotriose 분해 활성이 매우 낮은 반면 acarbose에 대해 상대적으로 높은 가수분해 활성을 가지나, 당전이 활성은 매우 낮아 다른 CDase 계열 효소들과 구별된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권4호
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• pp.315-318
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• 1991

Pullulanase 생산력이 높은 세균 No.S-76을 토양으로부터 분리하였다. 분리된 균은 0.4~$0.6\times 0.8$~1.4 $\mu\textrm{m}$의 크기의 gram음성, 간균으로서 운동성이 있으며, 여러가지 특성을 조사한 결과 Bergey의 세균분류 동종법에 따라 Aeromonas caviae로 동정되었다. 본 균의 pullulanase 생산배지로서는 탄소원은 1 pullulan, soluble strach 또는 corn starch가, 질소원으로는 0.5% yeast extract 또는 peptone이 적당하였으며 initial pH는 9.0의 배지가 가장 좋았으며 $32^{\circ}C$에서 2일간 배양이 적당하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제22권1호
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• pp.73-79
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• 1994

The optimum cultural temperature and time for the pullulanase production by Bacillus cereus subsp. mycoides were 35$\circ $C and 48 hrs, respectively. The addition of egg albumin and casein to the basal medium increased the enzyme production. The enzyme was purified by ammonium sulfate fractionation and DEAE-cellulose column chromatography. specific activity of the purified enzyme was 82.37 U/mg protein and yield of theenzyume activity was 62.1%. The purified enzuyme showed a single band on ployacrylamide disc gel electrophoresis and its molecular weight was estimated to be 66.,000 by SDS-polyacrylamide disc gel electrophoresis. The isoelcular point for the purified enzyme was pH 5.0. The optimum temperature and pH were 50$\circ $C and pH 6.5, respectively. The purified enzyme was stable below 40$\circ $C and in the pH range of 6.5~10.0 The pullulanase activity was greatly inhited by Ag$^{+}$, Hg$^{2+}$ and EDTA, and its heat stability was increased by the addition of Ca$^{2+}$. The tydrolysis product with the enzyme on pullulan was maltotriose.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제44권3호
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• pp.363-369
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• 2016

Listeria innocua ATCC 33090 유전체로부터 maltose/maltodextrin 이용과 관련한 유전자 클러스터를 발견하였으며, 그로부터 cyclomaltodextrinase (LICD)로 예상되는 유전자를 클로닝하고, 대장균 내에서 발현하였다. LICD는 총 591개의 아미노산으로 이루어진 68.6 kDa 크기의 효소이며, 일반적인 CDase 계열 효소들과 39−58%의 아미노산 서열 상동성을 나타내었다. 재조합 LICD는 37℃, pH 7.0의 조건에서 최대 활성을 나타내었으며, cyclodextrin, starch, maltotriose에 작용하여 주로 maltose를 생성하였다. 또한 pullulan을 분해하여 panose를, 그리고 acarbose를 분해하여 glucose와 acarviosine-glucose를 생성하는 전형적인 CDase 계열 효소임을 확인하였다. 그러나, starch 및 pullulan과 같은 고분자기질 대비 cyclodextrin 및 maltotriose의 저분자 소당류에 대해 상대적으로 높은 활성을 나타내며, acarbose 분해 활성이 매우 낮아 다른 효소들과 차별성을 가진다. 또한 LICD는 acarbose 공여체를 가수분해하여 수용체에 전이하는 당전이 활성을 보였다.

• 한국섬유공학회:학술대회논문집
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• 한국섬유공학회 1998년도 봄 학술발표회 논문집
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• pp.36-39
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• 1998

플루란은 글루코스 삼량체인 말토트리오스(maltotiose)를 반복단위로 하고, 그 삼량체와는 다른 결합인 $\alpha$-1,6결합에 의해 반복결합한 고분자 선상 중합체이다(Fig. 1) 플루란은 검정색 효모인 aureobasidium pullulans에 의해 배양 생산된 천연 다당류의 일종이다. 플루란은 원료가 저렴하기도 하지만 플루란으로 만들어진 막, 필름(1), 섬유(2) 등의 일반적인 성형물은 투명성, 강인성, 산소 불투과성이 있으며 땅속 수중에서 자연 분해되며 소각에 의해 유독가스와 고엽이 발생하지 않으므로 공해를 동반하지 않는다.(중략)

• 한국생명과학회:학술대회논문집
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• 한국생명과학회 2008년도 제49회 학술심포지움 및 국제학술대회
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• pp.78.2-78.2
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• 2008