엽록체 DNA atpF-H, psbA-trnH region을 마커로 활용하여 국내에 분포하는 소나무속 식물들 중 17분류군에 대한 분자계통학적 연구를 수행하여 한국산 소나무속의 계통학적 유연관계를 규명하고, 소나무속의 유연관계를 잘 나타낼 수 있는 분자마커를 찾아내고자 연구가 수행되었다. atpF-H, psbA-trnH region의 조합분석결과 한국산 소나무속은 100%의 BP로 지지되는 단계통군으로 확인되었으며, 소나무아속과 잣나무아속으로 명확히 구분되어졌다. 본 연구에서 이용된 두 개의 분자마커 중 psbA-trnH region이 atpF-H region보다 한국산 소나무속의 계통 및 유연관계를 규명하는데 다소 높은 해상력을 나타내었다.
The morphological and molecular characteristics of Pachydictyon coriaceum (Holmes) Okamura (1899) are described. Plants are collected from Korea all year round and have maximum height from August to September. The monthly variability of thallus growth is in the way with that of the seawater temperature. Two types of thallus structures, thick cortical layer tallus type and thin cortical cell layer type, are distinguished according to growing seasons. The habit of Korean plants is also classified into two thallus types, slender type and wide type, based on the length and the width of internodes, but this distinction between two types is not supported by either anatomical or molecular characteristics. P. coriaceum shares typical morphology in branching pattern and morphogenetic processes with the other species of Dictyota: 1) multi-cellular cortical and medullar layer in the partial of thallus, 2) same development of thallus from apical meristem cell, and 3) sub-lineage within Dictyota species lineage in rbcL, psaA and psbA gene sequences analyses. These characteristics lead to propose the new combination of Dictyota coriacea (Homes) I.K. Hwang, H.S. Kim et W.J. Lee, comb. nov.
The marine dinoflagellate genus Alexandrium, which produces PSP toxins, has a global distribution. As human-assisted dispersal of the species has been suggested, it is important to develop molecular tools to trace the dispersal pathway. To screen population-specific DNA sequences that differentiate Korean and Japanese A. catenella, we targeted the area downstream of the chloroplast psbA gene using PCR with population-specific DNA primers followed by RFLP (restriction fragment length polymorphism) analysis and sequencing. The RFLP patterns of the PCR products divided Korean and Japanese A. catenella regional isolates into three types: Korean, Japanese, and type CMC3, isolated from Korea. We sequenced the PCR products, but found no similar gene in a homology search. The molecular phylogeny inferred from the sequences separated the Korean and Japanese A. catenella strains, as did the RFLP patterns. However, the Japanese isolates included two slightly different sequences (types J and K), while the Korean sequence was the same as the Japanese K type. In addition, a unique sequence was found in the Korean strains CMC2 and CMC3. Population-specific PCR amplification with Japanese A. catenella type-specific PCR primers designed from the type J sequence yielded PCR products for Japanese strains only, showing that the unknown gene can be used for a population analysis of Korean and Japanese A. catenella.
Veronica nakaiana Ohwi (Plantaginaceae) is an endemic taxon on Ulleungdo Island, Korea. We report the second complete chloroplast genome sequence of V. nakaiana. Its genome size is 152,319 bp in length, comprising a large single-copy of 83,195 bp, a small single-copy of 17,702 bp, and a pair of inverted repeat regions of 25,711 bp. The complete genome contains 115 genes, including 51 protein-coding genes, four rRNA genes, and 31 tRNA genes. When comparing the two chloroplast genomes of V. nakaiana, 11 variable sites are recognized: seven SNPs and four indels. Two substitutions in the coding regions are recognized: rpoC2 (synonymous substitution) and rpl22 (nonsynonymous substitution). In nine noncoding regions, one is in the tRNA gene (trnK-UUU), one is in the intron of atpF, and seven are in the intergenic spacers (trnH-GUG~psbA, trnK-UUU, rps16~trnQ-UUG, trnC-GCA~petN, psbZ~trnG-GCC, ycf3~trnS-GGA, ycf4~cemA, and psbB~psbT). The data provide the level of genetic variation in V. nakaiana. This result will be a useful resource to formulate conservation strategies for V. nakaiana, which is a rare endemic species in Korea.
Phonological, morphological and molecular characteristics of Spatoglossum pacificum Yendo are examined. S. pacificum has an annual life cycle composed of saprophytes with apparent absence of male and female gametophytes in Korea. The seasonal growth of this species explains that the annual growth is closely related to the monthly variation of water temperature. S. pacificum has protruding reproductive structures above the outmost cortical layer. Although this observation is restricted to several species, reproductive structures on the thallus can make S. pacificurn distinguishable from S. crassum and S. lacturn. The morphogenesis of a midrib at the base of S. pacificum in this study is the same as those of Dictyopteris but different from those of S. crassum and S. lacturn, suggesting that S. pacificum is closely related to Dictyopteris. In the comparison of plastid gene sequences among species of Spatoglossum and Dictyopteris, S. pacificum is more similar to D. divaricata and D. undulate than those of S. crassum in rbcL, rbcS, psbA and psaA. This result is congruent with the anatomical characteristic of a midrib at the base of the thallus and the protrusion of reproductive organs on the thallus. The phylogenetic relationship based on these plastid genes also shows that S. pacifism is included in Dictyotpteris Glade and separated from S. crassum. We propose the new combination of Dictyopteris pacifica (Yendo) I.K. Hwang, H.S. Kim et W.J. Lee, comb. nov. based on the differences of anatomical characteristics of the midrib, the existence of reproductive organs on thallus and the molecular analyses.
We have developed a polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) marker that can distinguish male-fertile (N) and male-sterile (S) cytoplasm in onions. The PCR-RFLP marker was located in a chloroplast psbA gene amplicon. Digesting the amplicons from different cytoplasm-containing varieties with the restriction enzyme MspI revealed that N-cytoplasm plants have a functional MspI site (CCGG), whereas the S-cytoplasm plants has a substitution in that site (CTGG), and thus no MspI target. The results obtained using this PCR-RFLP marker to distinguish between cytoplasmic male sterile factors in 35 onion varieties corresponded with those using a CMS-specific sequence-characterized amplified region (SCAR) marker. Moreover, the PCR-RFLP marker can identify N- ot S-cytoplasms in DNA sample mixtures in which they are in up to a 10-fold minority, indicating that use of the marker has high diagnostic precision. We also demonstrated the usefulness of the SNP detected in the psbA gene for high-throughput discrimination of CMS factors using Real-time PCR and a TaqMan probe assay.
Bacillus thuringiensis는 포자형성기 동안에 위생해충이나 농업해충에 독성을 보이는 내독소 단백질을 생성한다. 내독소 단백질의 모기 유충 방제효과를 높이기 위해, 광합성에 관여하는 psbA promoter로 모기 살충성 cry11Aa유전자를 발현하는 pSyn4D벡터를 제작하고, 모기 유충이 먹이로 이용하는 Synechocystis PCC6803에 형질 전환시켰다. 형질 전환체들은 kanamycin이 포함된 배지에서 선발되었으며, 정상적인 생물검정을 통해 형질 전환체 Tr2C를 선발하였다. cry11Aa 유전자는 형질전환체의 genomic DNA에 안정적으로 결합되어 있는 것을 PCR을 이용하여 확인하였다. 형질전환체 Tr2C는 약 72-kDa크기의 Cry11Aa 단백질을 발현하였으며, 작은빨간집모기(Culex tritaeniorhynchus) 3령 유충과 중국얼룩날개모기(Anopheles sinensis) 3령 유충에 75%가 넘는 살충력을 보였다. 모기 유충에 대한 형질전환체의 반수치사시간(LT$_{50}$)은 작은빨간집모기 유충과 중국얼룩날개모기 유충에 대해 각각 2.1일과 0.7일이었다. 이상의 결과들은 형질전환체 Tr2C가 모기 유충방제에 유용하게 이용될 수 있음을 보여준다.
한국식물학회 1987년도 식물생명공학 심포지움 논문집 Proceedings of Symposia on Plant Biotechnology
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pp.391-401
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1987
Plant chloroplast DNA exists as an unique circular structure in which large single copy(LSC) region and small single copy (SSC) region are separated by large inverted repeat sequences (IRS). It has been known that the unique existence of inverted repeat sequences in chloroplast DNA has no relation with the stability of the chloroplast DNA, but causes the inversion between inverted repeat its biological significance has not been understood so far. In rice, several gene clusters have been cloned and sequenced which contain ribulose-5-biophosphate car-boxylase large subunit (rbcL). Especially, one rbcL gene is linked with rp12 gene which is located in the IRS region in one of the gene clusters. By comparison of nucleotide sequence, the two genes are found to be linked through 151 bp repeat sequence which is homologous to the rp123 gene in IRS region. The repeat sequence is found to be located 3' downstream of rfcL gene and near psbA gene in LSC region. The existence of these repeat sequences and the presence of gene clusters caused by the gene rearrangement thorough the repeat sequence provide a possible which is found to be dispersed chloroplast DNA provide the model system to explaine the heterogeneity of the chloroplast DNA in rice in term of gene rearrangement.
West, John A.;Hansen, Gayle I.;Hanyuda, Takeaki;Zuccarello, Giuseppe C.
ALGAE
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제31권4호
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pp.289-301
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2016
Floating debris provides substrates for dispersal of organisms by ocean currents, including algae that thrive on plastics. The 2011 earthquake and tsunami in Tohuku, Japan resulted in large amounts of debris carried by the North Pacific Current to North America from 2012 to 2016. In 2015-2016, the plastics in the debris bore a complex biota including pink algal crusts. One sample (JAW4874) was isolated into culture and a three-gene phylogeny (psbA, rbcL, and SSU) indicated it was an unknown member of the red algal class Stylonematophyceae. It is a small pulvinate crust of radiating, branched, uniseriate filaments with cells containing a single centrally suspended nucleus and a single purple to pink, multi-lobed, parietal plastid lacking a pyrenoid. Cells can be released as spores that attach and germinate to form straight filaments by transverse apical cell divisions, and subsequent longitudinal and oblique intercalary divisions produce masses of lateral branches. This alga is named Tsunamia transpacifica gen. nov. et sp. nov. Sequencing of additional samples of red algal crusts on plastics revealed another undescribed Stylonematophycean species, suggesting that these algae may be frequent on drift oceanic plastics.
Horticulture, Environment, and Biotechnology : HEB
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제59권6호
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pp.865-873
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2018
Allium ochotense and Allium microdictyon are commonly known as 'Mountain garlic' and are popular, economically important species in many countries such as Korea, China, and Mongolia. Their leaves are used as culinary side dishes and in traditional medicines. In Korea, these two species are at risk of extinction due to damage to their natural habitat and thus, conservation and breeding programs are needed. However, their identification relies mostly on morphological data, which is limited and until recently, led to classifying these two species under A. victorialis. In the present study, a simple and reliable method of molecular identification was developed to distinguish A. ochotense from A. microdictyon that targets four barcoding regions: the internal transcribed spacer (ITS), the maturase K gene (matK), the chloroplast psbA-trnH intergenic region, and the ribulose-bisphosphate carboxylase large subunit gene (rbcL). Single nucleotide polymorphisms (SNPs) were found in ITS and matK regions, and species-specific primers were designed based solely on the SNP at position 680 of the ITS region that could differentiate A. ochotense from A. microdictyon. Using these primers in amplification refractory mutation system (ARMS)-PCR, A. ochotense, and A. microdictyon could be simultaneously and efficiently distinguished. This study is the first to report a simple, rapid, and efficient method for discriminating A. ochotense and A. microdictyon, indicating the utility of species-specific markers in the development of conservation and breeding programs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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