• Journal of Ginseng Research
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• 제32권4호
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• pp.300-304
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• 2008

14년생 인삼의 뿌리로부터 cDNA library를 제작한 후 무작위로 뽑은 EST clone 중에서 cysteine proteinase(CP) 유전자에 높은 상동성을 나타내는 clone 6개를 선발하였고 이를 바탕으로 PgCysP1을 제작하였다. 인삼의 CP 유전자는 전장의 길이가 1,398bp로 366개의 아미노산을 코딩하는 1,101bp의 ORF를 가지고 있다. PgCysP1의 아미노산 서열과 이차구조를 분석한 결과, 기존에 보고된 식물들과 높은 상동성을 나타내었으며 PgCysP1는 papain family에 속하는 것으로 확인되었다. RT-PCR 분석결과, 인삼의 PgCysP1는 NaCl, 저온, wound, salicylic acid에 대해 그 발현 양상이 상동성을 나타내는 다른식물의 CP 유전자 발현과 유사한 양성을 보였고, 이에 PgCysP1은 CP gene으로 사료되며, 앞으로 인삼 식물체의 환경 스트레스에 대한 내성 연구가 요구된다.

• BMB Reports
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• 제31권2호
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• pp.196-200
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• 1998

Zeins, maize storage proteins, are retained in the endoplasmic reticulum (ER) during the subcellular targeting process without the ER retention signal. Circumstantial data indicate that the 27K zein is an ER transmembrane protein. The potential transmembrane domain may permit the 27K zein to remain in the ER. This study investigated the potential transmembrane feature by employing alkaline extraction, proteinase K digestion, and surface biotinylation on isolated intact protein bodies. These assays consistently support the possibility of the 27K zein as a transmembrane protein. The 27K zein polypeptide was shown to be associated with alkali-stripped membranes. The polypeptide was digested by proteinase K to a smaller fragment. According to surface biotinylation, the 27K zeins was labeled to the exclusion of other classes of zeins. This study, therefore, concludes that the 27K zein has an ER transmembrane domain, which may serve as an anchor for zeins' ER retention.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제6권1호
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• pp.39-46
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• 1973

고등학생(高等學生)들의 도시락에 의한 영양공급(營養供給) 상태(狀態)를 밝혀 학교(學校) 영양(營養) 교육(敎育)의 재평가와 앞으로의 영양교육 방향 제시(提示)를 위하여 그리고 학생들의 영양공급 방향(向上)을 모색하기 위한 기초적인 연구로서 본 조사를 행하였다. 서울 시내(市內)의 남 녀(男 女) 인문계(人文係)와 실업계(實業系) 고등학교(高等學被)를 각각 1개교씩 선정하여 527명의 학생을 임의로 선택하여 질문지를 통한 조사와 아울러 도시락을 지참한 449명의 도시락 내용들을 칭량(秤量)함으로써 조사(調査)하였다. 도시락 내용물(內容物)에 대한 결과는 식품분석표에 의해 영양소의 함량으로 환산하였으며 이를 한국인 영양권장량과 비교하고 남녀별(男女別) 학교별(學檀別) 주부(主婦)의 교육정도별(敎育程度別)로 분류하여 비교(比較) 분석(分析)한 결과 다음과 같았다. 1. 도시락에 의한 영양공급량은 남자(男子)가 671ca1, 22.3g의 단백질(蛋白貿)로 권장량의 55.9%, 74.2%에 블과하고 여자(女子)는 495ca1, 21.3g의 단백질로 권장량의 61.8%, 80.0%에 불과 하였다. 그리고 niacin을 제외한 vitamin류와 무기질은 권장량에 비하여 모두 부족한 상태였다. 2. 인문계(人文系) 학생(學生)들은 실업계(實業系) 학생(學生)보다 Calori 섭취량은 낮고 단백질(蛋白質)은 높았는데 특히 동물성(動物性) 단백질(蛋白質)은 통계적으로 고도(高度)의 유의성(有意性)(P<0.01)이 있었다. 3. 주부(主婦)의 교육정도(敎育程衰)에 따른 영양공급상태는 모든 영양소면(營養素面)에서 권장량에 미달되고 불균형을 이루어 주부(主婦)의 교육정도(敎育程度)가 학생(學生)들의 영양급식관리(營養給食管理)에 아무런 차이(差異)를 일으키지 않았다. 4. 도시락 영양(營業)은 주식(主食)에 치중되어 있다.(時間)과 관계(關係)없이 Proteinase활성(活性)이 75%로 억제된다. 5)고 추 고추 1% 첨가구(添加區)는 저장 24시간후(時間後)에는 control에 비(比)하여 87% 억제되나 48시간(時間) 이후(以後)부터는 계속 75% 억제되었고, 10일(日)째는 50%로 억제된다. 5% 첨가구(添加區)는 저장 24시간후(時間後)부터는 87% 억제되고 7일(日)터는 Proteinase 활성(活性)이 75% 억제된다. 10% 첨가구(添加區)는 저장시간(時間)에 관계(關係)없이 control에 비(比)하여 87% 억제한다. 6)미 원 미원은 첨가(添加) 농도(濃度)와 관계(關係) 없이 2일(日)까지는 75% 억제되고 3일(日)에서 5일(日)까지는 50% 억제되었으나 7일(日)부터 는 Proteinase 활성(活性) 억제 효과가 없어진다. 미원은 저장시간이 경과함에 따라 Proteinase 활성(活性) 억제효과가 없어진다. 7)설 탕 설탕은 첨가(添加) 농도(濃度)에 관계(關係)없이 24시간후(時間後)에는 Proteinase 활성(活性)이 75% 억제되고 2일(日)째부터는 저장시간에 관계(關係)없이 계속 50% 억제된다. 8) 고초냉이 고초냉이는 저장 24시간째는 약(約) 95% 정도(程度)의 Proteinase 활성(活性)을 억제하나 2일(日)째 부터는 5%, 10% 첨가구(添加區)는 87% 억제하고 1% 첨가구(添加區)는 75% 억제되어, 고초냉이의 첨가농도(添加濃度)가 높을수록 Proteinase 활성(活性)이 억제된다. 9)겨 자 겨자는 저장시간과 별(別)로 관계(關係)없이 첨가농도(添加濃度)가 높을수록 Proteinase 활성작용(活性作用)을 억제하고 식품첨가물중(食品添加物中)에서 가장 높은 억제율을 나타내었다. 이는 노인질환의 특성상 건강검진에 한방의 참여가 필요한 이유가 되는 내용이라 사료된다. 이상에서

• 한국식품과학회지
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• 제21권1호
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• pp.86-91
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• 1989

Streptococci의 배양중의 염의 농도나 배지내 질소원의 조성 등이 쓴 맛 펩타이드의 형성에 깊이 관여한다고 알려진 세포내 및 세포외 프로테이나제(ICP, ECP)의 역가에 미치는 영향을 조사하기 위해 Streptococcus lactis $ML_8$ 및 Streptococcus cremoris $ML_4$ 두 균주를 NaCl 농도 $0{\sim}4%$, 배지 질소원중 카제인 함량을 $0{\sim}100%$로 달리한 조건에서 배양하고 그 때의 생육도와 균체내 및 균체외 프로테이나제의 역가를 측정하고 또한 같은 균체수에서의 프로테이나제 역가를 비교하기 위해 $10^{10}$ 세포당 효소의 역가도 계산하였다. 배지중 NaCl농도가 증가함에 따라 균체의 생육과 ECP의 역가는 감소했으나 ICP의 경우 $10^{10}$ 세포당 역가는 오히려 증가하였다. 이는 배지중 NaCl이 세포벽과 세포막에 관련된 ECP의 역가에만 직접 영향을 미치고 ICP의 역가에는 큰 영향을 미치지 않음을 시사하는 것으로 생각되었다. 배지의 질소원중 미분해 단백질인 카제인의 함량을 높게 하였을 때 균체의 생육은 낮았으나 효소 생산계 촉진에 의해 ECP의 역가는 두 균주 모두 높아졌다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제15권1호
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• pp.202-205
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• 2005

Our previous study showed that the overexpression of carboxypeptidase Y (CPY) of Saccharomyces cerevisiae in Escherichia coli resulted in the formation of insoluble inclusion bodies. To produce soluble CPY, we designed a novel Pichia pastoris expression system, in which the following were inserted into expression vectors: three different signal sequences derived from the mating factor a1 of S. cerevisiae, an inulinase of Kluyveromyces marxianus, and the endogenous signal sequence of CPY. The expression vector pHIL-D2-SSinul-proCPY was the most effective in the production of proCPY among the vectors examined. The purified active CPY was obtained from proCPY by treating with proteinase K, followed by QExcellose ion-exchange column chromatography.

• 미생물학회지
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• 제38권4호
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• pp.218-218
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• 2002

Using two drugs, tunicamycin and brefeldin A, which affect protein processing, we investigated the intracellular processing mechanism of secreted aspartyl proteinase 1 (SAPl) of Candide albicans. Three intracellular forms of SAPI were detected by immunoblotting using menoclonal antibody (MAb) CAPl. Their molecular weights were approximately 40, 41 and 45 kDa, respectively. The 41 kDa protein is a glycoprotein and may be the same as the extracellular form judging by its molecular mass. The 40 kDa protein was the unglycosylated form and its molecular mass coincided with deglycosylated SAPl and the 45 kDa protein was also the unglycosylated form. Neither the 40 and 45 kDa proteins were detected in the culture supernatant of C. albicans. These suggested that the 40 and 45 kDa proteins might be intracellular precursor forms of SAPI. These results show that SAPI is translated as a 45 kDa precusor form in the endoplasmic reticulum and the 45 kDa precursor farm undergoes proteolytic cleavage after translocation into the Golgi apparatus, generating the 40 kDa precursor form. This 40 kDa precursor is converted into a 41 kDa mature form through glycosylation in the Golgi apparatus. The mature form of the 41 kDa protein is sorted into secretary vesicles and finally released into the extracellular space through membrane fusion. When the glycan region of SAPl was digested with N-glycosidase F, both stability and activity of the enzyme decreased. These results indicate that the glycan attached to the enzyme may, at least in parti be related to enzyme stability and activity.

• Journal of Microbiology
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• 제38권4호
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• pp.218-223
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• 2000

Using two drugs, tunicamycin and brefeldin A, which affect protein processing, we investigated the intracellular processing mechanism of secreted aspartyl proteinase 1 (SAPl) of Candide albicans. Three intracellular forms of SAPI were detected by immunoblotting using menoclonal antibody (MAb) CAPl. Their molecular weights were approximately 40, 41 and 45 kDa, respectively. The 41 kDa protein is a glycoprotein and may be the same as the extracellular form judging by its molecular mass. The 40 kDa protein was the unglycosylated form and its molecular mass coincided with deglycosylated SAPl and the 45 kDa protein was also the unglycosylated form. Neither the 40 and 45 kDa proteins were detected in the culture supernatant of C. albicans. These suggested that the 40 and 45 kDa proteins might be intracellular precursor forms of SAPI. These results show that SAPI is translated as a 45 kDa precusor form in the endoplasmic reticulum and the 45 kDa precursor farm undergoes proteolytic cleavage after translocation into the Golgi apparatus, generating the 40 kDa precursor form. This 40 kDa precursor is converted into a 41 kDa mature form through glycosylation in the Golgi apparatus. The mature form of the 41 kDa protein is sorted into secretary vesicles and finally released into the extracellular space through membrane fusion. When the glycan region of SAPl was digested with N-glycosidase F, both stability and activity of the enzyme decreased. These results indicate that the glycan attached to the enzyme may, at least in parti be related to enzyme stability and activity.

• 자연과학논문집
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• 제9권1호
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• pp.25-29
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• 1997

Glucocorticoid에 의한 항염증 작용의 second messenger로 생각되어지는 annexin superfamily중 하나인 37 kDa의 단백질, lipocortin-1의 작용기작을 이해할 목적으로 in vivo에서 protein-protein interaction을 인식하는 yeast-based genetic assay인 yeast two assay를 통하여 lipocortin-1과 결합하는 단백질 유전자를 분리하여 조사하였다. 이 방법으로 실험을 수행한 결과 분리된 유전자가 human serine proteinase 유전자와 homology가 있는 것으로 밝혀졌다.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제11권5호
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• pp.402-407
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• 2006

Vascular endothelial cells release proteinases that degrade the extracellular matrix (ECM), thus enabling cell migration during angiogenesis and vasculogenesis. Sildenafil citrate stimulates the nitric oxide-cyclic guanosine monophosphate pathway through inhibition of phosphodiesterase type V (PDE5). In this report, we examined the mechanisms underlying sildenafil citrate-induced cell migration using cultured mouse aortic endothelial cells (MAECs). Sildenafil citrate induced migration and proteinase secretion by murine endothelial cells. Sildenafil citrate induced the secretion of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and MMP-9, which is inhibited by $NF-{\kappa}B$ inhibitors. Sildenafil citrate also induced the secretion of plasmin, which is inhibited by PI 3'-kinase inhibitors. It is suggested that sildenafil citrate-induced migrating activity in endothelial cells may be accomplished by increased secretion of proteinases.

• 한국생물물리학회:학술대회논문집
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• 한국생물물리학회 1999년도 학술발표회 진행표 및 논문초록
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• pp.42-42
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• 1999

Metastability in the native form of proteins has been recognized as a mechanism of biological regulation. The strained native structure of serpins (serine proteinase inhibitors) is a typical example. The native strain of serpins is considered to be crucial to their physiological functions, such as plasma proteinase inhibition, hormone delivery, Alzheimer filament assembly, and extracellular matrix remodeling.(omitted)