• 제목/요약/키워드: protein transduction domain

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Generation and Characterization of Cell-Permeable Greem Fluorescent Protein Mediated by the Basic Domain of Human Immunodeficiency Virus Type 1 Tat

  • Park, Jin-Seu;Kim, Kyeong-Ae;Ryu, Ji-Yoon;Choi, Eui-Yul;Lee, Kil-Soo;Choi, Soo-Young
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제10권6호
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    • pp.797-804
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    • 2000
  • The human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) Tat is one of the viral gene products essential for HIV replication. The exogenous Tat protein is transduced through the plasma membrane and then accumulated in a cell. The basic domain of the Tat protein, which is rich in arginine and lysine residues and called the protein transduction domain (PTD), has been identified to be responsible for this transduction activity. To better understand the nature of the transduction mediated by this highly basic domain of HIV-1 Tat, the Green Fluorescent Protein (GFP) was expressed and purified as a fusion protein with a peptide derived from the HIV-1 Tat basic domain in Escherichia coli. The transduction of Tat-GFP into mammalian cells was then determined by a Western blot analysis and fluorescence microscopy. The cells treated with Tat-GFP exhibited dose- and time-dependent increases in their intracellular level of the protein. the effective transduction of denatured Tat-GFP into both the nucleus and the cytoplasm of mammalian cells was also demonstrated, thereby indicating that the unfolding of the transduced protein is required for efficient transduction. Accordingly, the availability of recombinant Tat-GFP can facilitate the simple and specific identification of the protein transduction mediated by the HIV-1 Tat basic domain in living cells either by fluorescence microscopy or by a fluorescence-activated cell sorter analysis.

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재조합 베큘로바이러스벡터의 효과적 발현 (Effective Expression of Recombinant Baculovirus Vector Systems)

  • 김지영;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2014년도 추계학술대회
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    • pp.977-980
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    • 2014
  • polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자가 포함된 재조합 베큘로바이러스를 구축하였다. 본 재조합 베큘로바이러스 시스템은 인간 섬유아세포와 여러 가지 조직에 감염하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전달과 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구의 결과로 제작된 재조합 베큘로바이러스 시스템은 유전자의 전달과 발현에 있어서 대조 벡터시스템 보다 더욱 효과적이고 안전적이었다.

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재조합 베큘로바이러스 벡터 시스템의 신 구축 (Novel Construction of Recombinant Baculovirus Vector System)

  • 사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2012년도 추계학술대회
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    • pp.994-996
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    • 2012
  • 본 연구실에서는 새로운 베큘로바이러스 벡터 시스템을 구축하였다. 즉 본 벡터 시스템은 polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD)을 코딩하는 유전자들로 구성 되어있다. 이렇게 새로이 제작된 베큘로바이러스 벡터 시스템과 대조군의 벡터 시스템과 효율과 발현율을 비교하였다. 그 결과 본 연구실에서 제작된 베큘로바이러스 벡터 시스템이 다른 대조군의 벡터 시스템에 비해 효과적임을 확인할 수 있었다.

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Characteristics of HIV-Tat Protein Transduction Domain

  • Yoon Jong-Sub;Jung Yong-Tae;Hong Seong-Karp;Kim Sun-Hwa;Shin Min-Chul;Lee Dong-Gun;Shin Wan-Shik;Min Woo-Sung;Paik Soon-Young
    • Journal of Microbiology
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    • 제42권4호
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    • pp.328-335
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    • 2004
  • The human immunodeficiency virus type 1 (HIV-I) Tat protein transduction domain (PTD), which con­tains rich arginine and lysine residues, is responsible for the highly efficient transduction of protein through the plasma membrane. In addition, it can be secreted from infected cells and has the ability to enter neighboring cells. When the PTD of Tat is fused to proteins and exogenously added to cells, the fusion protein can cross plasma membranes. Recent reports indicate that the endogenously expressed Tat fusion protein can demonstrate biodistribution of several proteins. However, intercellular transport and protein transduction have not been observed in some studies. Therefore, this study exam­ined the intercellular transport and protein transduction of the Tat protein. The results showed no evi­dence of intercellular transport (biodistribution) in a cell culture. Instead, the Tat fusion peptides were found to have a significant effect on the transduction and intercellular localization properties. This sug­gests that the HIV-1 PTD passes through the plasma membrane in one direction.

Efficacy of Gene Transfer of Recombinant Baculovirus Vector

  • Sa, Young-Hee;Hong, Seong-Karp
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2013년도 춘계학술대회
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    • pp.1006-1008
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    • 2013
  • A novel recombinant baculovirus vector system containing coding genes for polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), and protein transduction domain (PTD) was constructed. We applied this recombinant baculovirus vector into cells and murine tissues and compared efficacy of gene transfer and expression of this recombinant baculovirus vector system with control vector system. From this result, we confirmed that this novel recombinant baculovirus vector system was very effective than control vector system.

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재조합 베큘로바이러스벡터와 대조 벡터의 비교 (Comparison of Recombinant Baculovirus Vector Systems and Control Vector System)

  • 김지영;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2015년도 춘계학술대회
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    • pp.954-957
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    • 2015
  • polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자로 구성된 재조합 베큘로바이러스를 제작하였다. 본 재조합 베큘로바이러스 시스템은 여러가지 세포주와 여러 가지 조직에 감염하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전달과 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구의 결과로 제작된 재조합 베큘로바이러스 시스템은 유전자의 전달과 발현에 있어서 대조 벡터시스템 보다 효능과 안전성면에서 우수하였다.

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새로운 재조합 베큘로바이러스벡터의 유전자전이와 유전자발현 (Gene Transfer and Gene Expression of Novel Recombinant Baculovirus Vector System)

  • 사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2013년도 추계학술대회
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    • pp.946-948
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    • 2013
  • 베큘로바이러스 시스템이 제조되었는데 이것은 polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자를 재조합한 것이다. 본 재조합벡터 시스템은 인간 섬유아세포에 적용하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전이와 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구로부터 새롭게 제작된 본 베큘로바이러스 시스템이 유전자의 전이와 유전자 발현 면에서 대조 벡터시스템 보다 고효율을 나타내었다.

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재조성된 베큘로바이러스 벡터의 유전자 전이와 발현 (Gene Transfer and Expression of Newly Reconstructed Baculovirus Vectors)

  • 김지영;김현주;사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2016년도 추계학술대회
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    • pp.923-926
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    • 2016
  • 베큘로바이러스 벡터가 cytomegalovirus (CMV) promoter, polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD)의 유전자로 재조성 되었다. 이렇게 재조성된 베큘로바이러스 벡터는 다양한 세포주와 조직에 감염시켰다. 우리는 이 재조성된 벡터와 다른 대조 벡터를 비교하여 유전자의 전이와 유전자 발현을 비교하였다. 결론적으로 이 재조성된 베큘로바이러스 벡터의 유전자의 전이와 발현의 효율이 대조 벡터 보다 우수한 효율을 나타내었다.

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재조합 베큘로바이러스벡터의 유전자전달과 발현의 효과 (Efficacy of Gene Transfer and Expression of Recombinanat Baculovirus Vector System)

  • 사영희;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2014년도 춘계학술대회
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    • pp.813-815
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    • 2014
  • polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자가 포함된 새로운 재조합 베큘로바이러스를 제조하였다. 본 재조합 베큘로바이러스 시스템은 293T, HepG2, HFF, Hur7 세포에 감염하여 시험하였고 재조합된 유전자의 전이와 유전자 발현을 대조 벡터시스템과 비교하였다. 본 연구로부터 새롭게 제작된 재조합 베큘로바이러스 시스템이 감염에 의한 유전자의 전달과 해당 유전자 발현에 있어서 대조 벡터시스템 보다 우수한 효과를 나타내었다.

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재조합 베큘로바이러스 벡터의 새로운 가능성 (A Novel Possibility of Recombinant Baculovirus Vector)

  • 김지영;김현주;홍성갑
    • 한국정보통신학회:학술대회논문집
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    • 한국정보통신학회 2015년도 추계학술대회
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    • pp.838-841
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    • 2015
  • 재조합 베큘로바이러스는 polyhedron promoter, vesicular stomatitis virus G (VSVG), polyA, cytomegalovirus (CMV) promoter, enhanced green fluorescent protein (EGFP), protein transduction domain (PTD) 유전자로 구성된다. 본 재조합 베큘로바이러스 벡터는 세포주와 조직에 감염시켰고 그 결과 다른 벡터 시스템에 비교하여 재조합된 유전자의 전이와 유전자 발현에 있어서 새로운 가능성이 발견되었다. 본 재조합 베큘로바이러스 시스템의 유전자의 전이와 발현의 효율은 타 벡터시스템 보다 우수하였다.

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