• 한국식품과학회지
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• 제30권5호
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• pp.1236-1242
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• 1998

한국산 표고버섯 산련 1호를 C/N비가 13.1인 버섯 완전액체배지에서 배양하여 균사체를 증식시킨 후 생리활성을 보이는 단백다당체를 추출하였다. 표고버섯 균사체 액체배양시 생성되는 단백다당체는 균사체 세포벽에 약 80%가 존재하고, 약 20%정도는 세포밖으로 분비하는 것으로 나타나 단백다당체의 추출은 균사체가 함유된 배양액 전체를 이용하여 추출하는 것이 높은 수율을 얻을 수 있었다. 그리고 균사체로부터 단백다당체의 추출방법으로 열수추출 및 glass bead mill로 세포벽을 파쇄한 후 열수추출, cellulase 처리 후 열수추출을 비교한 결과 물리적으로 세포벽을 파쇄한 후 60분간 열수추출하는 것이 배양액 100 mL당 약 930 mg의 조단백다당체가 추출되어 수율이 가장 높았다. 추출한 조단백다당체를 사용하여 protease 처리, 그리고 DEAE-cellulose 및 Sephadex G-100 column chromatography를 통하여 단백다당체를 정제한 후 단계별 시료에 대한 mouse leukemic cell인 $P_{388}$의 증식억제는 53.7, 62.2, 93.7, 97.4%로 정제도가 높아짐에 따라 증가하는 것으로 나타났다. Sephadex G-100 column으로 처리한 정제 단백다당체를 TLC/FID로 분석한 결과 단일 peak로 나타나 순수물질임을 확인하였다. 그리고 단백다당체의 성분을 분석한 결과 다당함량은 46.1%로 구성단당류는 glucose 및 galactose, xylose, mannose로 구성되어 있었고, 단백질은 약 7.3%로 주로 proline 및 glycine의 함량이 높았으며 methionine 및 leucine은 거의 없는 것으로 밝혀졌다. 그외에 무기질로서 Na, K, Zn, Ca 등이 존재하는 것으로 나타났다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제30권7호
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• pp.743-750
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• 1997

The hypoglycemic effects of 2 mushrooms, Pleurotus ostreatus and Lentinus edodes, on streptozotocin(STZ) induced diabetic rats were investigated in this study . Diabets mellitus was induced in male Sprague-Dawley rats by the injection of STZinto the tail vein at a dose of 45mg/kg. Sprague-Dawley male rats(200-250g) were assigned to one control and three STZ-diabetic groups. Diabetic groups were assigned to STZ-control, pleurotus ostreatus and Lenitinus edodes groups. All groups were fed a AIN 76 diet. The two experimental groups were fed with each protein-bound polysaccharide(150mg/kg BW) for 14 days and with carboxymethyl cellulose for STZ-control group. The body weight gain was monitored and the blood levels of glucose and cholesterol were measured . Levels of protein triglyceride, and free fatty acid in plasma were analysed. Serum aminotransferase activity as also measured. The body weight gain was lower in the all diabetic groups than in the of normal group. The weight of spleen was reduced by adminstration of the Lentinus edodes protein-bound polysaccharides. The result suggest that orally administered Lentinus edodes protein-bound polysaccharides exhibited hypoglycemic effect in STZ -induced diabetic rats and that these protein-bound polysaccharides may be useful for the management of diabetes mellitus.

• 한국식품영양학회지
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• 제10권4호
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• pp.503-508
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• 1997

L. edodes의 배양액 및 균사체로부터 항암작용이 있는 단백 다당류의 추출 및 정제방법에 관한 실험을 실시하였다. 단백다당류 추출에서 비이온성 계명 활성제인 2% Triton X-100 용액으로 추출할 경우 상온에서 추출하여도 통상의 10$0^{\circ}C$ 열수 추출을 통해 얻을 수 있는 것보다 수율이 높았다. 그러나 계명활성제 용액에 4N NaCl을 첨가하여 추출하면 ethanol 침전과정에서 단백다당류의 침전물을 얻을 수 없었다. 열수 추출에 있어서 추출 온도는 10$0^{\circ}C$가 효과적이고 추출 시간은 4시간 정도면 충분하였다. 열수 추출 결과 ethanol 침전 및 동결건조를 통하여 얻어진 조단백 다당류의 정제 실험에서는 alumina를 충전제로 하는 gel filtration보다 sephadex에 의한 gel filtration 또는 DEAE-cellulose, DEAE-sephadex를 이용한 ion exchange chromatography가 보다 효과적이다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제19권5호
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• pp.423-428
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• 1996

Optimum conditions for hydrolysis were investigated to enhance water-solubilities of protein-bound polysaccharides in the basidiocarps of Ganoderma lucidum by treating chymotrypsin. We also attempted with Ganoderma lucidum residue remaining after extracting hot water-soluble compoents in Ganoderma lucidum. After hydrolyzing under optimum conditions (20 ppm chymotrypsin, 2% Gampderma lucidum or 6% Ganoderma lucidum residue, at pH 10 and at $ 40^{\circ}C$), the amounts of total protein and carbohydrate of hydrolysate were measured. Michaelis constant, $K_{m}$, and maximum rate, $V_{max}$, calculated by Lineweaver-Buck plot for the hydrolysis of Ganoderma lucidum were 1.73% and 0.073%/min respectively and those for hydrolysis of Ganoderma lucidum residue were 2.40% and 0.033%/min respectively. The amount of polysaccharide isolated from Ganoderma lucidum (100 g) treated with chymotrypsin was only 3.07 g, but significantly increased amount (14.34 g) of polysaccharides was isolated from Ganoderma lucidum residue (100 g) treated with chymotrypsin. The protein-bound polysaccharide was isolated from the non-hydrolyzed and hydrolyzed sample and molecular weights of the polysaccharide were measured by Sepharose CL-48 gel filtration.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVI)
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• pp.99-102
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• 2005

The Basidomycetes fungus Agaricus blazei Murill has been well known as a health food for the prevention of cancer, diabetes, hyperlipidemia, arteriosclerosis and chronic hepatitis. This study was concentrated to investigate the characteristics of crude protein-bound polysaccharides(PBP) compositions extracted from Agaricus blazei Murill. In order to produce crude polysaccharides, culture conditions were examined using YMK media. Total sugars and protein contents of PBP were detected by phenol-sulfuric acid method and Bradford -assay. Hexosamine was found to be involved in the linkage, N-linked and O-linked types. To identify helical conformation existence, wavelength was measured using Congo red after the treatment with alkali solution.

• 한국균학회지
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• 제20권1호
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• pp.72-76
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• 1992

고등균류의 배양액 및 균사체로부터 항암작용이 있는 단백다당류의 추출 및 정제방법에 관한 실험을 구름버섯 균사배양체를 이용하고 실시하였다. 실온에서 비이온성 계면활성제인 2% Triton X-100과 함께 교반시키면서 추출했을 때 얻어진 단백다당류의 함량이 이미 사용되어 온 $100^{\circ}C$ 열수에 의한 추출방법을 통해 얻을 수 있는 것보다 더 좋았다. 그러나 4 N NaCl을 포함한 2% Triton-X-100 용액으로 처리했을 때는 추출 후 ethanol 침전과정에서 단백다당류의 침전물을 얻을 수 없었다. 열수추출과 ethanol 침전과정에서 얻어진 단백다당류의 순도를 높이기 위해 chromatography를 이용한 정제실험을 하였다. alumina와 DEAE-Cellulose, DEAE-Sephadex를 각각 충전제로 하여 시료를 전개시키고 280nm에서의 흡광도를 기준으로 단백질 성분의 용출을 확인하고 이들 분획에 대하여 anthrone정색반응과 625nm에서의 흡광도를 측정함으로써 단백다당류를 분리, 정제하였다. 단백다당류의 정제는 alumina를 충전제로 사용하는 것보다 DEAE-Cellulose와, DEAE-Sephadex를 충전제로 한 chromatography에 의하여 더 효율적으로 정제되었다.

• 약학회지
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• 제44권4호
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• pp.347-353
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• 2000

To examine influence of artificial digestive juice on the antitumor activity of Ganoderma lucidum-A(GL-A), protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum, we compared the digested protein-bound polysaccharide with undigested one both on immunopotentiating activity and influence of digestive juices. Protein-bound polysaccharide GL-B was obtained by digesting the antitumor component GL-A with artificial digestive Juices in vitro. When GL-A was administered orally to sarcoma 180 tumor-bearing ICR mice, the life prolonging effect was exhibited in a dose dependent manner Not only GL-A but GL-B increased the production of colony forming unit (CFU) to 10- and 8-fold of that of the control, respectively. Both of the protein-bound polysaccharides also showed the secretion of nitric oxide in RAW 264.7 cell lines to 3.5-and 3.7-fold of that of the control, respectively: GL-A activated components of the alternative complement pathway, whereas GL-B did not. In humoral immunity GL-A increased the activity of alkaline phosphatase in differentiated B cells to 3 times and GL-B to 4 times of that of the control. These results showed that the artificial digestive juices had no influence on the antitumor activity of the protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum and that its immunomodulating activity retained after treatment with artificial digestive juice. And this provides a basis of the protein-bound polysaccharide of Ganoderma lucidum as an peroral anticancer drug.

• 한국식품영양과학회지
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• 제38권6호
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• pp.667-673
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• 2009

본 연구는 단백다당체 함유 차가버섯 균사체 추출물 보강이 고지방식이로 비만이 유도되어 2형 당뇨 특성을 나타내는 C57BL/6J mice에서 지질수준 개선 및 혈당조절에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 실험동물은 정상 대조군 (N-C), 고지방 대조군(H-C), 고지방식이+저농도 균사체 추출물 투여군(M150L, 1 mL/kg bw, ${\beta}$-glucan 1.303 mg), 고지방식이+균사체 추출물 투여군(M150, 2 mL/kg bw, ${\beta}$-glucan 2.606 mg), 고지방식이+고순도 단백다당체 투여군(PP, 200 mg/kg bw), 고지방식이+메시마 투여군(M, 200 mg/kg bw) 6군으로 나누어 사육하였으며 연구결과는 다음과 같다. 부고환 지방은 차가버섯 균사체 추출물 투여 농도의존적으로 유의적인 감소를 나타냈다. 혈중 중성지방 및 VLDL에서 차가버섯 균사체 투여군(M150)은 고지방 대조군(H-C)보다 각각 유의적으로 감소하였고, 간 조직의 중성지방 농도는 고지방 대조군(H-C)보다 차가버섯 균사체 투여 실험군(M150L, M150)이 각각 26.8%, 30.9%, 총 콜레스테롤은 각각 65.5%, 61.9% 낮아져 유의적으로 감소하였다. 경구당부하 검사 결과 포도당 투여 3시간 후의 혈당이 고지방 대조군(H-C)보다 저농도 차가버섯 균사체 투여군(M150L) 4.9%, 차가버섯 균사체 투여군(M150) 9.5% 감소하였다. 혈당반응면적 또한 차가버섯 균사체 투여군(M150)에서 유의한 수준으로 낮았다. 혈중 인슐린 및 HOMA-IR 수준은 차가버섯 균사체 투여 실험군(M150L, M150)에서 고지방 대조군(H-C)보다 유의적으로 감소되었다. 간 중 글리코겐은 고지방 대조군(H-C)에서 글리코겐 합성이 저하된 반면 차가버섯 균사체 투여 실험군(M150L, M150)에서는 유의적으로 증가하였다. 혈중 아디포넥틴은 고지방 대조군(H-C)보다 차가버섯 균사체 투여군(M150)에서 유의적으로 높아졌다. 결론적으로, 단백다당체 함유 차가버섯 균사체 추출물이 식이 유도 비만/당뇨 모델인 C57BL/6J mice의 지질수준 개선 및 혈당조절에 긍정적인 영향을 미치고 있어 이를 이용한 기능성식품으로의 개발 가능성이 높다고 사료된다.

• 약학회지
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• 제37권5호
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• pp.490-498
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• 1993

To find antitumor components in the hot water extract from the basidiocarps of Hypsizigus mamomus. protein-bound polysaccharides were purified and fractionated by DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Sepharose CL-4B gel filtration chromatography. When a dose of 20 mg/kg/day was injected intraperitoneally into ICR mice. fraction IV of the component showed the highest inhibition ratio of 73.8% against the count of hemolytic plaque forming cells in mice to 3.2 times. when IV was about 30 KD and the fraction was composed of 76.1% polysaccharide and 4.9% protein. The hexosamine was detected in all the fractions, showing that the polysaccharide and protein moieties were bound each other.

• 생약학회지
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• 제24권3호
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• pp.203-212
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• 1993

To find antitumor components in the hot water extract of the cultured mycelia of Ganoderma lucidum, protein-bound polysaccharides were purified and fractionated (Fr. I-V) by DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Sepbarose CL-4B gel filtration. When a dose of 20 mg/kg/day of each was, i.p., injected into ICR mice, the inhibition ratios against the solid form of sarcoma 180 were $64.2{\sim}75.8%$. The antitumor component was examined for immunological activity. It increased the amount of superoxide anion released by induced macrophages in peritoneal cavity to 1.8 times and the count of hemolytic plaque-forming cells (PFC) was increased to 4.4 times as compared with those of the control group. It contained 68.6% polysaccharide which consisted of mannose, glucose, galactose, fucose and xylose and 5.1% protein consisting of 17 amino acids. The contents of hexosamine were 0.78%. The molecular weight of Fr. V that showed the highest antitumor activity was $5.8{\times}10^4$ dalton by Sepharose CL-4B gel filtration. It was named lucidan.