This study was conducted to understand the source and behavior of organic matter using the fluorescent technique (excitation-emission matrix) as a part of environmental monitoring program in the Korea manganese nodule mining site in the Northeastern Pacific Ocean. Water samples were collected at $0^{\circ},\;6^{\circ}N$, and $10.5^{\circ}N$ along $131.5^{\circ}W$ in August 2005. The concentration of total organic carbon (TOC) ranged from 58.01 to $171.93\;{\mu}M-C$. The vertical distribution of TOC was characterized as higher in the surface layer and decreased with depth. At $6^{\circ}N$, depth-integrated (from surface to 200 m depth) TOC was $337.1\;gC/m^2$, which was 1.4 times higher value than other stations. The exponential decay curve fit of vertical profile of TOC indicated that 59% of organic carbon produced by primary production in the surface layer could be decomposed by bacteria in the water column. Dissolved organic matter is generally classified into two distinctive groups based on their fluorescence characteristics using three-dimensional excitation/emission (Ex/Em) fluorescence mapping technique. One is known as biomacromolecule (BM; protein-like substance; showing max. at Ex 280/Em 330), mainly originated from biological metabolism. The other is geomacromolecule (GM; humic-like substance; showing max. at Ex 330/Em 430), mainly originated from microbial degradation processes. The concentration of BM and GM was from 0.42 to 7.29 TU (tryptophan unit) and from 0.06 to 1.81 QSU (quinine sulfate unit), respectively. The vertical distribution of BM was similar to that of TOC as high in the surface and decreased with depth. However, the vertical distribution of GM showed the reverse pattern of that of BM. From these results, it appeared that BM occupied a major part of TOC and was rapidly consumed by bacteria in the surface layer. GM was mainly transformed from BM by microbial processes and was a dominant component of TOC in the deep-sea layer.
Selected physical properties of cornmeal extrudates fortified with dairy products and extrusion process by $CO_2$ gas injection were analysed. Dairy products including whole milk powder, whey protein concentrate non-fat dry milk, and sodium caseinate were tested at the addition of 10% and 20%, based on cornmeal weight. $CO_2$ gas was injected to the barrel at the pressure of 0.7 and 1.4 MPa. Specific mechanical energy (SME) input was decreased by the addition of dairy products. Sodium caseinate had a little effect on decreasing the SME input, however whole milk powder tremendously reduced SME input when the concentration increased. An increase in milk product content resulted in increasing the piece density at the injection pressure of 0.7 MPa. At both 10% and 20% milk product content, the piece density was lowest at the injection pressure of 0.7 MPa. The sectional expansion index was highest at the injection pressure of 0.7 MPa. However, the specific length was constantly increased with the increase in $CO_2$ injection pressure. Water absorption index was decreased and water solubility index was increased by the addition of milk products. The injection pressure of $CO_2$ was optimum at 0.7 MPa. The addition of whole milk powder limited to puff the melt, but the other milk products tested resulted in puffing with $CO_2$ injection to 1.4 MPa.
In this study, we fabricated the catalysts for enzymatic biofuel cell anode with carbon nanotube (CNT), glucose oxidase (GOx) and various molecular weights branched poly(ethyleneimine)(bPEI) and terephthalaldehyde (TPA) as cross-linker. In case of GOx/bPEI/CNT using only physical entrapments for immobilization, the molecular weights of bPEI didn't affect to electrochemical performances and long term stability. but that of the catalysts cross linked via TPA (TPA[GOx/bPEI/CNT]) improved and the mass transfer of glucose to FAD was interrupted as increasing of the bPEI's molecular weights. Furthermore, it was confirmed that the optimum molecular weight of PEI for TPA [GOx/bPEI/CNT]) structure is 750k that showed marvelous high performance (maximum power density of $0.995mW{\cdot}cm^{-2}$).
The characteristics and behavior of dissolved organic matter (DOM) were determined by analyzing the molecular weight fractions and fluorescence properties of water samples in the downstream Nakdong River. Biogeochemical water quality parameters and fluorescent dissolved organic matter (FDOM) were analyzed at five sampling points in the downstream area of the Nakdong River January-August 2019. The molecular weight fractions of the DOM were separated by the Liquid Chromatography-Organic Carbon Detection (LC-OCD). The DOM predominantly comprised humic substances, followed by the building blocks, low molecular weight neutrals and biopolymers. The hydrophobic (aromatic) and hydrophilic properties were shown as coexisting, as most of the SUVA254nm values were under four. The FDOM was characterized as humic-like (FDOMH) with allochthonous origin and protein-like (FDOMP) with autochthonous origin; the FDOMH with autochthonous origin was also identified. The FDOMH relies on the aromaticity of the allochthonous organic matter and increases during summer. The FDOMH and FDOMP, which depend on the biodegradable dissolved organic matter from phytoplankton, were highly fluorescent in winter. The allochthonous organic matter was the dominant factor contributing to the behavior of the DOM, externally introduced to the river by rainfall. The FDOM only minimally contributed to the behavior of the DOM. It can be explained as the seasonal characteristics of the DOM, varied by the source of the organic matter.
The cyclohexanol dehydrogenase (ChnA), produced by Rhodococcus sp. TK6, which is capable of growth on cyclohexanol as the sole carbon source, has been previously purified and characterized. However, the current study cloned the complete gene (chnA) for ChnA and its flanking regions using a combination of a polymerase chain reaction (PCR) based on the N-terminal amino acid sequence of the purified ChnA and plaque hybridization from a phage library of Rhodococcus sp. TK6. A sequence analysis of the 5,965-bp DNA fragment revealed five potential open reading frames (ORFs) designated as partial pte (phosphotriesterase), acs (acyl-CoA synthetase), scd (short chain dehydrogenase), stp (sugar transporter), and chnA (cyclohexanol dehydrogenase), respectively. The deduced amino acid sequence of the chnA gene exhibited a similarity of up to $53\%$ with members of the short-chain dehydrogenase/reductase (SDR) family. The chnA gene was expressed using the pET21 a(+) system in Escherichia coli. The activity of the expressed ChnA was then confirmed (13.6 U/mg of protein) and its properties investigated.
A food-grade integration vector based on site-specific recombination was constructed. The 5.7-kb vector, pIMA20, contained an integrase gene and a phage attachment site originating from bacteriophage A2, with the ${\alpha}$-galactosidase gene from Lactobacillus plantarum KCTC 3104 as a selection marker. pIMA20 was also equipped with a controllable promoter of nisA ($P_{nisA}$) and a signal peptide-encoding sequence of usp45 ($SP_{usp45}$) for the production and secretion of foreign proteins. pIMA20 and its derivatives mediated site-specific integration into the attB-like site on the Lactococcus lactis NZ9800 chromosome. The vector-integrated recombinant lactococci were easily detected by the appearance of blue colonies on a medium containing $X-{\alpha}-gal$ and also by their ability to grow on a medium containing melibiose as the sole carbon source. Recombinant lactococci maintained these traits in the absence of selection pressure during 100 generations. The ${\alpha}-amylase$ gene from Bacillus licheniformis, lacking a signal peptide-encoding. sequence, was inserted downstream of $P_{nisA}\;and\;SP_{usp45}$ in pIMA20, and the plasmid was integrated into the L. lactis chromosome. ${\alpha}-Amylase$ was successfully produced and secreted by the recombinant L. lactis, controlled by the addition and concentration of nisin.
Kwak, Min-Jung;Lee, Jidam;Kwon, Soon-Kyeong;Kim, Jihyun F.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.3
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pp.591-597
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2017
Maribacter dokdonensis DSW-8 was isolated from the seawater off Dokdo in Korea. To investigate the genomic features of this marine bacterium, we sequenced its genome and analyzed the genomic features. After de novo assembly and gene prediction, 16 contigs totaling 4,434,543 bp (35.95% G+C content) in size were generated and 3,835 protein-coding sequences, 36 transfer RNAs, and 6 ribosomal RNAs were detected. In the genome of DSW-8, genes encoding the proteins associated with gliding motility, molybdenum cofactor biosynthesis, and utilization of several kinds of carbohydrates were identified. To analyze the genomic relationships among Maribacter species, we compared publically available Maribacter genomes, including that of M. dokdonensis DSW-8. A phylogenomic tree based on 1,772 genes conserved among the eight Maribacter strains showed that Maribacter speices isolated from seawater are distinguishable from species originating from algal blooms. Comparison of the gene contents using COG and subsystem databases demonstrated that the relative abundance of genes involved in carbohydrate metabolism are higher in seawater-originating strains than those of algal blooms. These results indicate that the genomic information of Maribacter species reflects the characteristics of their habitats and provides useful information for carbon utilization of marine flavobacteria.
Sixty four bacterial colonies which were able to oxidize the manganese were isolated from soil samples in Mokcheon and Ochang area. Among them, one bacterial strain was selected for this study based on its higher manganese oxidation, and this selected bacterial strain was identified as Aeromonas sp. MN44 through physiological-biochemical test and analysis of its 16s rRNA sequence. Aeromonas sp. MN44 was able to utilize lactose but did not utilize various carbohydrates as a sole carbon source. Aeromonas sp. MN44 showed a very sensitive to antibiotics such as kanamycin, chloramphenicol, ampicillin, tetracycline and spectinomycin, and heavy metal such as cadmium. But this strain showed a high resistance up to mg/ml unit to heavy metals such as lithium and manganese. Optimal manganese oxidation condition of Aeromonas sp. MN44 was pH 7.4 and manganese oxidation activity was inhibited by proteinase K and boiling treatment. So, we concluded that this factor was protein. The manganese oxidizing factor produced by Aeromonas sp. MN44 was partial purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-Toyopearl 650M ion exchange chromatography and Sephadex gel filtration chromatography. Its molecular mass was about 113 kDa.
Park, Soo-Dong;Lee, Sang-Nam;Park, Ik-Hyun;Choi, Jong-Su;Jeong, Wol-Kyu;Kim, Youn-Hee;Lee, Heung-Shick
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.4
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pp.789-795
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2004
A promoter-probe shuttle vector pSK1Cat was constructed for the isolation of transcriptional signal sequences from Corynebacterium glutamicum. Besides conferring resistance to kanamycin in Escherichia coli and C. glutamicum, the vector carried a promoterless cat gene to confer resistance to chloramphenicol upon insertion of the appropriate transcriptional signals in the multiple cloning site. By utilizing the vector, a series of transcriptionally active fragments were isolated from the genome of C. glutamicum. The clones, ranging from 200 bp to 1 kb in size, were grouped into 3 classes of strong, medium, and weak, based on the chloramphenicol acetyltransferase (CAT) activity and sensitivity to the chloramphenicol of the clone-carrying C. glutamicum cells. C. glutamicum cells carrying the $P_{19}$ clone, a representative in the strong class, were able to grow on minimal agar plates containing over $40 mg/mell$ chloramphenicol, and showed CAT activity of 10 m㏖/mgㆍmin, performing slightly better than the cells carrying $P_{tac}$ , a strong E. coli promoter. Subcloning analysis of the $P_{19}$ clone identified a 180 bp intergenic fragment ($P_{180}$), which was located upstream of a gene encoding a hypothetical membrane protein. The expression conferred by $P_{180}$ was not affected by either the kinds of carbon sources or changes in temperature. These properties make the $P_{180}$ clone useful for the deregulated expression of biosynthetic genes in C. glutamicum during amino acid fermentation.
Soil column experiments were evaluated effects of silver nanoparticles (i.e., 0, 2.5, 5, and 10 mg/L) on the microbial viability which is strongly associated with the degradation of organic matter, pharmaceutically active compounds(PhACs) and biological oxidation of nitrogenous compounds during river bank filtration. The addition of silver nanoparticles resulted in almost no change in the aqueous matrix. However, the intact cell concentration decreased with addition of silver nanoparticles from 2.5 to 10 mg/L, which accounted for 76% to 82% reduction compared to that of control (silver nanoparticles free surface water). The decrease in adenosine triphosphate was more pronounced; thus, the number and active cells in aqueous phase were concurrently decreased with added silver nanoparticles. Based on the florescence excitation-emission matrix and liquid chromatograph - organic carbon detection analyses, it shows that the removal of protein-like substances was relatively higher than that of humic-like substances, and polysaccharide was substantially reduced. But the extent of those substances removed during soil passage was decreased with the increasing concentration of silver nanoparticles. The attenuation of ionic PhACs ranged from 55% to 80%, depending on the concentration of silver nanoparticles. The attenuation of neutral PhACs ranged between 72% and 77%, which was relatively lower than that observed for the ionic PhACs. The microbial viability was affected by silver nanoparticles, which also resulted in inhibition of nitrifiers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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