작물의 생육촉진 및 식물 진균병의 생물방제능을 동시에 나타내는 다기능성 미생물제제를 개발하고자 토양으로부터 분리하여 보관중인 세균 120종의 활성을 검토하였다. 그 중 siderophore를 생성하고 항진균 활성을 보이는 BS11-1, BS11-2, BS11-3를 선발하였다. 이들 균주는 cellulase, protease 같은 lytic enzyme을 생산하였으며 식물성장 촉진 호르몬중의 하나인 IAA를 생성하였다. 이들 선발균들에 의한 식물 생장 촉진을 조사한 결과, BS11-1, BS11-2, BS11-3 균 배양액 관주 시 고추 유묘의 생육을 132%, 122%, 120% 증가 시켰으며, BS11-1, BS11-2 균주의 경우 뿌리의 신장 및 생육이 촉진되었음을 확인 할 수 있었다.
Young Jin Baek;Hyeong Suk Bae;Young Kee Kim;Min Yoo;Hyun Uk Kim
한국미생물·생명공학회지
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제14권4호
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pp.319-324
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1986
Lactobacillus casei 모세포와 동종간 융합세포간의 유산생성, 단백질 분해력, Bacteriophage 저항성 등의 생리적 특성과 표현형을 비교분석하였다. 두 모세포 사이에서 형성된 융합세포는 모세포를 침입하는 bacteriophage에 대하여 저항성을 시험한 결과 L. casei C-M 표현형은 융합세포 중 46%를 차지하였고, L. casei 3-M 표현형은 42%였고, 12%의 융합세포는 두 모세포 bacteriophage에 저항성을 소유하였다. 융합세포의 유산생성력과 단백질 분해력도 유사한 출현율을 나타내었다. Plasmid DNA의 Hind III 분해물은 모세포와 융합세포간에 차이가 없었으나, 융합세포들은 L. casei C-M 또는 L. casei 3-M 중 어느 한 모세포의 Plasmid만을 소유하고 있었다.
Rosas-Garcia, Ninfa M.;Avalos-de-Leon, Osvaldo;Villegas-Mendoza, Jesus M.;Mireles-Martinez, Maribel;Barboza-Corona, J.E.;Castaneda-Ramirez, J.C.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제24권11호
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pp.1495-1502
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2014
Metarhizium anisopliae is a widely studied model to understand the virulence factors that participate in pathogenicity. Proteases such as subtilisin-like enzymes (Pr1) and trypsin-like enzymes (Pr2) are considered important factors for insect cuticle degradation. In four M. anisopliae strains (798, 6342, 6345, and 6347), the presence of pr1 and pr2 genes, as well as the enzymatic activity of these genes, was correlated with their virulence against two different insect pests. The 11 pr1 genes (A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, and K) and pr2 gene were found in all strains. The activity of individual Pr1 and Pr2 proteases exhibited variation in time (24, 48, 72, and 96 h) and in the presence or absence of chitin as the inductor. The highest Pr1 enzymatic activity was shown by strain 798 at 48 h with chitin. The highest Pr2 enzymatic activity was exhibited by the 6342 and 6347 strains, both grown with chitin at 24 and 48 h, respectively. Highest mortality on S. exigua was caused by strain 6342 at 48 h, and strains 6342, 6345, and 6347 caused the highest mortality 7 days later. Mortality on Prosapia reached 30% without variation. The presence of subtilisin and trypsin genes and the activity of these proteases in M. anisopliae strains cannot be associated with the virulence against the two insect pests. Probably, subtilisin and trypsin enzyme production is not a vital factor for pathogenicity, but its contribution is important to the pathogenicity process.
연산오계는 오래전부터 건강기능 증진 및 치료 효능이 높은 것으로 알려져 왔다. 최근 건강기능식품 소재로 기능성 펩타이드 효능이 알려짐에 따라, 연산오계 다리육으로부 올리고 펩타이드 최적 생산 공정 및 생성물 특성에 대하여 연구를 수행하였다. 최적 효소가수 분해 공정 표면반응 분석을 이용하여 수행하였다. 최적 공정 조건을 확립하기 위해서 온도 (40, 50, $60^{\circ}C$), pH (pH 6.0, 7.0, 8.0), 효소 (1, 2, 3%) 범위에서 수행을 하였다. 생성물에 대한 가수분해도, 유리아미노산, 분자량 분포를 분석하였다. 효소 가수분해 최적 온도는 $58^{\circ}C$, pH 7.5, 효소의 농도는 3% 이었다. 최적 조건에서 2 시간 효소 가수분해를 한 결과 75-80% 이었다. 유리 아미노산 총량은 168.131 mg/100 g 이었다. 분자량를 MALDI-TOF 으로 분석을 한 결과 90% 이상이 300-1,000 Da 분포를 보여주었다.
고추장의 보존성 향상을 목적으로 고추장에 5, 10, 20 kGy의 선량으로 감마선을 조사하고 $25^{\circ}C$에 12주간 보존하면서 고추장의 미생물 및 일반품질 변화를 조사하였다. 고추장의 Bacillus는 감마선 조사에 대하여 3.94 kGy의 $D_{10}$값을 보여 감마선에 대한 저항성이 높았으며 효모와 젖산균은 10 kGy의 선량에서 완전 사멸에 가까운 살균효과를 보였다. 고추장 보존 중의 일반품질 평가 요소인 아미노산성질소, 총환원당, protease 및 amylase 활성, pH, 갈변도의 변화는 감마선 조사에 의하여 영향을 받지 않았다. 따라서 감마선 조사는 고추장의 품질에 영향을 주지 않고 미생물만을 선택적으로 사멸시켜 제품의 보존 유통 및 가공에서 미생물 관점의 품질을 유지하는데 유용한 방법이 될 것으로 평가되었다.
섬유소를 비롯한 단백질, 지질, 녹말을 분해할 수 있는 세균을 된장으로부터 분리하여 동정한 결과 Bacillus subtilis로 분류되었으며, Bacillus subtilis CK-2로 명명하였다. 분리균주는 $40\sim45^{\circ}C$의 비교적 넓은 온도 범위와 pH 6~9의 넓은 pH 범위, 그리고 NaCl 0~3% 범위에서 잘 자랐으며, 높은 자가분해효소 활성을 갖는 것을 알 수 있었다. B. subtilis CK-2가 분비하는 가수분해효소들은 대부분 세균의 생장과 거의 비례적으로 세포외 활성을 나타내는 1차 대사산물로 확인되었다. 이상의 결과로부터 B. subtilis CK-2는 농수임산물 폐기물이나 음식물 폐기물의 퇴비화, 사료 생산 등에 유용하게 이용될 수 있을 것으로 생각한다.
효소 분해에 의해 HVP를 생산하는데 있어서 여러 가지 효소의 조합, 효소 첨가 순서, pH, 산세척 등이 가수분해에 미치는 효과를 검토하였다 Endoprotease으로서 Neutrase와 Alcalase를 혼합하여 사용하는 것이 Alcalase를 단독 사용하는 것 보다 가수분해도가 높았으며 exoprotease인 Flavourzyme을 이용하여 2차 가수분해함으로써 60%이상의 가수분해도를 얻을 수 있었다. 2차 가수분해 시 원심분리에 의해 미반응 불용 성분을 제거하는 것은 가수분해도에 큰 영향을 미치지 않았고, 1차 가수분해 후 2차 원심분리의 수세수를 원료 현탁에 재사용하였을 경우 가수분해도 및 단백질 회수율을 높일 수 있었다. Ca이온의 첨가에 의한 Neutrase의 안정화 효과는 가수분해도에 큰 영향을 미치지 않았다. 탄수화물 분해효소의 사용과 산세척의 반복에 의해 가수분해도와 생산물의 단백질 함량이 각각 증가함을 알 수 있었다. Endoprotease과 exoprotease을 별도로 각각 처리하기보다는 동시 처리하는 것이 가수분해에 효율적이었다.
Many immune down-regulatory molecules have been isolated from parasites, including cystatin (cystain protease inhibitor). In a previous study, we isolated and characterized Type I cystatin (CsStefin-1) of the liver fluke, Clonorchis sinensis. To investigate whether the CsStefin-1 might be a new host immune modulator, we induced intestinal inflammation in mice by dextran sodium sulfate (DSS) and treated them with recombinant CsStefin-1 (rCsStefin-1). The disease activity index (DAI) increased in DSS only-treated mice. In contrast, the DAI value was significantly reduced in rCsStefin-1-treated mice than DSS only-treated mice. In addition, the colon length of DSS only-treated mice was shorter than that of rCsStefin-1 treated mice. The secretion levels of IFN-${\gamma}$ and TNF-${\alpha}$ in the spleen and mesenteric lymph nodes (MLNs) were significantly increased by DSS treatment, but the level of TNF-${\alpha}$ in MLNs was significantly decreased by rCsStefin-1 treatment. IL-10 production in both spleen and MLNs was significantly increased, and IL-$10^+F4/80^+$ macrophage cells were significantly increased in the spleen and MLNs of rCsStefin-1 treated mice after DSS treatment. In conclusion, rCsStefin-1 could reduce the intestinal inflammation occurring after DSS treatment, these effects might be related with recruitment of IL-10 secreting macrophages.
Kochujang, fermented hot pepper soybean paste, was prepared by traditional method, and irradiated with gamma ray of $^{60}Co{\;}up{\;}to{\;}15{\pm}1.5{\;}kGy$ for confirming main factor of kochujang fermentation. Nonirradiated (control) and irradiated samples kochujang were fermented at $25^{\circ}C$ and analyzed biochemical properties including enzyme activities and viable cell count during fermentation for 60 days. The total viable count in irradiated kochujang decreased to $10^4{\;}CFU/g$ which was $10^8{\;}CFU/g$ in the control. Because of a little changing enzyme activities of ${\alpha}{\cdot}{\beta}{\;}amylase$ and acid neutral protease by irradiation at the above level, amino type nitrogen which is the main quality reference of kochujang was comparable to the control. By irradiation, gas production was completely stopped which is one of biggest problems during distribution of kochujang. Total volume of gas produced at $25^{\circ}C$ from the control kochujang was 453 mL/100 g which was composed of over 90% of $CO_2$. The odor of irradiated kochujang was inferior to the control which seemed to be related to reduced microbial populations.
An improved kinetic assay for prekallikrein activator (PKA), a potential vasodilator, has been developed to be used as an indicator for quality control during production of human albumin preparations. It consists of two reaction stages. In the first stage, PKA and prekallikrein are incubated at $37^{\circ}C$ for 45 min to allow the transformation into kallikrein. Kallikrein, a serine protease, catalyzes the splitting of p-nitroaniline (pNA) from its substrate H-D-Pro-Phe-Arg-pNA(S-2302). The rate at which pNA is released was measured spectrophotometrically at 405 nm. Prekallikrein, a substrate of PKA was purified by DEAE ion-exchange chromatography and the major potential variations in the assay were optimized; pH 8.0 and 150 mM sodium chloride were chosen to give a proper ionic strength. Reaction times in the range of 10 to 360 min provided linear dose-response curves. The concentration of prekallikrein was adjusted to fall between 1:1 and 1:3 dilutions to generate a linear standard calibration curve. Under the optimized conditions, reproducibility was checked. In a precision test, the coefficient of variation (CV) stayed within ${\pm}4%$ and the dose-response curve showed a good correlation (${r^2}=0.999$). An accuracy test with an international standard of PKA afforded a mean recovery of 97.5%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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