Bacillus subtilis BK-17 which produces a novel protease with fibrinolytic activity was isolated from soybean paste. Bioreactor production of the enzyme was studied in order to optimize fermentation conditions such as medium concentration, pH, agitation speed, and temperature. Under most cultural conditions, enzyme production initially began when the cell growth stopped. The onset of the enzyme production was indicated by rapid increase in both dissolved oxygen (DO) and pH. Two- to three-times more concentrated medium than the flask optimum medium yielded higher enzyme production in the bioreactor fermentation. When the medium pH was controlled constant, pH 6.5 exhibited the highest activity in the range of 6.0 to 7.5, but the activity was similar to the case when the pH was initially adjusted to 7.5 and subsequently maintained within a relatively wide range of 6.4 to 7.8. Agitation speed did not affect the enzyme production with an exception of DO reaching zero. Fermentation time was reduced when temperature increased within the range of $25^{\circ}C$ to$37^{\circ}C$. However, the highest activity, along with the slow decrease of the enzymatic activity after reaching the maximum value, was observed at $25^{\circ}C$. By shifting the temperature from $37^{\circ}C$ to $25^{\circ}C$immediately after DO reached the minimum level, the high enzyme production of 1,100 U/ml along with the short fermentation period of 13 h could be obtained.
This study was carried out to compare the changes of nutrients, sensory and chemical properties of freeze-concentrated and evaporated milks during storage. For pasteurization, the freeze-concentrated milk containing 27% of total solid was treated with 150 rpm ozone for 5 min, and 99% of microflora was eliminated. Also, the activities of protease and lipase decreased 93.31% and 96.15%, respectively, and phosphatase showed negative activity. Total bacteria count was maintained below$2.0{\times}10^4$CFU/ml. During storage, TBA absorbance was lower in freeze-concentrated milk than that in the evaporated milk. The production of short-chain free fatty acids and free amino acids increased proportionally to the storage period in both samples. While the short-chain free fatty acid production was lower in the freeze-concentrated milk compared with that in the evaporated milk, the production of individual free amino acid was similar in both samples. In sensory evaluation, cooked flavor and color were much lower in the freeze-concentrated milk than that in the evaporated milk. Overall acceptability score was higher in the freeze-concentrated than the evaporated milk. Based on above results, ozone treatment for the freeze-concentrated milk pasteurization was positive at the elimination of microflora and enzyme inactivation. During storage, the freeze-concentrated sample minimized the change of color and TBA absorbance, the production of short-chain free fatty acid and vitamins than the evaporated milk. Therefore, the freeze-concentrated milk process in the present study resulted in the positive effect in minimizing nutrient loss and keeping quality of milk during storage.
E. intermedium Blocontrol activity of a P. chlororaphis rhizobacteium O6, depends to the synthesis of extracellular secondary metabolites and exoenzymes, thought to antagonize the pathogenicity of a variety of phytopathogenic fungi. The production of secondary metabolites and exoenzymes in O6, depends essentially on the GacS-mediated signal transduction pathway, which activates largely unknown signal transduction pathway. To exploit the GacS-mediated signal transdcution pathway involved in activation of ph genes that are necessary for biosynthesis of phenazine from P. chlororaphis O6, we cloned and sequenced the phz operon, rpoS gene encoding stationary specific sigma factor, ppx gene encoding polyphosphatase, and lon gene encoding ion protease. Expression of each gene in wild type and GacS mutant were analyzed by RT-PCR. Transcripts from rpoS, phzI enconing acylhomoserine lactone (AHL) synthase, and ph structural genes in the GacS mutant were reduced in each of these growth phases compared to the wild type. The GacS or Lon mutant was found to be deficient in the production of phenzines, exoenzymes, and the acylhomoserine lactone. These mutants were not complemented by ph operon and addition of exogenous AHL. These results indicate that the GacS global regulatory systems controls phenazine production at multiple levels. Future research will focus to identifying the GacS-mediated regulatory cascade involving in production of phenazine in P. chlororaphis.
순창군에서 생산된 두릅을 40% EtOH을 이용하여 추출한 후 chlorogenic acid 함량, 항산화, 항균, 항염 및 소화효소 활성을 측정하였다. HPLC를 이용하여 chlorogenic acid 함량을 측정한 결과 7.06±0.01 mg/g 함유되어 있었다. DPPH 라디칼 소거활성(SC50)은 4.79±0.05 mg/mL, ABTS 라디칼 소거활성(SC50)은 5.79±0.05 mg/mL, 총 폴리페놀 함량은 170.0±1.8 mgGAE/g, 총 플라보노이드 함량은 105.5±4.1 mgQE/g으로 분석되었다. RAW 264.7 세포, Caco-2 세포에서 세포독성이 나타나지 않았으며, 농도 의존적으로 NO 생성이 억제되었다. RAW 264.7 세포에서 염증성 cytokine인 TNF-α생성은 8.9±0.1 ng/mL, IL-6 생성은 15.2±0.8 ng/mL, IL-1β생성은 30.9±0.9 pg/mL으로 억제되었으며, AEE의 처리 농도가 증가함에 따라 TNF-α, IL-1β, IL-6 생성이 농도 의존적으로 억제되었다. S. typhimurium, L. monocytogenes, H. pylori에 대한 항균활성이 우수하게 나타났으며, 두릅을 EtOH 추출물의 처리농도가 증가함에 따라 효소 활성인 α-amylase와 protease 효소활성도 증가하였다. 순창군에서 생산된 두릅은 chlorogenic acid를 다량 함유하고 있으며, 항산화, 항염, 항균, 소화효소 활성이 우수하게 나타나 향후 건강기능성 소재로 개발할 수 있을 것으로 판단된다.
홍잠은 숙잠(熟蠶)을 수증기로 익혀서 인간이 섭취할 수 있도록 제조한 다양한 건강 증진 효과가 있는 천연 건강 식품이다. 현재 표준 제조방법은 수증기로 찐 홍잠을 보관과 판매의 편의를 위하여 급속 냉동하여 동결 건조를 진행하는 것이다. 그런데, 홍잠을 동결 건조하는 과정은 많은 시간과 비용을 필요로 하여 홍잠 제품 가격의 인상 요인으로 작용하고 있다. 본 연구에서는 홍잠을 수증기로 찐 후 바로 균질 액으로 제조하여 분무 건조하면 분말 제조 비용을 절감할 수 있음을 발견하였다. 그리고 홍잠 균질 액에 식용 단백질 분해 효소를 첨가하여 분해시킨 후, 단 1회의 분무 건조로 제품을 제조할 수 있는 방법을 개발하였다. 특히 홍잠 균질 액이나 효소 분해 홍잠 균질 액은 바로 액상이나 젤리 형태로 일반 또는 환자용 특수 의료 용도 식품에 활용이 가능함을 보여주었다. 본 연구에서는 생산비용이 감소된 홍잠의 가공 방법을 제안하며 이는 제품 생성의 단가를 낮추어 제품의 대중화와 양잠 농가의 연관산업 육성을 불러올 것으로 기대된다.
본 연구에서는 발효과정 중 누룩의 일반성분 및 효소 활성변화를 측정하고, 단백질의 분해정도와 밀 단백질에 민감한 환자의 혈청과 반응성을 관찰하였다. 누룩의 수분함량은 발효 1일 24.20%였으며 발효가 진행됨에 따라 미생물의 이용과 증발로 인해 감소되어 발효 15일에는 13.60%를 나타내었다. 누룩 발효 중 총당과 환원당의 함량은 발효시간이 경과함에 따라 증가하는 경향을 나타내었다. 누룩의 발효 초기 조단백질 함량은 1.58%였으나 발효가 진행됨에 따라 다소증가하여 발효 15일에는 2.05%로 나타났다. 또한 누룩의 조지방 함량은 발효 초기 1.32%였으며 발효 15일에는 2.24%로 다소 증가함을 나타내었다. ${\alpha}$-Amylase 활성은 발효 초기 1,416.67 U/g에서 발효 15일에는 2,833.00 U/g으로 급격히 증가하였으며, glucoamylase 활성은 발효 초기 497.90 U/g에서 발효 10일 경과 후 705.40 U/g으로 최대 활성을 보였으나 그 후 완만한 감소를 나타내었다. 누룩의 산성 protease 활성은 발효 초기에는 검출되지 않았으나 발효 10일에 75.00 U/g으로 급격히 증가하기 시작하여 발효 15일에는 327.00 U/g에 도달하였으며 중성 protease 활성도 발효 10일에 90.00 U/g으로 급격히 증가하기 시작하여 15일에는 354.00 U/g로 검출되었으며 이후에도 계속 증가하였다. 반면에 알칼리성 protease 활성은 검출되지 않았다. 발효가 진행됨에 따라 누룩 중 고분자 단백질이 각종 미생물에 의해 분해되어 저분자의 펩타이드 밴드가 생성되었으며 밀 민감성 환자의 혈청과 반응하는 밴드도 점차 감소하여 발효 15일에는 거의 검출되지 않았으므로 누룩 중 밀 단백질의 항원성이 감소하였음을 확인할 수 있었다. 따라서 본 연구를 통해 누룩은 영양학적 측면뿐만 아니라 효소학적 측면의 장점까지 겸비한 효율적인 한국 고유의 발효 식품용 스타터(starter)로써 전통주 제조에 필수적이며, 누룩의 고분자 단백질이 발효에 의해 저분자 펩타이드로 분해됨을 확인함으로써 밀 민감성 환자들을 위한 다양한 가공식품용 소재로 활용이 기대된다.
A total of 392 twenty eight week-old laying hens was used to study the effects of dietary inclusion of solvent-extracted palm kernel cake (PKC) (0%, 12.5% and 25%) and enzyme (mixture of mannanase, ${\alpha}$-galactosidase and protease) supplementation (0 kg/t, 1 kg/t and 2 kg/t) on the performance of laying hens. The levels of PKC did not significantly influence nitrogen corrected true metabolizable energy (TMEn) of the diets. Enzyme-supplemented PKC had significantly higher AME and TMEn values than PKC diets with no enzyme supplementation. Dietary inclusion of 12.5% and 25% PKC in the diets of laying hens did not adversely affect mean egg production or daily egg mass. However, layers consumed significantly more PKC-based diets and had significantly poorer feed conversion ratios (FCR) than controls. However, the feed intake and FCR of hens provided the 12.5% PKC-based diets with enzyme supplementation at 1 kg/t did not differ from the controls. Dietary inclusion of PKC or enzyme did not affect eggshell quality, but egg yolk colour was significantly paler when layers were fed the 25% PKC diet.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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