• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제1권4호
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• pp.288-292
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• 1991

The aim of the current study is to evaluate the effects of medium compositions on the production of protease inhibitor in Streptomyces sp. SMF13. The production of protease inhibitor was counter-currently linked to extra-cellular protease, which were regulated by the culture conditions. Nitrogen source was the most critical ingredient affecting the production of protease inhibitor and protease. Carbon source was an important factor to determine the culture pH which affected very clearly the formation of protease and protease inhibitor. Inorganic phosphate inhibited the protease inhibitor production which was linked to the cell growth rate, although the optimal conditions for the production of protease inhibitor were not favouring to the cell growth.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제8권2호
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• pp.77-85
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• 1980

Protease의 생산능이 우수한 Asp. oryzae KC-15를 선정하고 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Wheat bran medium에서의 최적배양시간은 acid protease와 neutral protease는 약 48시간, alkaline protease는 약 72시간이었고 본 균주가 생산하는 protease는 alkaline protease와 neutral pro-tease가 주체이며 acid protease는 극히 미약하였다. 2. Wheat bran medium 에 $Na_2$HPO$_4$, NaH$_2$PO$_4$, Glucose, rice powder 및 Na-glutamate의 첨가는 alkaline protease와 neutral psotease의 생산에, (NH$_4$)$_2$HPO$_4$, glucose 및 rice powder의 첨가는 acid protease의 생산에 효과적이었다. 3. 조효소의 특징(equation omitted) 4. 내열제로서 NaH$_2$PO$_4$가장 효과적이었으며 최적첨가량은 alkaline protease와 neutral protease 에 대하여는 10mg, acid protease에 대하여는 5mg 이었다. 5. 6$0^{\circ}C$ 이상에서는 NaH$_2$PO$_4$의 내열효과는 거의 인정할 수 없었다. 6. NaH$_2$PO$_4$10mg을 첨가하고 55$^{\circ}C$에서 30분간 처리하였을 때의 잔존활성은 alkaline protease는 약 58%, neutral protease는 약 57%, acid protease는 약 55 %이었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제25권2호
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• pp.207-211
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• 1997

Media optimization for the production of thermostable protease specifically hydrolyzing defatted soybean meal (DSM) from Bacillus licheniformis NS70 was performed by two methods, one-at-a-time method and response surface methodology (RSM). The best carbon source and nitrogen source for the protease production were lactose and DSM, respectively. The maximum protease production estimated by RSM was 606 U/L at 1.11% lactose and 0.43% DSM, the value of which was nearly consistent to the experimental value of 599 U/L. Yeast extract suppressed the protease production. The medium pH was slightly increased at the beginning stage of fermentation, and it tended to decrease after 8 hours. The optimal pH for the protease production was 7.2 in the batch fermentation.

• 한국식품영양학회지
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• 제13권2호
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• pp.171-175
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• 2000

Microbial proteases have certain unique characteristics, and are now widely used in food, leather, detergent, and pharmaceutical industries. Thermophilic Actinomyces producing the protease was isolated from soil in Wonju city. This strain was able to grow and produce protease at the culture temperature of 50$^{\circ}C$. The maximum protease production was obtained when 0.5% soluble starch and 0.4% yeast extract were used as carbon and nitrogen source, respectively. The other culture condition for the maximal productivity of the protease was 0.1% K2HPO4, and 0.05% CaCl2 at initial pH 8.0 for 48 hours.

• 미생물학회지
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• 제18권2호
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• pp.51-58
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• 1980

Mutational experiments were performed to improved to improve the protease productivity of Aspergillus flavus KU 153, which is selected among the wild strains. A UV-induced mutant strain having high protease productivity was obtained by the use of the clear zone method as a simple criterion for a primary screening test. Neutral and alkaline protease activities of hte mutant strain were higher than 1.8 times, comopared with those of the parental strain, respectively, while in the case of acid protease, it was 2.7 times. The mutant strain selected was more powerful in the production of cellulase and amylase, as well s protease in wheat bran, compared with those of the parental strain. protease production of the parental strain has reached maximum level at 3 days culture, while alkaline nad neutral protease production of the mutantstrain has reached at 2 days culture. On the other hand, the mutant strain formed the spore slowly, compared with the parental strain. Column chromatography of the neutral protease on DEAE-Sephadex A-50 showed that the mutant strain was not induced the formation of another neutral protease isozyme, but induced the variation in the function of regulatory gene.

• 생명과학회지
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• 제31권8호
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• pp.761-770
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• 2021

본 연구에서는 반응표면분석법을 이용하여 전통발효식품인 막걸리로부터 분리한 Bacillus amyloliquefaciens SRCM115785 균주에 대하여 protease 생산량을 증가시키기 위한 배지의 최적 농도를 확립하고자 하였다. 선정한 11개의 배지 성분 중 각 성분이 protease 생산에 미치는 영향에 대한 분석을 위해 Plackett-Burman design (PBD)를 설계하여 통계분석한 결과 glucose, yeast extract, beef extract를 protease 생산 향상을 위한 요인으로 최종 선별하였다. 선별된 3개의 성분에 대해 protease 생산을 위한 각 성분별 최적 농도를 결정하기 위해 central composite design (CCD)분석을 설계하여 protease 최대 생산을 위한 각 배지조성별 농도는 glucose 6.75 g/l, yeast extract 12.42 g/l, beef extract 17.48 g/l로 예측되었다. ANOVA 분석을 통해 실험모델의 적합성을 증명하였고, 설계한 최적배지에서 반복실험을 진행하여 protease 생산량을 측정한 결과 예측값과 매우 유사한 값을 나타냄을 확인하였다. 최종적으로 일반 배지에 비해 137% 환이 증가하였으며, 추가로 정량 분석 결과 기존 25.72 U/ml 대비 59.28 U/ml로 230.47% 증가함을 확인하였다. 본 연구를 통해 protease 생산량 증가를 위한 배지 성분의 최적화를 확립하였고, 이를 바탕으로 산업용 효소로서 protease의 효율적인 활용방안에 대한 기초자료로서 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제32권5호
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• pp.12-19
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• 2004

본 연구는 표고버섯균의 액체배양을 통한 protease효소의 최적생산 조건을 찾고, 생산된 protease 의 효소적 특성을 구명하고자 실시하였다. Protease 대량생산을 위한 공사균으로서 표고버섯균(Lentinula edodes)을 사용하였으며, 최적생산 조건을 구명하기 위하여 생산기질의 조성, 배양조건, 배양기간 등을 검토하였다. 배지의 조성별 protease 생산성에 있어서는 밀기울+옥수수가루+물+옥수수기름(WB+CF+W+CO)조합이 84.8 U/g으로서 가장 높은 protease 생산성을 보여주었고, 콩가루와 소맥분조합의 protease 생산성이 매우 낮은 것을 알 수 있었다. Protease 생산을 위한 배양매체로서 acetate buffer에서는 전혀 protease의 생산이 되지 않았으며, pH 6.2의 이온교환수가 80.5 U/g 의 가장 높은 protease 생산성을 나타냈다 이온교환수를 pH 4.0으로 조절하였을 때 생산성은 62.3 U/g 으로 낮아졌다. 배양기간에 따른 protease 생산성은 배양시간이 경과됨에 따라 증가하였으며, 72시간 배양으로 90.6 U/g 의 최대값에 달하였고, 그 이후 점차 감소하는 경향으로 나타났다 Sephadex G-75 chromatography 로 측정한 생산된 protease 의 분자량은 약 45,000 이었다. Lentinula edodes를 이용하여 생산된 protease의 효소특성을 상이한 pH 및 온도의 조건에서 조사한 결과, 최적 pH는 4에서 나타났으며, 37℃(1 시간)에서 측정한 활성은 pH 4~6 범위에 있었다. Protease의 온도안정성을 조사한 결과 최적온도는 55℃에서 나타났으며, 30~60℃의 넓은 온도범위에서 안정함을 알 수 있어서 이 효소는 소화용 제제, 식품공업, 맥주제조업 및 가죽무두질 등 널리 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제28권5호
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• pp.1010-1016
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• 1999

Protease related mold was isolated and selected as a starter culture for commercial production of meju. Isolated microorganism was identified as Syncephalastrum racemosum PDA 132 2. To obtain basic data about protease for production of soybean peptides and application of the strain in meju fermentation, we extrated and purified protease and charateristics of the enzyme were investigated. The optimum condition for the production of enzyme was pH 4.0, 30oC, 5 days. The protease was purified 19.7 folds by gel filtration and ion exchange chromatography and specific activity was 12.4unit/mg. The purified enzyme was 34kDa in size, thiol protease(100% inhibited by PCMB), and was acidic protease(stable between pH 2.0~5.0). Vmax of the enzyme was 2.14 g/min which was lower(1/50) than that of by Asp. wentti and B. subtilis.

• KSBB Journal
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• 제4권2호
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• pp.128-133
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• 1989

미생물에 의한 단백질 분해 효소인 protease생산에 있어 탄소원과 질소원의 영향은 매우 중요한 것으로 알려져 있다. Bacillus licheniformis에 의한 protease생산에 있어서 탄소원과 질소원의 영향을 규명하기 위해서 제한배지를 사용하여 회분식 배양을 수행하였다. 탄소원의 농도가 높을수록 그리고 질소원의 농도가 높을수록 Bacillus licheniformis의 성장은 촉진되나 proteased의 생합성 비율은 감소됨을 알았다. 또한 회분식 배양 결과로부터 탄소원과 질소원의 영향을 고려한 수학적 모델식을 제안하였으며 제안된 수학적 모델식을 사용하여 탄소원과 질소원을 적절히 공급하므로서 protease의 생산성을 증대시킬 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제29권3호
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• pp.134-141
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• 2001

경기도 일대의 가금류 공장부근 토양로부터 단백질 분해활성이 높은 균주를 분리한 후 이것들 가운데 Keratinolytic protease 생산성이 우수한 균주는 KP-364를 선별하여 효소생산을 위한 최적 배양조건을 검토하였다. 선별된 KP-364 는 형태학적 생화학적 특성을 종합한 결과 Pseudomonas sp 로 동정되었으며 편의상 Pseudomonas sp. KP-364로 명명하였다. 효소생산을 위한 최적 배지조성은 Keratin 0.1% glucose 2.0% soybeam meal 0.5% NaNO3 0.5% KCI 0.2%이었고 초기 pH 6.5 배양온도 $37^{\circ}C$, 48시간진탕 배양할때 효소생산이 가장 우수하였으며 이때의 효소의 역가는 1,270 U/ml/hr이었다.