• 한국식품과학회지
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• 제20권3호
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• pp.338-343
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• 1988

분획(分劃)된 대두(大豆) 7S 및 11S 단백질(蛋白質)의 단백질분해효소(蛋白質分解酵素)(trypsin, alcalase 및 pronase)에 대한 반응성(反應性)을 동력학변수(動力學變數)인 Km 과 Vmax 및 가수분해도(加水分解度)(DH)를 측정(測定)하여 검토(檢討)하였으며 가수분해물의 전기영동분석(電氣泳動分析)을 실시하였다. 효소(酵素)의 대두단백질(大豆蛋白質)에 대한 친화력(親化力)은 대체로 가열처리(加熱處理)된 단백질(蛋白質)은 기질농도(基質濃度) 1.5(w/w) 이하(以下)에서 가수분해(加水分解)에 대하여 기질조해작용(基質阻害作用)을 보였다. 1시간(時間) 가수분해(加水分解)에 따라 alcalase에 의하여 가장 큰 가수분해도(加水分解度)가 얻어졌으며 7S 단백질(蛋白質)에 대하여 60% 및 11S 단백질(蛋白質)에 대하여 80%였다. Trypsin 은 가열처리(加熱處理)되지 않은 단백질(蛋白質)에는 11S 단백질(蛋白質)의 acidic subunit 이외에는 거의 작용(作用)하지 못했으며 alcalase는 특이적으로 2S 단백질(蛋白質)에 변화(變化)를 가져오는 것으로 전기영동분석(電氣泳動分析)에서 나타났다.

• 대한수의학회지
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• 제29권2호
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• pp.123-128
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• 1989

Demi-embryos were successfully produced by bisection of ICR mouse embryos at preimplantation stages. They were microsurgically bisected using a microsurgical blade attached to a micromanipulator after pretreatment with 0.5% pronase in PBS for two minutes or not. Embryos with softened zona pellucida were more easily bisected and less damaged than intact embryos. The highest success rate in bisection has been achieved by selecting blastocysts(94.1% in success rate with intact blastocysts and 100% in success rate with zona softened blastocysts). Demi-embryos without zona pellucida were cultured in D-PBS or M-16 medium at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ in air for 72 hours for 2-cell stage embryos, 48 hours for 4-to 8-cell stage embryos, 24 hours for morula stage embryos and 6~12 hours for blastocyst stage embryos. For the in vitro culture of 2-cell stage embryos, $100{\mu}M$ 2Na-EDTA was added to the media. M-16 medium was better for the in vitro development of mouse embryos than PBS, and PBS is not considered to be suitable for long-term culture of embryos, especially at early stage of cleavage. In M-16 medium, developing rate of demi-embryos of which pair underwent development to form eublastocysts was 15.8% at 2-cell stage, 16.8% at 4-cell stage, 38% at 8-cell stage, 89.6% at morula stage and 94.4% at blastocyst stage, respectively. The more rapid and efficient production of demi-embryos and higher viability after bisection can be expected by softening zona pellucida with pronase and by selecting morulae or blastocysts rather than embryos at early stage of cleavage.

• Applied Biological Chemistry
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• 제32권4호
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• pp.378-385
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• 1989

고추에서 추출한 수용성 조다당(CAP-0)에 높은 항보체 활성이 존재함을 발견하였으며, 활성은 pronase 처리에 의해 변하지 않았으나 periodate 산화에 의해 활성이 현저히 감소하였다. CAP-0는 cetyltrimethylammonium bromide 처리에 의해 4획분(CAP-1,2,3,4)으로 분리되었으며, CAP-1에서 가장 높은 황보체 활성이 나타났다. CAP-1은 음이온 교환 chromatography에 의해 활성과 수율이 높은 CAP-1-IV와 V로 분리되었으며, III은 수율은 높았으나 활성이 매우 낮았다. CAP-1-III와 IV는 gel 여과에 의해 고분자량 획분$(M.W.\;III_a\;70,000,\;IV_a\;195,000,\;V\;140,000)$과 저분자량 획분 $III_a,\;IV_b$으로 나뉘어졌다. 이 4획분과 V는 gel 여과와 전기영동상에서 순수하였으며 고분자량 획분에서 항보체 활성이 높았다.

• 한국유가공학회:학술대회논문집
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• 한국유가공기술과학회 1996년도 추계 제43회 유가공 심포지움
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• pp.18-29
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• 1996

1. CWPC중의 새로운 생리활성물질의 검색 Mouse 임파세포의 증식효과를 지표로 하는 면역기능을 검토하여 CWPC중의 면역 부활작용을 갖는 새로운 성분의 검색을 실시하였다. CWPC를 여러 가지 분획법으로 분획하여 mouse 임파세포의 증식효과를 지표로 면역 활성성분을 검색하였다. 그 결과 gel filtration, 음이온교환법을 사용하여 분획한 당을 다량 포함한 부분에 강한 면역부활담당세포에 대하여 증식활성을 나타내는 물질을 발견하였다. 이 물질은 SDS-PAGE상에서 분자량이 약 16kDa에 위치하여 Ca, P 및 당쇄를 포함한 물질이며, 이것을 GPP로 하였다. GPP에는 우유케이신의 trypsin분해물이며 Ca와 무기인을 풍부하게 포함하는 ${\beta}$-CPP와 유사한 phosphoserin 영역을 갖는 성분과 갖지 않는 성분의 2종류가 존재하며, 각각의 면역 부활활성이 인정되었다. 각 성분의 아미노산 분석, 당 분석의 결과에서 지금까지 보고된 우유중의 면역 담당세포에 대한 증식활성을 갖는 물질과는 상이한 성분인 것으로 밝혀졌다. 더욱이 이 활성물질 (GPP)은 PP cell에서도 동등한 활성이 있는 것으로 판단되었다. 이러한 결과를 종합하여 보면 CWPC중에서 지금까지 알려지지 않았던 새로운 면역 부활물질이 존재하며, 그 성분에는 CPP와 유사한 phophoserine 영역이 존재하는 성분이 포함되어 있고, N-글리코실 결합의 당쇄가 존재하는 것으로 시사되었다. 이 성분은 전신면역의 지표인 비장세포에 대해서만이 아니고, 장관면역계에 중요한 역할을 담당하는 PP cell에서도 활성이 있는 것으로 보아 전신 및 국부적인 면역기능의 부활성분으로서 응용의 가능성이 시사되었다. 2. GPP의 면역담당세포에 대한 증식활성의 메카니즘의 검토 CWPC중의 GPP의 면역담당세포증식활성의 메카니즘을 해명하기 위해 먼저 이 성분중의 어느 부분이 활성에 관여하는지를 pronase 분해 및 phophoserine 영역을 인식하는 항체를 사용하여 검토하였다. 그 결과 pronase 분해처리에서도 활성의 감소를 나타내지 않았으므로 이러한 활성에는 당이 필수 불가결하다는 점이 시사되었다. 또한 phosphoserine 영역을 인식하는 항체에 의해서도 활성은 감소하지 않는 것으로 보아 phosphoserine 영역이 세포증식활성에 관여하지 않는 것으로 판단되었다. 또한 분획한 면역담당세포에 대한 증식활성을 측정하는 것으로 이 성분의 표적면역담당세포를 동정하여, B세포에 대해서만 특이적으로 증식활성을 나타내는 것으로 밝혀졌다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제53권3호
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• pp.179-183
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• 2010

각종 버섯에서 항보체 활성균주를 선별하기 위해 보관균주 50여종과 임업협동조합에서 분양 받은 20여종의 균주를 대상으로 항보체 활성을 검색한 결과, 항보체 활성이 65.3%를 나타낸 상황버섯 (Phellinus linteus)을 선별하였다. 본 균주가 생산하는 항보체 활성의 본체를 파악하기 위해 pronase 처리와 periodate 산화를 행한 결과 pronase로 처리한 사료는 무처리군과 비교하여 차이가 없었던 반면 periodate로 산화시킨 시료는 항보체 활성이 크게 감소함에 따라 P. linteus가 생산하는 항보체 활성의 본체는 다당에 기인되는 것으로 추정되었다. 항보체 생산을 위한 최적 배양조건은 soluble starch 3.0%, peptone 0.3%, yeast extract 0.4%, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.1%, $K_2HPO_4$ 0.2%, 초기 pH 7.0, 배양 온도 $30^{\circ}C$ 및 교반속도 150rpm이었다. 상기의 최적 배양조건에서 jar fermentor로 18일 배양하였을 때 88%의 항보체 활성과 15mg/mL의 균사체 생육을 나타내었다.

• BMB Reports
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• 제34권3호
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• pp.219-224
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• 2001

To identify the antioxidative peptides in the gelatin hydrolysate of bovine skin, the gelatin was hydrolyzed with serial digestions in the order of Alcalase, pronase E, and collagenase using a three-step recycling membrane reactor. The second enzymatic hydrolysate (hydrolyzed with pronase E) was composed of peptides ranging from 1.5 to 4.5 kDa, and showed the highest antioxidative activity, as determined by the thiobarbituric acid method. Three different peptides were purified from the second hydrolysate using consecutive chromatographic methods. This included gel filtration on a Sephadex G-25 column, ion-exchange chromatography on a SP-Sephadex C-25 column, and high-performance liquid chromatography on an octadecylsilane chloride column. The isolated peptides were composed of 9 or 10 amino acid residues. They are: Gly-Glu-Hyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Ala-Hyp (PI), Gly-ProHyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Pro-Hyp-Gly (PII), and Gly-ProHyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Pro-Hyp (PIII), as characterized by Edman degradation and fast-atom bombardment mass spectrometry. The antioxidative activities of the purified peptides were measured using the thiobarbituric acid method, and the cell viability with a methylthiazol tetrazolium assay The results showed that PII had potent antioxidative activity on peroxidation of linoleic acid. Moreover, the cell viability of cultured liver cells was significantly enhanced by the addition of the peptide. These results suggest that the purified peptide, PII, from the gelatin hydrolysate of bovine skin is a natural antioxidant, which has potent antioxidative activity.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제18권3호
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• pp.354-357
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• 2005

The in vitro degradability of yeast and the effect of yeast on the in vitro degradability of forage may differ in terms of the specific yeast strains or their incubation conditions. Thus in experiment 1, two strains of sake yeast (strainK7 and strainK9) and one strain of bakers' yeast (KY5649) were incubated in an aerobic condition. In experiment 2, aerobically or anaero bically incubated K7 was used for investigating the in vitro degradability of yeast, the effect of yeast on the in vitro degradability of forage, and the degradability of yeast by pepsin and pronase treatment. The in vitrodegradability of bakers' yeast was significantly (p<0.05) higher than those of sake yeasts. The in vitro degradability of anaerobically incubated yeast was significantly (p<0.01) higher than that of aerobically incubated yeast. The degradability of bakers' yeast by pepsin treatment was significantly (p<0.01) higher than that of the sake yeasts. The degradability of bakers' yeast by pronase treatment was slightly higher than that of the two sake yeasts, while the degradability of anaerobically incubated yeast by both enzymes, respectively, was significantly (p<0.01) higher than that of aerobically incubated yeast. The degradability of forages was increased significantly (p<0.05) by the addition of yeasts. The degradability of roughage by sake yeast tended to be higher than that by the bakers' yeast. The degradability of roughage was significantly (p<0.05) higher by anaerobically incubated yeast than by aerobically incubated yeast. Given the above results, it seems that in vitro degradability of yeast and the magnitude of the increment of roughage degradation differ among the yeast strains and their incubation conditions.

• 한국식품영양학회지
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• 제10권3호
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• pp.375-381
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• 1997

식용버섯을 대상으로 항응고 활성을 검색한 결과 영지버섯 알칼리 추출물이 가장 높은 활성을 보였다. 영지버섯으로부터 추출한 조다당 획분인 GL-I은 1N NaOH로 8시간 추출물(GL-0)을 methanol 환류, 에탄올 침전을 거쳐 투석, 동결건조하여 조제하였다. 히-I 획분은 periodate 산화에 의해서는 활성이 크게 변하지만 pronase 소화시 활성의 변화가 거의 없는 것으로 보아 항응고 활성의 본체는 주로 당과 관계되는 것으로 추정된다. 히-I의 구성당은 glucose:galactose:xylose:mannose:arabinose가 19.3:3.0:2.3:1.3:1.0:0.3의 molar ratio로 구성되어 있다. GL-I 획분을 DEAE-Toyopearl 650C(GL-Ia$\longrightarrow$If)와 Sephadex G-100(GL-Ic-I$\longrightarrow$GL-Ic-II)을 이용하여 부분 정제하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제21권5호
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• pp.519-524
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• 1992

탈지유채박(Brassica napus var. Youngsan)으로부터 추출, 정제하여 얻어진 유채단백질을 가수분해하여 가수분해물의 이화학적 및 기능적 특성을 조사하였다. 가수분해물의 UN 및 고유형광 스펙트럼은 각각 274nm, 360nm에서 최대치를 나타내었다. 황색도는 약간 감소한 반면 표면 소수성은 약 4배 감소하였다. SDS-PAGE 분석 결과 상당부분이 1.4~$1.2{\times}10^4$ dalton의 분자량을 가진 band로 나타났으며, pH별 용해도는 산성부근에서 10~15% 정도 증가하였고, 수분 및 유흡수성, 거품 팽창성, 에멀젼 안정성은 증가한 반면 절대 점도, 열 및 칼슘 응고성, 거품 안정성, 에멀젼 활성지수는 감소하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권4호
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• pp.658-664
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• 2004

To find a new utilization of rice bran, nine higher fungi were examined for the production of exo-biopolymer with macrophage stimulating activity from rice bran. Among the exo-biopolymers produced from submerged cultures, Lentinus edodes showed the highest activity, followed by Grifola frondosa, Schizophyllum commune, and Coriolus versicolor. L. edodes also had the most potent macrophage stimulating activity in a liquid culture rather than in a solid culture. In order to improve rice bran utilization and the yield of exo-biopolymer with macrophage stimulating activity, the treatment of Rapidase effectively increased the macrophage stimulating activity (about 30% increase), whereas the other enzymes (Econase, Viscozyme, Ultraflo, Celluclast, and Thermylase) treatments did not increase the macrophage stimulating activity. Exo-biopolymer with macrophage stimulating activity from L. edodes contained mainly neutral sugars (58.7%) with considerable amounts of uronic acid (32.2%) and a small amount of proteins (9.1%). Component sugars of exo-biopolymer consisted of mainly arabinose, galactose, glucose, mannose, and xylose (0.95:0.81:0.96:1.00:0.39, respectively). When the exo-biopolymer was treated with $NaIO_4, NaClO_2$, and pronase, the $NaClO_2$ treatment and pronase digestion had little effect, whereas $NaIO_4$ oxidation significantly decreased the macrophage stimulating activity (47.6% reduction at $100\mug/ml$). Therefore, the carbohydrate moiety in exo-biopolymer from L. edodes plays an important role in the expression of the macrophage stimulating activity.