Ma, Eunsook;Jeong, Seon-Ju;Choi, Joon-Seok;Nguyen, Thi Ha;Jeong, Chul-Ho;Joo, Sang Hoon
Biomolecules & Therapeutics
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제27권1호
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pp.48-53
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2019
Reactive oxygen species (ROS) are widely generated in biological processes such as normal metabolism and response to xenobiotic exposure. While ROS can be beneficial or harmful to cells and tissues, generation of ROS by diverse anti-cancer drugs or phytochemicals plays an important role in the induction of apoptosis. We recently identified a derivative of naphthalene, MS-5, that induces apoptosis of an ovarian cell, CAOV-3. Interestingly, MS-5 induced apoptosis by down-regulating the ROS. Cell viability was evaluated by water-soluble tetrazolium salt (WST-1) assay. Apoptosis was evaluated by flow cytometry analysis. Intracellular ROS ($H_2O_2$), mitochondrial superoxide, mitochondrial membrane potential (MMP) and effect on cycle were determined by flow cytometry. Protein expression was assessed by western blotting. The level of ATP was measured using ATP Colorimetric/Fluorometric Assay kit. MS-5 inhibited growth of ovarian cancer cell lines, CAOV-3, in a concentration- and time-dependent manner. MS-5 also induced G1 cell cycle arrest in CAOV-3 cells, while MS-5 decreased intracellular ROS generation. In addition, cells treated with MS-5 showed the decrease in MMP and ATP production. In this study, we found that treatment with MS-5 in CAOV-3 cells induced apoptosis but decreased ROS level. We suspect that MS-5 might interfere with the minimum requirements of ROS for survival. These perturbations appear to be concentration-dependent, suggesting that MS-5 may induce apoptosis by interfering with ROS generation. We propose that MS-5 may be a potent therapeutic agent for inducing apoptosis in ovarian cancer cell through regulation of ROS.
Da Yoon, Yu;Sang-Hyon, Oh;In Sung, Kim;Gwang Il, Kim;Jeong A, Kim;Yang Soo, Moon;Jae Cheol, Jang;Sang Suk, Lee;Jong Hyun, Jung;Hwa Chun, Park;Kwang Keun, Cho
Animal Bioscience
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제36권1호
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pp.156-166
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2023
Objective: In this study, we investigated the effects of Rubus coreanus-derived lactic acid bacteria (LAB) fermented feed (RC-LAB fermented feed) and three types of LAB (Lactobacillus plantarum, Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium animalis) on the expression of transcription factors and cytokines in Th1, Th2, Th17, and Treg cells in the intestinal lymph nodes and spleens of rats. In addition, the effect on intestinal microbiota composition and body weight was investigated. Methods: Five-week-old male rats were assigned to five treatments and eight replicates. The expression of transcription factors and cytokines of Th1, Th2, Th17, and Treg cells in the intestinal lymph nodes and spleens was analyzed using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction assays. Intestinal tract microbiota compositions were analyzed by next-generation sequencing and quantitative polymerase chain reaction assays. Results: RC-LAB fermented feed and three types of LAB increased the expression of transcription factors and cytokines in Th1, Treg cells and Galectin-9, but decreased in Th2 and Th17 cells. In addition, the intestinal microbiota composition changed, the body weight and Firmicutes to Bacteroidetes (F/B) ratio decreased, and the relative abundance of LAB increased. Conclusion: LAB fermented feed and three types of LAB showed an immune modulation effect by inducing T cell polarization and increased LAB in the intestinal microbiota.
Lactiplantibacillus plantarum DSR330 (DSR330) has been examined for its antimicrobials production and probiotics. In this study, the hepatoprotective effects of DSR330 were examined against nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) in a high-fat diet (HFD)-fed C57BL/6 mouse model. To induce the development of fatty liver, a HFD was administered for five weeks, and then silymarin (positive control) or DSR330 (108 or 109 CFU/day) was administered along with the HFD for seven weeks. DSR330 significantly decreased body weight and altered serum and hepatic lipid profiles, including a reduction in triglyceride, total cholesterol, and low-density lipoprotein cholesterol levels compared to those in the HFD group. DSR330 significantly alleviated HFD-related hepatic injury by inducing morphological changes and reducing the levels of biomarkers, including AST, ALT, and ALP. Additionally, DSR330 alleviated the expression of SREBP-1c, ACC1, FAS, ACO, PPARα, and CPT-1 in liver cells. Insulin and leptin levels were decreased by DSR330 compared to those observed in the HFD group. However, adiponectin levels were increased, similar to those observed in the ND group. These results demonstrate that L. plantarum DSR330 inhibited HFD-induced hepatic steatosis in mice with NAFLD by modulating various signaling pathways. Hence, the use of probiotics can lead to hepatoprotective effects.
Follicle-stimulating hormone (FSH) is a pituitary glycoprotein hormone that is encoded by separate alpha- and betasubunit genes. It plays a key role in stimulating and regulating ovarian follicular development and egg production in chicken. FSH signal transduction is mediated by the FSH receptor (FSHR) that exclusively interacts with the beta-subunit of FSH, but characterization of prokaryotic expression of the FSHb gene and its effect on the expression of the FSHR gene in local chickens have received very little attention. In the current study, the cDNA fragment of the FSHb gene from Dagu chicken was amplified using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), and inserted into the pET-28a (+) vector to construct the pET-28a-FSHb plasmid. After expression of the plasmid in E. coli BL21 (DE3) under inducing conditions, the recombination protein, $FSH{\beta}$ subunit, was purified and injected into the experimental hens and the effect on the mRNA expression levels of the FSHR gene was investigated. Sequence comparison showed that the coding region of the FSHb gene in the local chicken shared 99%-100% homology to published nucleotides in chickens; only one synonymous nucleotide substitution was detected in the region. The encoded amino acids were completely identical with the reported sequence, which confirmed that the sequences of the chicken FSHb gene and the peptides of the $FSH{\beta}$ subunit are highly conserved. This may be due to the critical role of the normal function of the FSHb gene in hormonal specificity and regulation of reproduction. The results of gene expression revealed that a recombinant protein with a molecular weight of about 19 kDa was efficiently expressed and it was identified by Western blotting analysis. After administration of the purified $FSH{\beta}$ protein, significantly higher expression levels were demonstrated in uterus, ovary and oviduct samples (p<0.05). These observations suggested that the expressed $FSH{\beta}$ protein possesses biological activity, and has a potential role in regulation of reproductive physiology in chickens.
Objectives: Benign prostatic hyperplasia (BPH) is a progressive pathological condition characterized by excessive proliferation of the prostate. In this study, we evaluated the effect of Corni Fructus water extract (CF) on the promotion of prostate cell proliferation by dihydrotestosterone (DHT). Methods: The effect of CF on the proliferation of LNCaP prostate cells was evaluated, and DHT was treated to induce an in vitro BPH model. To study the mechanism of inhibition of cell proliferation and BPH by CF, changes in the expression of key factors related to cell cycle and BPH were investigated. We further investigated the effect on the production of reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory efficacy of CF. Results: Inhibition of LNCaP cell proliferation by CF was associated with decreased expression of cyclin D1 and cyclin A and increased expression of cyclin-dependent kinase inhibitor p21. CF also suppressed expression of BPH inducing factors such as 5α-reductase type 2 and androgen receptor (AR) as well as prostate specific antigen (PSA). Furthermore, CF significantly blocked DHT-induced LNCaP cell proliferation and effectively attenuated DHT-induced expression of BPH mediators and cyclins. In addition, CF inhibited DHT-induced oxidative and inflammatory reactions by inhibiting production of ROS and NO. Conclusion: Our results demonstrated that CF probably acted as 5α-reductase type 2 inhibitor, preventing the 5α-reductase type 2-AR signaling pathway, thereby reducing the conversion of testosterone to DHT and the expression of PSA, which is at least correlated with the antioxidant and anti-inflammatory activities of CF.
제주조릿대(Sasa quelpaertensis Nakai)는 한라산에 넓게 분포되어 자생하는 식물로 최근 연구에서 항염증, 항당뇨, 항산화, 항암 효능을 가지는 것으로 알려져 있으나 대장암에서의 항암 효능 및 그에 따른 mechanism에 대해서는 명확히 밝혀지지 않았다. 본 연구에서는 인간 대장암 HT-29 세포를 대상으로 제주조릿대에 의한 항암작용과 기전에 대해 조사하였다. 제주조릿대에 의한 HT-29 세포의 증식 억제가 apoptosis 유도와 연관성이 있음을 DNA fragmentation와 flow cytometry 분석에 의한 sub-G1기의 세포빈도의 증가로 확인하였다. 제주조릿대에 의한 apoptosis 유발은 HT-29 세포의 S arrest 현상을 동반하였을 뿐만 아니라 발생한 산화질소의 증가와 anti-apoptotic factor인 IAP family (survivin, XIAP, cIAP-1, cIAP-2) 발현이 감소함으로써 촉진되었음을 확인할 수 있었다. 이러한 결과들은 제주조릿대가 대장암에 대한 치료제로서의 사용 가능성을 확인할 수 있었지만 이를 입증하기 위해서는 더 자세한 항암기전에 관한 연구가 진행되어야 한다고 사료된다.
본 연구는 동충하초(Cordyces militaris) 유래의 기능성 물질인 코디세핀의 면역활성을 검증하기 위하여 C57BL6 마우스 복강 대식세포를 이용하여 코디세핀이 대식세포의 활성화에 미치는 영향에 대하여 시험하였다. 그 결과 LPS에 의해 유도된 마우스 복강세포는 코디세핀의 작용에 의해 IL-$1{\beta}$, IL-12, TNF-${\alpha}$의 염증성 사이토카인의 생성이 증대되어 초기 염증매개 반응을 유도하여 선천면역반응의 활성화와 그리고 면역작용에 있어 후기 적응면역의 전환으로의 T 림프구의 활성화가 예상된다. 또한 IL-6의 생성증대로 활성화된 T 림프구에 의해 B 림프구의 항체생성반응을 매개하는 면역반응도 상승할 것으로 사료된다. 그리고 대식세포에 의한 염증반응에서 염증매개인자인 NO와 $H_2O_2$의 생성을 증대시킴에 따라 대식세포의 독성작용을 활성화시켜 염증반응을 효과적으로 유도할 것으로 보이며, 또한 $H_2O_2$의 후기 생성을 저해하였는데 이는 염증반응에 유도될 수 있는 세포의 손상으로부터 세포를 보호할 수 있을 것으로 사료된다. 따라서 코디세핀은 외부인자로부터 염증매개성 면역반응의 증강작용을 나타내는 것으로 사료된다.
Embryos formed in vivo were collected from 171 donors housed in Chung Cheong Buk-Do Institute of Livestock and Veterinary Research of the Chungbuk community during the years 2009~2012. We evaluated annual embryo collection, effect of follicle stimulating hormone (FSH), controlled internal drug release (CIDR) and prostaglandin (PG) administration to the donor for superovulation and controlling the estrus cycle, seasonal effects of embryo collection and compared the number of embryos recovered as per the collection days and pregnancy rate. In all, 1,243 embryos were collected from 118 donors with an average of $7.31{\pm}5.35$ embryos per donor, out of which 69.4% were transferable. Dosages of FSH required for inducing superovulation in various donors were compared. Average number of embryos collected from donors administered with 30 AU of FSH ($7.13{\pm}5.74$ per donor) was not significantly different from that of donors who were given an injection of 24 AU of FSH ($7.53{\pm}4.91$ per donor). However, the percentage of transferable embryos in the 30AU FSH-administered group (63.2 %, 449 of 711) was higher than that in the 24AU FSH-administered group (77.8%, 414 of 532). In the group of donors under a natural estrus cycle, the FSH dose administered did not influence the number of transferable embryos produced ($7.49{\pm}6.25$ per donor for 30 AU of FSH vs $7.49{\pm}4.92$ per donor for 24 AU of FSH). However, in donors administered with CIDR and PG for controlling the estrus cycle, the FSH dose affected the average number of transferable embryos collected ($4.25{\pm}2.87$ per donor for 30 AU of FSH vs $8.50{\pm}6.36$ per donor for 24 AU of FSH). We collected embryos from donors 6, 7 or 8 days after artificial insemination (AI). Results showed that the percentage of transferable embryos among those collected 8 days after AI was significantly higher than that among embryos collected 6 or 7 days after AI. Seasonal variations did not affect number of recovered embryos and pregnancy rates in natural estrus cycle and CIDR treatment groups (48.28% and 42.55%) but higher than pregnancy rate of frozen embryos (19.63%). These results indicated that administration of FSH beyond a threshold dose (at least 24 AU) has no beneficial effect on the production embryos and that collection of embryos 7~8 days after AI is optimal for embryo recovery. CIDR treatment induced superovulation in short term and had no influence on the natural estrus cycle. Finally, although good-quality embryos were transferred, freezing significantly reduced the pregnancy rates after transfer.
두릅나무는 두릅나무과에 속하는 낙엽활엽관목으로 전국에서 재배되고 있는 고소득 작목이다. 재배의 효율성 제고 및 소득 증대를 위하여 두릅나무의 새순 수확 후 전정 시기 및 연차별 전정에 따른 생산성을 분석하였다. 두릅나무 새순 수확 직후 6일 뒤부터 2주 간격으로 5회 전정하여 최적 시기를 판단하였다. 또한 전정 효과를 규명하기 위하여 정식 후 1년 차에 지상에서 30 cm 높이로 전정하였다. 정식 후 2년 차부터 전년도 발생한 가지를 10 cm 남기고 전정하였으며, 연차별 새순 및 가지 발생 특성을 비교하였다. 그 결과 새순 수확 종료 후 6일이 지난 뒤 처음 전정한 두릅나무의 가지 수가 다른 시기보다 1.3-2.1배 많았다. 새순 특성 또한 다른 시기보다 1.2-1.7배 우수하였으며, 전정이 빠를수록 품질이 좋은 많은 양의 새순을 수확할 수 있었다. 연차별 두릅나무의 전정을 통하여 정식 후 2년 차부터 고품질의 새순(직경 약 1.5 cm, 길이 약 16 cm)을 생산할 수 있었으며, 새순 수확이 가능한 가지 발생을 유도하여 생산성을 높일 수 있었다. 또한, 연차별 전정을 통하여 새순 수확이 쉬운 150 cm 정도의 수고를 유지 시킬 수 있었다. 그 결과 두릅나무의 전정 작업은 새순 수확 후 6일 전후로 빠른 시기에 시행하는 것이 효율적이다. 또한 전정하게 되면 매년 균일한 품질의 새순을 생산할 수 있고, 본당 수확량을 증가시킬 수 있다.
비타민 D는 주로 자외선에 의해 피부에서 만들어지는 지용성 비타민이다. 멜라토닌과 함께 대표적인 '크로노바이오틱(chronobiotic)' 물질로써 피부가 낮과 밤을 구분하는데 중요한 역할을 한다. 하지만 비타민 D는 조효소 역할을 하는 비타민이자 여러 종류의 유전자 발현을 조절하는 호르몬적 역할을 하기 때문에 화장품에 직접적으로 사용할 수 없다. 따라서 화장품에 사용할 수 있는 비타민 D 전구체인 프로 비타민 D (7-dehydrocholesterol)의 피부 효능에 대해서 알아보고자 하였다. 그 결과, 프로 비타민 D는 멜라닌 생성 효소인 타이로시네이즈(tyrosinase)의 단백질 발현을 억제하여 멜라닌 생성을 억제할 수 있음을 확인할 수 있었다. 이와 같은 피부톤 케어 효과는 인공 피부에서도 검증되었다. 또한 프로 비타민 D는 피부 염증을 일으키는 TNFa의 발현을 억제하고, 자외선에 의해 비타민 D로 전환되면 항균 펩타이드인 CAMP (LL-37)의 발현을 증가시킨다는 것이 확인되었다. 프로 비타민 D가 멜라닌 생성을 억제하는 것은 멜라닌이 자외선을 흡수하여 프로 비타민 D가 비타민 D로 전환되는 것을 억제하기 때문인 것으로 보인다. 따라서 화장품 제형에 프로 비타민 D를 활용한다면 피부톤을 조절하고 피부 면역을 증진시킴과 동시에 일상 생활 속에서 자외선에 의해 비타민 D 전환되면 다른 피부 효능, 즉 피부 항노화, 장벽 기능 향상 등도 기대할 수 있을 것으로 생각한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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