This study was perfomed to investigate the differentiation of rabbit blastocysts microinjected with testosterone solution. A total of 140 mixed breed does was superovulated, synchronized and hand mated. The eggs were flushed from uterine horns between 65 and 89 hrs after mating. Testosterone was dissolved in 95% ethanol and diluted with PBS at the ratio of 1: 99. Final concentration of testosterone was adjusted to 1 pg /ml. 6~8 bias-tocysts were microinjected with 1~10 p Q of the diluted testosterone solution, and tranfer-red into the uterine horns of the synchronized recipients. When 140 donor does were treat-ed with a single does of 200 IU PMSG in combination with 100 IU RCG 48 hrs apart, 134 of them(97%) showed standing estrus. Ovarian responses of 117 does were examined following mating and the rate of ovulation was 11.23 i 1.20. Ova were recovered from donors between 65 and 89 hrs after mating. Recovery rates of ova were 37.5% and 42.2% of recovered ova were blastocysts. A total of 106 blastsocysts were microinjected with testosterone solution and transferred into the uterine horns of 15 synchronized recipient does. One of the recipients was pregnant and delivered 7 baby rabbits. The external genitalia of the young rabbits appered to be the same appearance as the buck entierly.
This stduy was carried out to find a reliable method for the production of in vitro fertilized embryos having more excellent development capacity and freezability in the rabbit and cattle. The greatest number of rabbit oocytes was recovered 6hrs after HCG injection(P<0.05). The maturation rate in vitro was slightly higher in the oocytes(6-h-oocytes) from 6h than those (8-h-oocytes)from 8 hrs after HCG injection and the beneficial effect of FSH during oocyte maturation was significantly great in the oocytes from large follicles. The cleavage rate into 2-to-6-cell stage was not differ between the 6-h-oocytes and 8h-oocytes, but the cleavage of these oocytes was greatly promoted by FSH addition to maturation medium and the cleavge of 8-h-oocytes matured without FSH was significantly low. The embryo development into 16-cell to morula was not promoted by the co-culture with rabbit oviduct epithelial cells. The freezability by embryo stages was ovidusly high at 4-cell and morula stage in 6-h-oocytes and the viability of 16-cell embryos from 8h-oocytes was similar to that of morula stage. The implantation sites after surgical tranfer of fresh rabbit embryos were not implanted. In bovine experiment, the in vitro development into 16-cell and morula after in vitro maturation and fertilization in the follicular oocytes was slightly improved by the co-culture with granulosa cells compared to that with oviduct epithelial cells and the frozen-thawed viability rate of these embryos ranged from 14 to 40%. The excellent fresh embryos were transferred nonsurgically to 6 recipients, but were not pregnant.
The effect of exogenous gonadotrophins on superovulation in rabbits was examined. One hundred and sixteen sexually mature California, Chinchilla and New Zealand White rabbits were randomly allocated to control (100 IU hCG), PMSG-treated (100 IU HCG following 150 IU PMSG) and FSH-treated groups (0.3 mg/head /12 h for 3 days followed by 100 IU hCG). All does were mated after hCG injection and were sacrificed or laparotomized within 1 to 4 days postcoitus for counting the number of ovulation points. The number of ovulations was higher in FSH-treated animals than in the control and PMSG-treated groups (37.2 vs. 10.4 and 14.5, p<0.05). Follicle haemorrhagicum was observed in many cases in the PMSG-treated group. No significant difference in ovulation number was observed between left and right ovaries regardless of gonadotropin treatment. In another experiment, 2-cell stage embryos were collected at 26 h postmating and blastomeres were separated by mechanical pipetting or gentle pressure with a fine glass needle. Aggregated or chimeric embryos were produced from two single blastomeres from two breeds, New Zealand White and Chinchlla, with different coat colors. All the embryos were cultured in Ham's F-10 medium supplemented with 1.5% BSA (bovine serum albumin fraction V) and 10% PRS (pregnant rabbit serum), and incubated in a humidified atmosphere with 5% $CO_2$ at $38^{\circ}C$. After development to morula or early blastocyst, the embryos were transferred into the oviducts of recipient does. Results showed that 7 out of 10 does (70%) receiving intact embryos (control) became pregnant and 41 kits were delivered. However, no pregnancy was obtained from the recipient of either denuded demi- or aggregated embryos. It is suggested that embryos without zona pellucida could not develop to term in rabbits.
This study was carried out to determine effectively the sex of rabbit embryos using H-Y antiserum. H-Y antiserum was obtained from inbred SD strain female rat which was immunized by injection of testis cell of inbred SD strain male rate into its spleen. The titer of antiserum was identified by sperm cytotoxicity test and culture of rabbit embryos with antiserum. The developed or undeveloped embryos were separated by exposure the embryos to the antiserum with H-Y antibody. Developed embryo were transferred to the recipients and sex of offspring were examined. 1. In the sperm cytotoxicity test, the rate of dead sperm showed no difference between two antisera from spleen and testis cell as antigens. It is confirmed that H-Y antibody in antiserum was absorbed by H-Y antigen in male rat spleen cells. 2. When rabbit morulae were exposed to antiserum and complement, the rate of embryos developed or arrested was 51 and 49% respectively and the rate was closely same as natural sex ratio of 50:50%. 3. When rabbit morulae were cultured for 12h in the medium containing antiserum produced by antigen of testis cell, the rate of embryos developed or arrested was 48 and 52% respectively and the rate was closely same as natural sex ratio of 50:50%. 4. Eighty rabbit embryos which were not affected by H-Y antiserum were transferred to four recipients. Two recipients were pregnant and born 13 pups among which 2 (14%) were male and 11 (86%) were female. In conclusion, existence of H-Y antibody in the serum from female rat immunized by injecting testis cell from newborn male rat to the spleen of the female rat was confirmed. When rabbitmorulae were exposed to H-Y antiserum and complement, about a half of embryos were developed to blastocysts. When the rabbit embryos not affected by H-Y antiserum were transferred, the rate of female offspring was 86%. Therefore, it was identified that most of embryos which were not affected by H-Y antiserum were female.
Zea mays Linne belonging to Graminae family has been ordinarily made use of foods and fodder. Maydis Stigma, the stigma of maize, has been discarded without any special application with the exception of being applied as diuretic in the sphere of Chinese medicine, moreover, the pharmacological research toward Maydis Stigma as a medical herb has not been regretfully undertaken at all. The authors hereby paid attention to this point of view and made experiment to find out whether the water extract of Maydis Stigma might possess some pharmacological effect on the motility of the isolated rabbit uterus. The experiment was performed making the use of several agents related to the uterine motility such as acetylcholine, pilocarpine, epinephrine, atropine, barium chloride, quinine sulfate and oxytocin. The motility of the isolated rabbit uterus in Tyrode' solution was recorded with the electric kymograph according to Magnus method. The results of the experiment are as follows. 1. The motility of the isolated pregnant and nonpregnant rabbit uterus represents the tendency of gradual contractility in proportion to the concentration of ZW $10^{-4}$, $5{\times}10^{-4}$ and $10^{-3}$. 2. The uterine contractile effect of ZW $10^{-3}$ probably seems to antagonize the effect of epinephrine $10^{-6}$. 3. ZW $10^{-3}$ does not seem to have the significance with barium chloride, quinine sulfate and oxytocin respectively.
Thirty mature pregnant ewes of the Phan Rang breed with an initial live weight of 30 to 45 kg were used to compare the effects of three different diets in late pregnancy on ewe and lamb performance. All diets contained 20% of whole sugar cane, 16% rice bran, 26% cassava root and 6% molasses urea block. The remaining 32% of dry matter consisted of Jackfruit (JF diet), 16% each of Jackfruit and Cassava foliage (JF+CS diet) or Jackfruit and Flemingia foliage (JF+FM diet). The diets were fed at 3.5% of actual BW of the individual animal. The foliages were offered at 120% of the amount decided in the diets of the requirements. The JF+CS diet resulted in significantly higher feed intake than the JF diet, and also a higher feed intake than the JF+FM diet, but this difference was not significant. The ewe weight changes during the last 8 weeks of pregnancy, or from start to 24 h after lambing, were significantly different. The highest weight gain was obtained from the ewes fed the JF+CS diet. Diets had no effect on weight changes of ewes during 3 weeks after lambing but a significant effect on the litter birth weight, with the JF+CS diet giving the highest litter birth weight. There was, however, no effect on the litter weight at 21 days or litter growth rate from birth to 21 days due to the experimental diets.
As a preliminary experiment to establish the process of embryo transfer in rabbit, present sutdies were carried out with 75 mature Japanese of ovary to pregnant mare's serum gonadotropin(PMSG) and human chorionic gonadotropin(hCG) and collection rate of embryos at various times after hCG injection. Female rabbits were superovulated using 50∼100IU hCG or 75∼100IU PMSG and 50∼751IU hCG injected 83hrs apart. The results obtained were as follows: 1. The average number of growth follicles obtained from all of rabbits treated with hCG or PMSG-hCG was 28.1. PMSG-hCG treatment group (30.9) was clearly increased more than hCG treatment group (16.7). 2. In ovulation score, PMSG-hCG treatment group (21.0) was increased more than hCG treatment group (7.9), showing the same trends in the growth of follicles. 3. The ovulation rate per follicles developed was higher in the rabbits treated with 100 IU PMSG and 75 IU hCG (18.9%) than that from the other groups. 4. The oviduct score (72.9%) was inclined to higher than that from uteri (57.1%) in score of embryo collection.
The cactus family Cactaceae, numbering about 1,500 species, is a fleshy-stemmed perennial plant which is principally distributed in the south and north America. On the other hand, the cactus plant is presumed to be introduced into Korea in 1912-1945, thereafter it has been cultivated merely in favor of ornamentation with the exception of being occasionally used as medication among laymen. Opuntia elata which belongs to Opuntia genus, the Cactaceae family is one of the cacti being cultivated a great deal in Korea. Cho et. al. reported in 1974 that Opuntia dilenii manifested the cardiac inhibitory effect and oxytocic effect, and its mechanism might be partially due to the direct action. Besides this, there are few reports on the pharmacological research concerning Opuntia genus to be demonstrated in Korea. However, some other cacti have the remarkable pharmacological effects; the active ingredients, mescaline, anhalamine, anhalanine, etc. from Peyote cactus (Lophophora williamsii) belonging to Lophophora genus have the psychotomimetic and sympathomimetic effects, and the cardioactive glycosides from Cactus Grandifolius (Selenicereus grandiflorus) belonging to Cereus genus have the cardioactive and diuretic effects. The authors hereby inquired into this study to find out the propriety of the pharmacological properties of the ethanol extract of Opuntia elata (EX) on the heart, blood pressure, respiration, intestine and uterus in the experimental animals. The results of the experiment were as follows: 1. Administration of EX manifested the cardiac inhibitory effect caused by the negative inotropic action in the isolated heart of frog, and the pretreatment of atropine did not affect the inhibitory effect produced by EX. 2. Administration of EX manifested the transient hypotensive effect in the intact rabbit, and the pretreatment of atropine did not affect the hypotensive effect produced by EX. 3. Administration of the small dose of EX manifested no significant effect, but moderate dose or more the stimulating effect, and the large dose the asphyxia on the respiratory motility in the intact rabbit. 4. Administration of EX manifested the sustained augmentation of contractility in the excised duodenum of rabbit, and the pretreatment of atropine did not affect the stimulating effect produced by EX. 5. Administration of EX manifested the sustained augmentation of contractility in the excised pregnant uterus of rabbit, and the pretreatment of atropine and oxytocin did not affect the oxytocic effect produced by EX, but that of barium chloride more or less stimulated the oxytocic effect produced by EX.
The general pharmacological effects of a new anthracycline anticancer agent, DA-125 $[7-0-(2,\;6-dideoxy-2-fluoro-{\alpha}-L-talopyranosyl)-adriamycinone-14-{\beta}-alaninate{\cdot}HCI]$ were investigated in mice, rats, guinea pigs, rabbits and dogs. Intravenous administration of DA-125 presented no significant effects on the central and peripheral nervous systems of ICR mice except a decrease in the numbers of acetic acid-induced writhing response at a dose of 10 mg/kg. In anesthetized rats and dogs, DA-125 produced a transient depression of blood pressure and an increase in heart rate, but did not affect the peripheral blood flow in the isolated ear vessels of rabbits and the mechanical functions of the isolated hearts of guinea pigs. No significant effects were observed on the gastrointestinal functions and the contractilities of smooth muscle preparations obtained from guinea pig trachea, rabbit ileum, pregnant and non-pregnant uterus and vas deferens of rats. DA-125 Increased the contractility of the isolated ileum of guinea pigs in a dose range of $10^{-6}{\sim}10^{-9}g/ml$, and also increased, but weaker than adriamycin, the vascular permeability in rat skin. DA-125 had no effect on the kallikrein-induced increase in permeability and the permeability of the visceral organs. DA-125 did not adversely affect the liver function and the blood coagulation system, and did not induce hemolysis in vitro. It is concluded from the results that the general pharmachological effects of DA-125 are similar to or weaker than those of adriamycin, and that little adverse effects are anticipated with a therapeutic dose range.
본 실험에서는 가토에서 배반포가 자궁내막에 착상할 때, 모체의 면역기능의 변화를 알아보고, 착상시 관여하는 호르몬과 모체의 면역기능과의 연관성을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 임신 7일째 가토의 말초혈관 림프구에 concanavalin A를 처리하면, 임신하지 않은 가토의 림프구보다 훨씬 낮은 자극지수를 나타냄으로써 면역억제 현상이 나타나는 것을 관찰할 수 있었다. 2. 임신 7일 때의 혈청 progesterone농도인 11.56 ng/ml을 임신하지 않는 가토의 말초혈관 림프구에 처리하면, 억제현상을 나타내지 않았으나, Progesterone의 농도가 1000 ng/ml 이상에서는 농도에 비례하여 림프구의 활성도가 감소되었다. 3. 4.5 ng/ml${\sim}$4,500 ng/ml의 $PGF_{2{\alpha}}$는 concanavalin A처리시 림프구의 활성도에 별다른 영향을 끼치지 않았으나, PGE는 4.5 ng/ml${\sim}$4,500 ng/ml에서 농도에 비례하여 림프구의 활성도를 유의하게 감소시켰다. 그러나 임신 제 8일째의 말초혈관 림프구에 prostaglandin 합성 억제제인 indomethacin 0.1 또는 $1\;{\mu}g/ml$을 처리하면 억제되었던 림프구 활성도가 각각28%, 23% 증가되었다. 이상의 결과로 보아 토끼의 착상기간중 모체의 면역기능이 저하되며 PGE가 착상기간중 면역기능을 저하시키는 요소중 하나인 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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