2006년 9월 충청북도 농업기술원 내 백미속 약용작물, 큰조롱과 넓은잎 큰조롱 시험포장에서 바이러스병 조사를 수행하였다. 각 시험구별 바이러스 발병률은 20-80%의 범위였으며, 뿌리로 번식한 경우가 종자로 번식한 경우보다 발병률이 두 배 정도로 높았다. 두 약용식물에서는 모자이크, 얼룩, 괴저, 황화, 퇴록반점, 기형 등 매우다양한 바이러스 병징이 관찰되었다. 전자현미경 분석결과 대부분의 시료에서 390-730 nm 길이의 사상형 입자가 관찰되었으며, 바이러스 병징을 보인 시료 중 일부에서는 바이러스 입자가 관찰되지 않은 것도 있었다. 전형적인 모자이크 증상을 보이는 큰조롱 잎을 순화하여 약 430-845 nm 길이의 사상형 입자를 얻을 수 있었다. 순화한 바이러스로부터 분리된 RNA를 이용하여 염기서열 분석을 실시한 결과 포티바이러스속 P3과 외피단백질 유전자의염기서열을 얻을 수 있었으며, BLAST 분석결과 포티바이러스속 바이러스들과 각각 약 26-38%와 62-72% 상동성을 나타내었다. 순화한 바이러스의 SDS-PAGE 분석에서 염기서열 분석으로 예상되는 약 30kDa의 외피단백질을 확인하였다. 7과 21종의 지표식물을 사용한 생물검정에서 Chenopodium quinoa에서 접종엽의 국부병반과 함께 전신적 황화반점 증상을 나타냈으며, 나머지 지표식물에서는 감염되지 않았다. 채집된 큰조롱과 넓은잎 큰조롱시료를 특이 프라이머를 이용한 RT-PCR 방법으로 진단한 결과 병징을 보인 모든 시료에서 양성반응이 나타났으며, 병징을 보이지 않는 7점 중 5점의 시료에서 양성반응을 나타내었다. 이러한 결과들을 종합해 볼 때 본 바이러스는 포티바이러스속의 새로운 종으로 확인되었으며, 우리나라가 원산지인 큰조롱에서 최초로 발견된 바이러스인 점에서 Keunjorong mosaic virus(KjMV)로 명명하고자 한다.
Studies with the transmission electron microscope were used to detect and attempt to identify viruses infecting sweetpotato (Ipomoea batatas) and other Ipomoea species. Flexuous-rods, short curved-rods, and spherical virus-like particles were observed in cells of symptomatic plants. Also, various cytopathic changes such as crystals, vesicles, fibril structures, and cylindrical inclusions were observed. The present study showed that some of these cytopathic changes were associated with some viral groups, which might be helpful in diagnosis.
One of the major aims in studying plant viruses is to minimise the development of symptoms in infected plants. With the advent of in vitro transcript mediated research on plant viruses, substantial progress has been made. This article describes the biology of a plant specific RNA virus, Johnsongrass mosaic virus (JGMV), important to Australian sorghum and corn agriculture and, in particular, at a molecular level which of the RNA sequences in its genome that make it possible for the virus to move from cell to cell, and eventually spread systemically throughout the entire plant. The JGMV has caused considerable yield losses in maize and sorghum over a number of years in Australia. Incidents where 100% of the crop has been infected are on record. The use of this virus is convenient under laboratory conditions because it can be readily transmitted by mechanical inoculation with infected leaf sap, which obviates the need for maintaining aphid colonies. The JGMV is a single stranded positive sense RNA virus.
Mixed infections of two economically important viruses, Turnip mosaic virus(TuMV) in the family Potyviridae and Ribgrass mosaic virus(RMV) in the genus Tobamo-virus, were studied ultrastructurally on oriental cabbage. TuMV-ACl8 (alpine isolate in Korea) induced chlorotic spots on inoculated leaves of both ‘SSD63’ inbred line known as susceptible to TuMV, and ‘Tambok’ commercial cultivar, known as resistant to the virus, in the early stages of infection. TuMV-C5 (Taiwan isolate) caused severe mosaic and malformation on the upper leaves of ‘SSD63’, and necrotic spots in both inoculated and upper leaves of ‘Tambok’. RMV-CA1 (oriental cabbage isolate from alpine in Korea) induced vein chlorosis, leaf malformation, and midrib necrotic streak in the upper leaves of both ‘SSD63’ and ‘Tambok’. Both oriental cabbages infected with a combination of TuMV-ACl8 and RMV-CA1 showed synergistic symptoms of severe yellowing, severe mosaic, and necrotic spot or vein necrosis on their leaves. A combination of TuMV-C5 and RMV-CA1 produced synergistic symptoms only in ‘SSD63’. In ‘Tambok’ infected with the combination of TuMV-C5 and RMV-CA1, the number of necrotic spots on the inoculated leaves was one half lesser than that on singly infected with TuMV-C5. A few necrotic spots progressed systemically. In cells infected with a combination of TuMV-ACl8 and RMV-CA1 or TuMV-C5 and RMV-CA1, the particles of the two viruses made nonagon-like rings(NLR); one TuMV particle was surrounded loosely by nine RMV particles. Two unrelated viruses of TuMV and RMV were compacted in the central part of the spiral aggregates(SA) that was induced strikingly in cells by the mixed infections. The SA showed NLR in its center of the cross-sectioned side. Many particles of RMV of Tobamovirus were closely associated with Potyvirus-characteristic cylindrical inclusions. The SAs in the mixed infections were formed easily by the Potyvirus of TuMV-ACl8 or -C5 isolates.
Soybean mosaic virus(SMV)는 potyvirus 속에 속하며, 모자이크, 괴사, 기형 등의 병징을 야기하고 국내에서는 11개 계통(G1 to G7, G5H, G6H, G7H, G7a)이 보고되어있다. Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification(RT-LAMP) 방법은 등온에서 유전자 증폭이 가능하게 하며, 이 방법은 PCR 과정이나 전기영동 없이도 바이러스에 감염된 식물을 검출할 수 있는 이점이 있다. RT-LAMP의 최적반응 조건은 $58^{\circ}C$, 60분으로 확인되었다. 특이성 검정을 위해 콩에서 발생하는 여러 바이러스들과 보유중인 SMV의 9 계통에서 그 특이성을 확인하였다. 그 결과 SMV에 대한 RT-LAMP primer들의 종 특이성이 확인되었으며, SMV의 계통들에 대해서도 적용이 가능한 것으로 확인되었다. 항온수조와 heating block과 같은 간편한 등온 장치에서 재현성을 확인하기 위해 Thermocycler 기기와 비교하여 증폭 여부를 확인한 결과 반응의 차이는 나타나지 않았다. RTLAMP 반응 이후, 반응물을 전기영동과 SYBR Green I을 이용하여 자연광과 UV광에서 증폭 여부를 확인하였다. 그 결과 전기 영동, 자연광, portable UV light와 UV transilluminator에서 모두 반응이 확인되었다.
Kim, Jeong-Soo;Cho, Jeom-Deog;Park, Hong-Soo;Kim, Kook-Hyung;Kim, Kyung-Soo
The Plant Pathology Journal
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제19권2호
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pp.111-116
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2003
Turnip mosaic Potyvirus (TuMV) and Ribgrass mosaic Tobamovirus (RMV) are major viruses infecting crucifer crops in Korea. RMV-FG22 was isolated from oriental cabbage. TuMV isolates were TuMV-CA7 from oriental cabbage, TuMV-TU and TuMV-TU2 from turnip, TuMV-RA from rape, TuMV-ST from stock, and TuMV-R9 from radish. The six isolates of TuMV were classified by symptom expression in inbred lines of crucifers. TuMV-CA7 and TuMV-TU isolates infected mostly oriental cabbages; TuMV-ST, TuMV-TU2, and TuMV-R9 infected radishes; and TuMV-RA infected both oriental cabbages and radishes. Crops used in six combinations of mixed infections were 'Tambok' cultivar resistant to TuMV,'SSD63' susceptible inbred line of oriental cabbage, pure line of leaf mustard, and‘Daeburyungyeorum’cultivar of radish. External symptoms in 'Tambok' and radish by each of the six single infections of TuMV showed similar results by bioassay. Synergistic response of necrotic death occurred within 1 week after inoculation in all combinations mixed with TuMV and RMV-FG22 on leaf mustard. In oriental cabbage 'SSD63' , synergism of necrosis occurred in four TuMV isolates, but not in TuMV-ST and TuMV-R9. In oriental cabbage 'Tambok' , synergism was expressed only in two combinations of RMV-FG22+TuMV-CA7 and RMV-FG22+TuV-TU, but other combinations had the same symptoms produced by RM-FG22. In radish‘Daeburyungyeorum’, only mild mosaic symptoms were induced by combinations of RMV-FG22+TuMV-CA7, RMV-FG22+TuMV-TU, RMV-FG22+TuMV-RA, and RMV-FG22+TuMV-R9. Mosaic and severe mosaic were induced in combinations of RMV-FG22 +TuMV-TU2 and RMV-FG22+TuMV-ST, respectively.
Kim, Ok-Sun;Ueda, S;Ebihara, Y.;Uematsu, S.;Hanada, K.;Ohshima, K.;Iwanami, T.;Takanami, Y.;Choi, Jang-Kyung
한국식물병리학회:학술대회논문집
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한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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pp.142-143
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2003
Ammi majus (white lace flower, Unbelliferae) is an ornamental plant used for cut-flower arrangements worldwide. A potyvirus was isolated from its leaves with mosaic and chlorotic symptoms in the cultivated field of Chiba, Japan. Compared with Japanese homuort mosaic virus (JHMV) previously isolated from Cryptotaenia japonica, it showed similar characteristics in host reactions and molecular properties. The nucleotide sequences of coat protein and 3'- nontranslated region were highly homologous and shared 87% and 91% identities with those of JHMV, respectively. This virus was thus supposed to be an isolate of JHMV and designated as JHMV-Am. Phylogenetic tree was constructed using CP nucleotide sequences of the two isolates and other potyviruses previously reported. JHMV-Am and JHMV fell into a cluster with Korean strain of Zantedeschia mosaic virus (ZaMV-KR). However, low identity in amino acid sequences was found in the termini of CP genes between the two isolates of JHMV and ZaMV-KR.
A virus causing chlorotic ringspot, yellow mosaic and vein clearing symptoms was prevalent on mungbean plants around Taean, Korea. The isolate caused mosaic on Chenopodium quinoa, Nicotiana benthamiana, Phaseolus vulgaris and Vida laba but no symptoms on peanut plants. Inclusion bodies such as scroll, pinwheel and laminated aggregates induced by the virus in the host cells were similar to those produced by members of the Potyvirus subdivision III. Multiple alignment as well as cluster dendrograms of the 709 nucleotide region comprising part of the coat protein gene and 3'untranslated region (UTR) showed that the isolate belongs to the BCMV-PSt subgroup. Altogether, these results support the identification of the causal virus as peanut stripe strain of Bean common mosaic virus (BCMV-PSt).
PARK KWANG-SOOK;BAE YOUNG-JOO;JUNG EUN-JEONG;KANG SOON-JA
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권5호
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pp.1110-1114
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2005
Six viruses of the genera Carlavirus (Garlic mosaic virus, GarMV, and Garlic latent virus, GarLV), Allexivirus (Garlic virus X, GarV-X, and Garlic mite-borne filamentous virus, GarMbFV) and Potyvirus (Leek yellow stripe virus, LYSV, and Onion yellow dwarf virus, OYDV) from Korean garlic plants with mosaic symptoms were simultaneously detected by multiplex RT-PCR and subsequently sequenced. An immunocapture RT-PCR for the detection of GarLV, LYSV, and OYDV was also performed. The coat protein phylogenetic analysis of the garlic viruses showed that the Korean isolates were most closely related to the isolates from China, Japan, Brazil, and Argentina. This study is the first report for the differentiation of six garlic viruses in Korea by simultaneous detection using multiplex RT-PCR.
The tissue blot immunobinding assay (TBIA) is widely used for the detection and localization of plant viruses in various plant tissues. The basic experimental procedures of TBIA sampling and blotting were simplified using commercially available micropipette tips. This method was termed the ring-blot immunobinding assay (R-BIA), as the blot on the membrane forms a ring shape. The detection efficacy of R-BIA was tested for two chili pepper viruses, pepper mild mottle tobamovirus (PMMoV) and pepper mottle potyvirus (PepMoV), following the optimized serological procedures of TBIA (length of the incubation period and BSA concentration, and primary and secondary antibodies). Sensitivity of the R-BIA was about 1 ng/ml of purified PMMoV in pepper leaf sap from a healthy pepper plant. R-BIA also showed high specificity in the detection of PMMoV and PepMoV. Moreover, the modified sampling and blotting procedures were simpler and more reliable than other TBIA methods (such as whole-leaf blotting and crushed-leaf blotting), suggesting that the R-BIA may be used for medium- to large-scale detection of plant viruses in laboratories with minimal facilities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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