New types of cytoplasmic male sterility in Brassica species would be very useful for the production of F$_1$, hybrid seeds. Leaves and stems of rapid cycling stock of B.juncea (CrGC4-3) containing Anand CMS were used as experimental materials for plant regeneration from protoplast culture. Very high plant regeneration rate (85%) was found in the Kao & Michayluk medium supplemented with 2 mg/L zeatin, 0.5 mg/L BAP, and 1 mg/L NAA when only leaf, not stem, segments were cultured. Protoplasts were isolated from leaves using mixtures of enzymes (1% Cellulycin, 0.5% Macerozyme) in 0.4 M mannitol and 50 mM $CaCl_2$.$2H_2$O. Mcrocalli induced from protoplasts were transferred to the shoot regeneration medium containing 2 mg/L BAP, 2 mg/L zeatin, and 0.5 mg/L NAA. After 60 days of initial protoplast culture, regenerated plantlets were obtained, acclimatized, transplanted into the pots, and grown up to the flowering stage.
Potato late blight caused by Phytophthora infestans Cooke is one of the major diseases in the cultivation of potatoes in Korea. Effect of chitosan preparations (SH-1 and SH-2) was evaluated on the inhibition of mycelial growth of P. infestans, and protective activity using detached potato leaf assay both in vivo and in the field test. SH-1 and SH-2 were showed protective activity of young plant with control values more than 95% potato late blight by inoculation with pathogens under growth chamber conditions. Mycelial growth was inhibited the radial growth over 74% at a concentration of $300{\mu}g/ml$ of both SH-1 and SH-2. Spraying with SH-1 and SH-2 on the leaves for detached leaf assay reduced disease development. The content of total polyphenol in stem was significantly increased by SH-1 and SH-2 application in the field. In field experiments, foliar application with both SH-1 and SH-2 were significantly reduced the development of late blight on potato plants. Control of late blight disease was obtained with control values of 72% and 53% by application of 1% SH-1 and SH-2, respectively, with 4 times at 7 days interval, and reduced with similar disease control values by application with 3 times at 14 days interval compared with untreated control. SH-1 and SH-2 applications increased the fresh weight of potato, and higher grade potatoes were also increased. The results showed that SH-1 and SH-2 applications can be used as eco-friendly natural fungicide for organic farming for the increase of yields and control of late blight.
Potato cv. 'Haryeong' was bred with high solids, resistance to late blight and good culinary quality. It has been registered as new potato variety in 2005. Tuber necrosis symptoms such as severe superficial necrosis, raised surface lesions and ringed necrotic areas were found in tubers of 'Haryeong' during storage of seed potatoes in 2010. Potato virus Y (PVY) was detected from these symptomatic tubers by the analysis of RT-PCR using a primer set specific to coat protein gene of PVY. The nucleotide sequence of RT-PCR product ($PVY^{Hkr}$) was determined and compared to those of other strains, such as $PVY^{Kor}$, $PVY^N$, $PVY^{NTN}$, $PVY^O$, and $PVY^C$ registered in GeneBank. The result showed that $PVY^{Hkr}$ was exactly the same as $PVY^{Kor}$, Korean isolate reported in 2005, except two nucleotides. To verify the PVY was responsible for the tuber necrosis symptoms shown in the tubers of 'Haryeong', a bioassay was done using two viruses (PVY and Potato leafroll virus) and five potato cultivars ('Haryeong', 'Superior', 'Atlantic', 'Dejima', and 'Chubaek'). As expected, the same necrosis symptom appeared in tubers of 'Haryeong' infected with PVY only during the storage period.
Ferritin is ubiquitous in bacteria, animals and plants. Ferritin is thought to play two main roles in living cells to provide iron for the synthesis of iron protein such as ferretoxin and cytochromes and to prevent damage from radicals produced by iron/dioxygen interaction. To enhance the resistance of potato to Erwinia carotovora, the soybean ferritin gene was introduced into the potato either under CaMV 35S or hsr203J promoter. Potato transgenic plants were screened by PCR analysis using specific primers to the ferritin gene. Expression of ferritin gene under CaMV 35S and hsr203J promoter in potato transgenic plants was confirmed by northern blot analysis. hsr203J promoter known to pathogen inducible in tobacco drives the induction upon Phytophthora infestan in potato and the transcript level of ferritin gene was extremely high after 24 hours post inoculation. One of transformants under CaMV 35S promoter was increased 2.5 fold than untransformant. Each one of transgenic potato containing gene promoter CaMV 35S and hsr203J-ferrtin fusion exhibited tolerance against potato soft rot.
Diseases caused by begomoviruses (family Geminiviridae, genus Begomovirus) constitute a serious constraint to tropical and sub-tropical agro-ecosystems worldwide. In recent years, they have also introduced in temperate regions of the world where they have great impact and are posing a serious threat to a variety of greenhouse crops. Begomoviral diseases can in extreme cases reduce yields to zero leading to catastrophic losses in agriculture. They are still evolving and pose a serious threat to sustainable agriculture across the world, particularly in tropics and sub-tropics. Till recently, there have been no records on the occurrence of begomoviral disease in South Korea, however, the etiology of other plant viral diseases are known since last century. The first begomovirus infected sample was collected from sweet potato plant in 2003 and since then there has been gradual increase in the begomoviral epidemics specially in tomato and sweet potato crops. So far, 48 begomovirus sequences originating from various plant species have been submitted in public sequence data base from different parts of the country. The rapid emergence of begomoviral epidemics might be with some of the factors like evolution of new variants of the viruses, appearance of efficient vectors, changing cropping systems, introduction of susceptible plant varieties, increase in global trade in agricultural products, intercontinental transportation networks, and changes in global climatic conditions. Another concern might be the emergence of a begomovirus complex and satellite DNA molecules. Thorough understanding of the pathosystems is needed for the designing of effective managements. Efforts should also be made towards the integration of the resistant genes for the development of transgenic plants specially tomato and sweet potato as they have been found to be widely infected in South Korea. There should be efficient surveillance for emergence or incursions of other begomoviruses and biotypes of whitefly. This review discusses the general characteristics of begomoviruses, transmission by their vector B. tabaci with an especial emphasis on the occurrence and distribution of begomoviruses in South Korea, and control measures that must be addressed in order to develop more sustainable management strategies.
Potato virus Y (PVY) and potato leafroll virus (PLRV) are among the most damaging potato viruses and prevalent in most potato growing areas. In this study, cryopreservation was used to eradicate PVY and PLRV using two cryogenic methods. Potato shoot tips proliferated in vitro were cryopreserved through droplet-vitrification and encapsulation-vitrification using plant vitrification solution 2 (PVS2; 30% glycerol + 15% dimethyl sulfoxide + 15.0% ethylene glycol + 13.7% sucrose) and modified PVS2. Both cryogenic procedures produced similar rates of survival and regrowth, which were lower than those from shoot tip culture alone. The health status of plantlets regenerated from shoot tip culture alone and cryopreservation was checked by reverse transcription-polymerase chain reaction. The frequency of virus-free plants regenerated directly from highly proliferating shoot tips reached 42.3% and 48.6% for PVY and PLRV, respectively. In comparison, the frequency of PVY and PLRV eradication after cryopreservation was 91.3~99.7% following shoot-tip culture. The highest cryopreserved shoot tip regeneration rate was observed when shoot tips were 1.0~1.5 mm in length, but virus eradication rates were very similar (96.4~99.7%), regardless of shoot tip size. This efficient cryotherapy protocol developed to eliminate viruses can also be used to prepare potato material for safe long-term preservation and the production of virus-free plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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