This study was performed to get the basic information concerned to the optimum culture condition of Inonotus obliquus. Several solid media, PDA, MEA and Czapek-Dox, and three liquid media were adopted for the in vitro cultivation. Some main features of the fungal morphological characteristics under cultivation conditions were observed and described. Preliminary results showed that appearance of the mycelial mat, hyphal size and substrate pigmentation differed according to the media. The PDA medium was the most favorable substrate for the growth on solid culture, followed by MEA and Czapek-Dox media. Concerned to the addition of amino acids, 5 amino acids, such as alanine, alginine, isoleucine, leucine and threonine, enhanced to the mycelial growth. Isoleucine was shown the best fungal growth. An important morphological hyphal structure for the fungus, the setae, was found in abundance and diverse its shape and size. In liquid culture, fresh potato broth was the best growth stimulant of the fungus, followed by Malt extract and potato broth. Addition of yeast extract to the liquid media had improved the biomass, but not laccase production.
The hyphal growth, production of color pigments and monacolin K by Monascus strains were investigated in liquid medium. Thirty five different strains were collected and cultured in potato dextrose yeast extract broth (PDYB), potato dextrose broth (PDB) and malt extract broth (MEB) medea at $25^{\circ}C$ for 7 days. The growth rates of most of strains were highest in PDYB medium. Growth rate as well as pigment production were influenced by suspension conditions of mycelia during liquid cultivation. Most of strains producing monacolin K corresponded to strains producing red pigment highly and showing more pH changes of liquid media. Monacolin K produced from strains was detected in culture broth as well as mycelia. Any citrinin was not detected in monacolin K producing strains. These results imply that the selection of the strains producing red pigment highly and showing more pH changes in liquid cultivation could be applied for primary screening of Monascus strains for preparation of red mold rice.
This study investigated the cultural characteristics of Shimizuomyces paradoxus in different nutritional and environmental conditions. The highest mycelial growth was observed in Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract agar medium, and the optimal temperature and pH were $25^{\circ}C$ and pH 8.0, respectively. The optimal carbon and nitrogen sources were 1% dextrose and 1% peptone in agar. However, in liquid culture the highest dry mycelium weight was found for the potato dextrose agar and potato sucrose agar broths. The optimum inoculum size was five mycelial discs (5 mm) per 100 mL of broth, and the optimum liquid culture period was 25 days. This is the first ever report of S. paradoxus cultural characteristics.
Protopasts were isolated from cultured cells of potato (Solanum tuberosum L.) tuber tissue. The ability of callus formation from the culture cells was higher in cultivars Dejima and Superior than in Shimabara and Irish Cobbler on Lam's medium. Therefore, the former was used as sources for protoplast isolation. Friable calli were transferred to liquid media and cells in exponential phase were used for protoplast isolation. In both of Dejima and Superior, the yield of protoplasts was high in the enzyme solution of 2% Onozuka cellulase and 1% macerozyme. Also, viability of isolated protoplasts was very good. Thus, it seems that these protoplasts would be applicable to various aims of research.
In this study, we investigated the culture conditions of four ectomycorrhizal fungi, namely, Amanita spissacea NIFoS 2719, Pisolithus arhizus NIFoS 2784, Suillus spraguei NIFoS 2848, and Xanthoconium affine NIFoS 2716, in solid and liquid culture media. In addition, we attempted to induce in vitro mycorrhization of the fungi with Pinus densiflora. Prior to liquid culture, we determined the optimal culture conditions for each species in solid media. The results revealed that all species examined are capable of growth in potato dextrose agar (PDA), malt extract agar (MEA), and modified Melin-Norkran's medium (MMN), although their preferred growth media were different. Liquid culture experiments showed that inorganic nitrogen did not enhance the mycelial growth of all four species. Therefore, we used MMN-based liquid inocula to promote the growth of ectomycorrhizal fungi in our symbiosis culture system. Mycorrhization was observed in Xanthoconium affine NIFoS 2716. Morphological analysis revealed that fungi-inoculated roots of P. densiflora form simple and dichotomous lateral roots with dense mycelia. In addition, inoculation with X. affine NIFoS 2716 promoted root and shoot developments.
This study was carried out to improve the liquid culture methods of Paecilomyces japonica. The results show that the size of granular mycelium is smaller when the shaking speed is increased. Especially, the granular mycelium is the smallest at the shaking speed of 150rpm under the photoperiod of 12L-12D. Dry weight of mycelium was averagely 1.216 g in the Sikworm larva (SL) medium, and the weight was 2 times heavier than in the Potato dextrose (PD) medium. By adding 6 g of 6 mmbeads in the SL medium, the dry weight is increased to 1.332 g. The optimal addition of silkworm larval powder to the culture medium for gest harvest was 1.360$\pm$0.67 g in dry weight.
Sweet potato (Ipomoea batatas L.) shoot tips grown in vitro were successfully cryopreserved by encapsulation-vitrification. Encapsulated explants are very easily manipulated, due to the relatively large size of the alginate beads, and a large number of samples can be treated simultaneously. In this study, the effects of sucrose preculture, cryoprotectant preculture, and post-warm recovery media on regrowth, following liquid nitrogen (LN) exposure, were investigated to establish an efficient encapsulation-vitrification protocol for sweet potato. Shoot tips of plants grown in vitro were precultured in 0.3 M sucrose for 2 d before encapsulation. Encapsulated shoot tips were pre-incubated in liquid MS (Murashige and Skoog) medium containing 0.5 M sucrose for 16 h, before preculturing in sucrose-enriched medium (0.7 M sucrose) for 8 h. Shoot tips were osmoprotected with 35% plant vitrification solution 3 (PVS3) for 3 h, before being dehydrated with PVS3 for 2 h at $25^{\circ}C$. The encapsulated and dehydrated shoot tips were transferred to 2 mL cryotubes, suspended in 0.5 mL PVS3, and plunged directly into liquid N. High levels of shoot formation were obtained for the cv. Yeulmi (65.7%) and Yeonwhangmi (80.3%). The regrowth rates of cryopreserved samples in Yeulmi (78.9%) and Yeonwhangmi (91.3%), following culture on ammonium-free MS medium for 5 d, were much higher than those cultured on standard MS medium (65.7% and 80.3%, respectively). This encapsulation-vitrification is a promising method for the long-term preservation of sweet potato.
The growth characteristics and production of color pigments by Monascus strains were investigated during liquid culture, and production of monacolin K in red mold rice was carried out by solid state fermentation. Four different Monascus ruber strains were cultured in potato dextrose yeast extract broth (PDYB) media at $25^{\circ}C$ for 15 days. The high producing strain for red pigment was not corresponded to the strain for yellow pigment. Production of red pigment was high in the strain causing the fast pH change in culture broth. Production of monacolin K in red mold rice by solid state fermentation was influenced by a combination of wet cell weight and spore density in inoculum by liquid culture. Most strains showed the high production of monacolin K in red mold rice, when submerged fermentation was carried out for 5 days as inoculum for solid state fermentation. These results suggest that submerged fermentation period of inoculum have an effect on the production of monacolin K in red mold rice by solid state fermentation, and monacolin K in red mold rice could be increased by controlling the condition of submerged fermentation for inoculum.
Choi Ki Young;Son Sung Ho;Lee Joo Hyun;Lee Yong-Beom;Bae Jong Hyang
생물환경조절학회지
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제14권4호
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pp.298-301
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2005
Potato (Solamum tuberosum 'Dejima') plantlets were investigated on culture type and initial quantity of inoculation in bioreactor and survival rate by hydroponics for mass production. rode stems (1 to 1.5cm in length) of potato plantlets multiplied in vitro were grown for 3 weeks in liquid Murashige and Skoog (MS) medium with sucrose $30 g\; L^{-1}$. When plantlets (80-node inoculation) were raised in 10L balloon type bubble (BB) bioreactor, the healthiest growth of plantlets was obtained from explants cultured in ebb & flow culture with medium supplied periodically 12 times per day. The suitable inoculation quantity of 20L BB bioreactor was 120 pieces of stem segments (mean 2.2g fresh weight) in ebb & flow culture. Number of nodal shoot was eight on the average. In controlled culture room, survival rate of plantlets at 7 days after stem cutting was above $70\%$ when they were acclimatized by hydroponics grown in deep flow and solid medium culture. The highest survival rate of the stem cutting plantlets was in nutrient solution adjusted to EC $1.4dS{\cdot}m^{-1}$. Stem cutting plantlets through one culture could be obtained $670\~900$, when plantlets were grown in ebb & flow culture during 3 weeks using a 20L bioreactor with initial 120 pieces of nodal segments. 11 is possible In do mass production of seedlings cultured in bioreactor and hydroponics.
Protoplasts were enzymatically isolated from suspension culture of sweet potato. High yields of single protoplasts were produced from nonembryogenic cell aggregates. However, most protoplasts obtained from embryogenic cell clumps were spontaneously fused during enzyme treatment; a small portion of them remained single. Upon transfer to Murashige and Skoog's(MS) liquid medium supplemented with 0.1 mg/1 6-benzyladenine(BA) and 1 mg/12,4-dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D), protoplasts from nonembryogenic cell aggregates sustained cell divisions to form cellus. Upon subculture onto MS media with 0.2 mg/12,4-D or without growth regulators, the callus did not give rise to any organs. On the other hand, first cell division of single protoplasts from embryogenic cell clumps was sporadically observed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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