Tetracycline antibiotics have been widely used not only therapeutics but feed additives. There are many methods for the isolation and determination of tetracycline antibiotics in animal muscle tissue. But those methods take much time and labor, so it is difficult to analyse many samples simultaneously. A rapid isolation method and liquid chromatographic determination of tetracycline antibiotics in animal muscle tissue (bovine, porcine, chicken) is presented. Blank control and tetracyclines fortified samples (0.5g) were blended with $C_{18}$ containing 0.05g each of oxalic acid and disodium ethylenediaminetetraacetate. After homogenize, homogenate was transferred to glass column made from 10ml glass syringe and compressed to 4~4.5ml volume. A column made from the $C_{18}$/meat matrix was washed with hexane (8ml) and dichloromethane (8ml, if needed), following which the tetracyclines were eluted,vith methanol or 0.01M methanolic oxalic acid (8ml). The eluates containing tetracyclines analytes were free from interfering compounds when analysed by HPLC with UV detection (photodiode array at 360nm). Standard curve for each tetracycline showed a linear response at the range of $0.05{\sim}1.0{\mu}g/ml$ and tetracycline antibiotics were eluted within 4ml of eluted volume. All tetracycline antibiotics except tetracycline were stable during the concentration process at $40^{\circ}C$ and time required for concentration was 3~4 hours. Fortified samples containing oxalic aicd and EDTA represented more good recoveries than those of not-contained sample. Recoveries were 91.8~110.1% (oxytetracycline; OTC), 57.7~79.5% (tetracycline; TC), 78.1~88.6% (chlortetracyclines; CTC) and 88.4~100.6% (doxycycline; DC) in pork tissue, 101.1~126.8% (OTC), 66.4~75.4% (TC), 79.2~88.1% (CTC) and 69.3~86.7% (DC) in beef tissue, and 90.8~95.6% (OTC), 66.2~84.4% (TC), 75.7~77.2% (CTC) and 55.6~80.7% (DC) in chicken muscle tissue. The detection limits validated in muscle tissue by this method were $0.05{\mu}g/g$ for OTC and TC, and $0.1{\mu}g/g$ for CTC and DC.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제34권6호
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pp.588-593
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2008
There are increasing reports regarding regeneration of the defected tissues using tissue engineering technique. In this technique, multipotential stem cells are essential. There are many potential sources of adult stem cells, such as bone marrow, umbilical cord blood, fat, muscle, dental tissues and skin. Among them, skin is highly accessible and easily obtained with a minimum of donor site complications. Moreover, skin is an abundant adult stem cell sources and has the potential for self-replication and immune privilege. In this study, we isolated skin-derived precursor cells (SKPs) from the ear of adult miniature pigs. In these SKPs, the expression of transcriptional factors, Oct-4, Sox-2, and Nanog were detected by RT-PCR. In vitro osteogenesis and adipogenesis were observed at 3 weeks after transdifferentiations as assayed by positive von Kossa and Oil-red O staining, respectively. In addition, expression of osteocalcin and osteonectin in the osteogenic differentiation medium and $PPAR{\gamma}2$ and aP2 in the adipogenic differentiation medium were detected by RT-PCR. In vitro neurogenesis of porcine SKPs was observed during 24 and 72 hours after treatment of neurogenic differentiation medium. The results of this study suggest that SKPs demonstrate the properties of pluripotence or multipotence and multi-lineage differentiation. This indicates that autogenous SKPs are a reliable and useful source of adult stem cells for regenerative medicine.
To further investigate the regions on porcine chromosome 7 that are responsible for economically important traits, phenotypic data from a total of 287 F2 individuals were collected and analyzed from 1998 to 2000. All animals were genotyped for eight microsatellite loci spanning the length of chromosome 7. QTL analysis was performed using interval mapping under the line-cross model. A permutation test was used to establish significance levels associated with QTL effects. Observed QTL effects were (chromosomewide significance, position of maximum significance in centimorgans): Birth weight (<0.01, 3); Carcass length (<0.05, 80); Longissimus muscle area (<0.01, 69); Skin percentage (<0.01, 69); Bone percentage (<0.01, 74); Fat depths at shoulder (<0.05, 54);Mean fat depth (<0.05, 81); Moisture in m. Longissimus Dorsi (<0.05, 88). Additional evidence was also found which suggested QTL for dressing percentage and fat depths at buttock. This study offers confirmation of several QTL affecting growth and carcass traits on SSC7 and provides an important step in the search for the actual major genes involved in the traits of economic interest.
Pleiomorphic adenoma gene-like1 (PLAGL1) encodes a zinc-finger (ZF) protein with seven ZFs of the C2H2-type which is a regulator of apoptosis and cell cycle arrest, and also regulates the secretion of insulin. In both human and mouse, PLAGL1 is a candidate gene for tumor suppressor and transient neonatal diabetes mellitus (TNDM). In this study, a 2,238 bp fragment covering the complete coding region was obtained and deposited to GenBank (accession number: DQ288899). The reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) indicated that PLAGL1 was expressed almost equally in heart, liver, spleen, lung, kidney, stomach, small intestine, skeletal muscle, fat, uterus and ovary. Comparing the sequences of Large White and Meishan pigs, a C-T transition in exon 6 was found. The polymorphism could be detected by TaqI and was genotyped in five purebreds (Large White, Landrace, Meishan, Tongcheng and Bamei). Association analysis was performed between the polymorphism and carcass traits in 276 pigs of a "Large White${\times}$Meishan" F2 resource population. As a consequence, significant associations of the genotypes with shoulder backfat thickness (SFT) and internal fat rate (IFR) were observed. Pigs with TT genotype had low SFT and high IFR compared with TC or CC genotypes.
본 연구는 돼지 반막양근(semimembranosus muscle, SM)으로부터 획득된 수리미 유사물의 최적의 가열조건을 모색하고자 겔 특성에 미치는 다양한 가열온도와 가열시간의 효과를 조사하였다. 가장 현저한 변화는 수세과정에서 SM으로부터 SLM 처리하는 과정중 지방함량(약 1%)의 감소가 발생하였다. 겔의 강도와 인장강도는 가열온도 $75^{\circ}C$에서 20분간 가열했을 때 현저히 증가하였다(p<0.05). SLMG의 겔 특성은 SDS-PAGE의 결과로 살펴보면 가열시간과 온도에 의해 영향을 받은 것으로 나타났다. 가열 20분 후 phosphorylase를 포함한 몇몇의 효소들이 밴드가 사라지기 시작했는데, 46 kDa과 60kDa의 밴드의 소멸은 20분 가열시간 후 관찰되었다. 현미경 사진을 통해 관찰한 결과 가열 15분까지는 섬유 또는 필라멘트들 사이 공간이 밀접하게 나타났으며, 근섬유의 필라멘트들이 사라지지 않고 존재하는 것으로 나타났다. 가열시간 30분에서35분사이에 근섬유와 필라멘트 사이 현저한 변화가 발생하였으며, 가열시간이 증가할수록 SLM의 구조적으로 서로 엉겨 붙는 것이 관찰되었다. 이러한 결과는 가열온도 $75^{\circ}C$와 가열시간 25분에서 가장 우수한 젤을 형성하는 것으로 나타났다.
Genome sequencing of the pig is being accelerated because of its importance as an evolutionary and biomedical model animal as well as a major livestock animal. However, information on expressed porcine genes is insufficient to allow annotation and use of the genomic information. A series of expressed sequence tags of 5' ends of five full-length enriched cDNA libraries (SUSFLECKs) were functionally characterized. SUSFLECKs were constructed from porcine abdominal fat, induced fat cells, loin muscle, liver, and pituitary gland, and were composed of non-normalized and normalized libraries. A total of 55,658 ESTs that were sequenced once from the 5′ ends of clones were produced and assembled into 17,684 unique sequences with 7,736 contigs and 9,948 singletons. In Gene Ontology analysis, two significant biological process leaf nodes were found: gluconeogenesis and translation elongation. In functional domain analysis based on the Pfam database, the beta transducin repeat domain of WD40 protein was the most frequently occurring domain. Twelve genes, including SLC25A6, EEF1G, EEF1A1, COX1, ACTA1, SLA, and ANXA2, were significantly more abundant in fat tissues than in loin muscle, liver, and pituitary gland in the SUSFLECKs. These characteristics of SUSFLECKs determined by EST analysis can provide important insight to discover the functional pathways in gene networks and to expand our understanding of energy metabolism in the pig.
Kim, Y.H.;Jung, H.J.;Park, J.C.;Kwon, O.S.;Chung, C.S.;Ko, Y.D.;Moon, H.K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제18권4호
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pp.557-561
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2005
The present study was undertaken to investigate the effects of weekly administration of implant type recombinant porcine somatotropin (rpST) on the performance and carcass characteristics in finishing pigs. A total of 120 crossbred (Landrace${\times}$Yorkshire${\times}$Duroc) pigs were employed for 11 weeks in a growth trial in experiment. A rpST designed to implant every 7 d was used. Forty pigs, each weighing 75 kg, were allocated into three rpST treatments; control (CONT), implant of rpST from 75 kg (TRT1) or 90 kg (TRT2) of body weight. The CONT pig and pigs in TRT2 from 75 kg to 90 kg were treated without rpST but with placebo. In rpST-treated pigs, each 100 mg and 125 mg of the equivalent rpST was implanted from live weight of 75 kg to 90 kg and from 90 kg to market weight, respectively. Half of the pigs from each treatment were marketed at live weight of 110 kg and the rest at 130 kg. All pigs were allowed ad libitum access to a commercial feed containing 0.94% and 0.88% of lysine from 75 to 110 kg, 110 to 130 kg of body weights, respectively. rpST had no effect on daily gain, while feed efficiency was improved by 7 to 13% (p<0.05) in the rpST-treated groups compared with the CONT. Compared with the CONT, backfat thickness was decreased by 12% (p<0.05) in TRT1 at 110 kg of market weight, and by 23 to 32% (p<0.05) in the rpST-treated groups at 130 kg of market weight, respectively. Lean muscle rate tended to be higher in TRT1 at both 110 kg and 130 kg of market weight, and carcass fat percentage in the rpST-treated groups was decreased by 33 to 46% (p<0.05) compared with the CONT.
성숙한 gilt를 이용하여 estrous cycle과 pregnancyrlrks 동안 OCD효소의 tissue내 함량을 측정하는 것이 본 연구의 주 목적이었다. 하루 한 마리의 gilt를 estrous cycle day 3, 10, 17, 18, 19, 20 그리고 pregnancy day 11, 12, 13, 14, 18, 19, 20, 48, 50, 52에 도살하였다. 시상하부, 뇌하수체, 자궁, 난소 및 골겨근에서 조직을 제거하였으며, 이들 조직들을 완충액에 넣어 균질화 시켰으며 그 상청액은 단백질량과 ODC의 활력도를 측정하였는데 사용되었다. Radiolabled ormithine에서 발생하는 14CO2양은 0.124∼4mg범위내에서 단백질첨가량과 배양시간에 비례하였다. OCD는 특히 estrous cycle day 19일에 뇌하수체, 난소 그리고 자궁에서 활발한 활동을 보여주었다. 한편, 시상하부와 골격근에서 ODC는 그 어떤 활동도 보이지 않았다. 자궁조직은 다른 조직들에 비해 보다 활발한 ODC활동을 보여 주었다(P<0.05).
The present study was performed to elucidate the effects of extracellular $Ca^{2+}$ on contractile responses in isolated porcine coronary artery ring using by perivascular nerve stimulation (PNS). Especially, the study was focused on the source of $Ca^{2+}$ on $P_{2X}$-purinoceptor mediated muscle contraction which one of $P_2$-purinoceptor subtypes. The following results can be drawn from these studies : 1. The phasic contractions induced by PNS were inhibited with muscarinic receptor antagonist, atropine ($10^{-6}M$). 2. The phasic contractions induced by PNS were significantly inhibited by sequential treatment with atropine and adrenergic neural blocker, guanethidine ($10^{-6}M$). 3. The phasic contractions induced by PNS were inhibited with $P_{2X}$-purinoceptor desensitization by repetitive application of $\alpha$,$\beta$-Me ATP ($10^{-4}M$). 4. The phasic contractions induced by PNS were so weakened in calcium-free medium. 5. The phasic contractions induced by PNS were inhibited with calcium channel blocker, verapamil ($10^{-6}{\sim}5{\times}10^{-6}M$). 6. The phasic contractions induced by PNS on pretreated with verapamil ($10^{-6}{\sim}5{\times}10^{-6}M$) were not changed by $\alpha$,$\beta$-Me ATP ($10^{-4}M$). These results demonstrate that the neurogenic phasic contractions induced by PNS are due to adrenergic-, cholinergic- and $P_{2X}$-purinergic receptors and the origin of $Ca^{2+}$ on $P_{2X}$-purinoceptor mediated muscle contraction is extracellular $Ca^{2+}$ through plasmalemmal $Ca^{2+}$ channels.
Kim, Chan-Hee;Go, Hye-Jin;Kim, Eun-Jung;Seo, Jung-Kil;Hong, Yong-Ki;Kim, Hyung-Rak;Chung, Joon-Ki;Muneoka, Yojiro;Park, Nam-Gyu
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제27권11호
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pp.1733-1736
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2006
A new biologically active peptide with structural similarity to neuromedin N (NMN) has been isolated from extracts of visceral tissue of the African lungfish, Protopterus dolloi, using the rectum of the quail as the bioassay system. The primary structure of NMN-related peptide was established as Lys-Ala-Pro-Tyr-Ile-Leu-OH ([$Ala_2$]-NMN) and contained one substitution ($Ala_2\rightarrow$Ile) compared with the porcine NMN. [$Ala_2$]-NMN was found to have an excitatory effect on rectal muscle tissues of quail (Coturnix japonica), newt (Cynops pyrrhogaster) and black bass (Micropterus sulmoides). The threshold concentration of [Ala2]-NMN for contraction of C. japonica muscle was found to be approximately $10^-11$M. [$Ala_2$]-NMN showed contractile activities in the following order: C. japonica > C. pyrrhogaster > M. sulmoides. The identification of [Ala2]-NMN provides evidence that NMN family, hitherto confined to mammals, has a widespread occurrence in lungfish.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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