식품으로서의 가치가 증가하고 있는 느타리버섯(Pleurotus ostreatus) 이핵체와 이것의 자실체로부터 얻은 35 단포자분리균주의 핵산연쇄중합반응에 의한 DNA 다형성을 분석하여 몇가지 유전형질과의 관계를 검토하였다. 느타리의 300개 단포자분리균주중에서 다시 이차로 분리한 35균주의 균총생장 속도를 분석한 결과 4균주는 모균주와 유사한 경향을 나타내었고 느린 것, 아주 느린 것으로 나눌 수 있었다. 26개의 Primer를 사용한 RAPD 분석에서 모균주와 단포자분리균주간에 형성된 DNA 다형성 밴드는 345개로, 밴드의 크기는 $0.1{\sim}4.0Kb$였다. Primer J(OPA-01)와 W(OPB-04)는 균주간에 많은 차이를 보였고, 36-MI 103균주는 거의 모든 primer에서 다른 균주와 차이를 나타냈다. RAPD 분석에 의한 모균주와 단포자분리주의 유전유사도는 36-MI 103을 제외하고 약 73% 정도의 유전유사성을 보였으며, 36-MI 103 균주와 다른 분리균주간의 유사도는 49%로 낮았다. 모균주 및 단포자 분리균주들의 유전유사도는 균사 생장속도와 다소 상관이 있는 4개 군으로 나눌 수 있었는데 I군은 이핵성 모균주, II군은 빠른 생장의 단핵주, III군은 중간 및 느린 생장속도의 단핵주, IV군은 아주 느린 생장속도의 단핵주였다. 그러나 교배형과 유연관계는 상관관계가 없는 것으로 나타났다.
단감이 경제과수로 점차 부각되면서 재배면적이 증가하는 반면 단일 품종으로 편중됨에 따라 주요 재배지를 중심으로 그간 문제시되지 않았던 병해가 발생하여 이로 인해 단감의 품질과 농가소득에 많은 손해를 초래하고 있다. 이중 중요 병해는 Pestalotiopsis theae에 의한 단감나무 둥근갈색무늬병을 들 수 있고, 아직까지 국내에서는 Pestalotiopsis theae에 대한 구체적인 연구가 수행되지 않고 있는 실정이며, 본 연구는 이들 병원균에 대한 기초정보를 밝히기 위하여 수행되었다. Random amplified polymorphic DNA(RAPD)를 사용하여 P. theae의 유전적 유연관계를 분석하였다. P-28(No. 14)과 SP-33 (No. 15)은 0.976으로 97%의 가장 높은 유사성을 나타났으며 SP-18 (No. 7)과 SP-21 (No. 9)은 0.430으로 가장 낮은 유사성을 보였다. 서로 비교한 균주들 간의 유사성은 60% 이하로부터 95% 이상인 것도 있었으며, 대다수의 균주들은 $50{\sim}80%$의 유사성을 나타내었다. SP-21 (No.9)은 고립된 한 집단으로 나타났으며 비교한 모든 균주와 60% 이하의 낮은 유사성을 나타내었다.
암$.$수 개체 사이에 상이한 성염색체 조성을 지니는 자웅 이주 식물인 수영 (Rumex acetsa L.)에서 120개 의 10-mer random primer를 이용하여 RAPD 분석을 수행하였다. 적용한 primer들 중 24개의 primer 에서 34개의 암$.$수 특이 밴드가 관찰되었다 암 개체 특이 밴드는 16개였으며, 수 개체 특이 밴드는 18개로 나타났다. 특히 OPC-10 primer로부터 얻은 1,440 bp인 DNA 단편은 수 개체 특이적으로 나타났다. 본 연구에서 얻어진 성 특이적인 RAPD 마커들은 식물에서 성 결정 메커니즘 구명의 기본 자료로 활용될 수 있을 것이다.
The fungal isolates of Mucorales, directly collected from Korean traditional raw materials of Nuruk (raw material for Korean rice wine) and Meju (raw material for Korean soysauces), were compared with those of Rhizopus oryzae purchased. The fungal isolates of Rhizopus, Mucor, and Absidia mostly identified as based on the morphological observations, were evaluated with the PCR-polymorphic bands. The PCR-polymorphic bands of the genomic DNA reacted with the primers of OPD series tenmer were various, but showed averaged 4 to 6 in the agarose-electrophoresis. The dissimilarity coefficient (DC) between two isolates were compared by the cluster analyses, dendrogams and polar ordinations. The isolates of R. oryzae known. showed several groupings within the lower value of DC and were divided to two groups of amylo-process and other fungi with other purposes. The isolates unidentified were identified by the DC made of this results. Taxonomy of these isolates made by the morphological observations were consistent with those resulted above in most case but not in all aspects. More works were needed with the isolates known for detail informations of Mucorales.
25개의 큰느타리버섯 균주를 국내외의 다양한 지역에서 수집하여 본 실험에 사용하였다. PER-007과 PER-012균주는 다른 균주와 비교하여 볼 때 PDA 배지상에서 특징적인 균총 형태를 보였으나 대부분 균주간 유사한 균사생장률을 보였다. 자실체 유도 및 생육 실험에서 PER-007균주는 자실체가 형성 되지 않았고 PER-012균주의 발이가 되었으나 이후 성숙 자실체로 성장하지 않았으며 그 외의 공시한 균주의 자실체 대부분의 갓모양은 볼록반구형, 평판구형 등 다양하게 나타났다. URP primer의 PCR 반응 조건은 $48^{\circ}C$에서 $52^{\circ}C$의 annealing 온도에서 높은 다형성 밴드를 관찰할 수 있었으며 25개의 P. eringii strains의 다형성은 11개의 URP primer 중 URP1F, URP2R, URP2F, URP4R, URP6R, URP9F, URP17R primer에서 계통간 PCR 다형성 밴드를 형성하였다. URP-PCR다형성밴드를 기초로 하여 유전적 유연관계를 분석한 결과 P. eringii strain들은 $76%{\sim}100%$정도의 유전적 유사도를 가지는 3개의 주요 group으로 나눌 수 있었으며 PER-007과 PER-017균주는 outgroup으로 원연관계를 형성하였다.
The common split-gilled mushroom, Schizophyllum commune is found throughout the world on woody plants. This study was initiated to evaluate conditions for favorable vegetative growth and to determine molecular phylogenetic relationship in twelve different strains of S. commune. A suitable temperature for mycelial growth was obtained at $30^{\circ}C$. This mushroom grew well in acidic conditions and pH 5 was the most favorable. Hamada, glucose peptone, Hennerberg, potato dextrose agar and yeast malt extract were favorable media for growing mycelia, while Lilly and glucose tryptone were unfavorable. Dextrin was the best and lactose was the less effective carbon source. The most suitable nitrogen sources were calcium nitrate, glycine, and potassium nitrate, whereas ammonium phosphate and histidine were the least effective for the mycelial growth of S. commune. The genetic diversity of each strain was investigated in order to identify them. The internal transcribed spacer (ITS) regions of rDNA were amplified using PCR. The size of the ITS1 and ITS2 regions of rDNA from the different strains varied from 129 to 143 bp and 241 to 243 bp, respectively. The sequence of ITS1 was more variable than that of ITS2, while the 5.8S sequences were identical. A phylogenetic tree of the ITS region sequences indicated that the selected strains were classified into three clusters. The reciprocal homologies of the ITS region sequences ranged from 99 to 100%. The strains were also analyzed by random amplification of polymorphic DNA (RAPD) with 20 arbitrary primers. Twelve primers efficiently amplified the genomic DNA. The number of amplified bands varied depending on the primers used or the strains tested. The average number of polymorphic bands observed per primer was 4.5. The size of polymorphic fragments was obtained in the range of 0.2 to 2.3 kb. These results indicate that the RAPD technique is well suited for detecting the genetic diversity in the S. commune strains tested.
Genomic DNAs were extracted from the muscle of twenty-two specimens of two shortnecked clam, Ruditapes phifippinarum populations collected in Anmyeondo and Seocheon. Genetic differences within and between populations were analysed by random amplified polymorphic DNAs-polymerase chain reaction (RAPD-PCR) using twenty arbitrary decamer primers. Out of 20 primers, 6 generated a total of 1,111 major and minor RAPD bands from individuals of two sites, producing approximately 4.2 average polymorphic bands per primer in individuals from Anmyeondo and ranging in size from less than 50 to larger than 1,500 base pairs (bp). The electrophoretic analysis of RAPD products amplified showed moderate levels of similarity among the different individuals in Seo-cheon population. The average bandsharing values (BS value) of the samples within population from Anmyeondo ranged from 0.155 to 0.684, whereas it was 0.143∼0.782 within population from Seocheon. The average BS value between individuals No. 13 and No. 14 from Seocheon was 0.782 which was higher than that of those from Anmyeondo. The single linkage dendrogram resulted from three primers (OPA-08, -09 and -20), indicating six genetic groupings composed of group 1 (No.4, 8 and 10), group 2 (No. 18), group 3 (No.2, 5 and 7), group 4 (No. 1, 3, 6, 9, 11, 12, 13, 14, 15 and 17), group 5 (16, 19 and 20) and group 6 (No. 21 and 22). In the Seocheon population, the individual No. 18 clustered distinctly from the others of this population. The observed genetic distance between the two populations from Anmyeondo and Seocheon was more than 0.209 (0.247 and 0.275). The shortest genetic distance (0.094) displaying significant molecular differences was between individuals No. 13 and No. 14. Especially, the genetic distance between individuals No. 22 and the remnants among individuals in two geographical populations was highest (0.275). This result illustrated that individual No.22 is distinct from other individuals within two shortnecked populations. The different geographical features of two sites may have caused the genetic diversity in two shortnecked clam populations.
Somaclonal variation, defined as phenotypic and genetic variations among regenerated plants from a parental plant, could be caused by changes in chromosome structure, single gene mutation, cytoplasm genetic mutation, insertion of transposable elements, and DNA methylation during plant regeneration. The objective of this study was to evaluate DNA variations among somaclonal variants from the cotyledonary node culture in soybean. A total of 61 soybean somaclones including seven $\textrm{R}_1$ lines and seven $\textrm{R}_2$ lines from Iksannamulkong as well as 27 $\textrm{R}_1$ lines and 20 $\textrm{R}_2$ lines from Jinju 1 were regenerated by organogenesis from the soybean cotyledonary node culture system. Field evaluation revealed no phenotypic difference in major agronomic traits between somaclonal variants and their wild types. AFLP and SSR analyses were performed to detect variations at the DNA level among somaclonal variants of two varieties. Based on AFLP analysis using 36 primer sets, 17 of 892 bands were polymorphic between Iksannamulkong and its somaclonal variants and 11 of 887 bands were polymorphic between Jinju 1 and its somaclonal variants, indicating the presence of DNA sequence change during plant regeneration. Using 36 SSR markers, two polymorphic SSR markers were detected between Iksannamulkong and its somaclonal variants. Sequence comparison amplified with the primers flanking Satt545 showed four additional stretches of ATT repeat in the variant. This suggests that variation at the DNA level between somaclonal variants and their wild types could provide basis for inducing mutation via plant regeneration and broadening crop genetic diversity.
Kim Hong-Sik;Park Kwang-Geun;Baek Seong-Bum;Kim Jung-Gon;Nam Jung-Hyun
한국작물학회지
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제50권2호
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pp.131-141
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2005
Molecular-based genetic diversity for a set of 141 accessions of Korean barley cultivars and 24 accessions of foreign exotic cultivars were analyzed using random amplified polymorphic DNAs (RAPDs). Different level of genetic variability was observed with 30 random decamer primers in the Korean barley varieties and breeding lines which were preliminarily classified by morphological (hulled & hulless barley) and end-use (malting barley) and/or by the released periods. A total of 74 RAPD bands were scored, and the number of bands per primer varied from 1 to 7 with an average of 2.74. The hulled barley pool had one more marker genotype per primer than the hulless barley pool. The polymorphic information content (PIC) values based on the band pattern frequencies among genotypes varied depending on genetic pools where mean PICs of hulled, hulless and malting barleys were 0.62, 0.57, and 0.43, respectively. Certain genomic loci amplified by opR04, opF01, opB05, and opC13 were highly polymorphic with PIC>0.8. Patterns and temporal trends of genetic diversity assessed over the period from 1970s to 1990s had a tendency to increase, and in particular, this upward slant was quite clear and significant for the hulless barley pool. In the cluster analysis using genetic similarity matrix calculated from RAPD profiles, two major groups and several small subgroups were classified. Major grouping of materials was not affected by the presence of the husk but by their genetic background and the spike-row type. The validity of information on the genetic diversity and relationships between genotypes will have been reviewed to predict their yield potential.
This study evaluated the optimal vegetative growth conditions and molecular phylogenetic relationships of eleven strains of Agrocybe cylindracea collected from different ecological regions of Korea, China and Taiwan. The optimal temperature and pH for mycelial growth were observed at $25^{\circ}C$ and 6. Potato dextrose agar and Hennerberg were the favorable media for vegetative growth, whereas glucose tryptone was unfavorable. Dextrin, maltose, and fructose were the most effective carbon sources. The most suitable nitrogen sources were arginine and glycine, whereas methionine, alanine, histidine, and urea were least effective for the mycelial propagation of A. cylindracea. The internal transcribed spacer (ITS) regions of rDNA were amplified using PCR. The sequence of ITS2 was more variable than that of ITS1, while the 5.8S sequences were identical. The reciprocal homologies of the ITS sequences ranged from 98 to 100%. The strains were also analyzed by random amplification of polymorphic DNA (RAPD) using 20 arbitrary primers. Fifteen primers efficiently amplified the genomic DNA. The average number of polymorphic bands observed per primer was 3.8. The numbers of amplified bands varied based on the primers and strains, with polymorphic fragments ranging from 0.1 to 2.9 kb. The results of RAPD analysis were similar to the ITS region sequences. The results revealed that RAPD and ITS techniques were well suited for detecting the genetic diversity of all A. cylindracea strains tested.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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