A strong constitutive PJH promoter from Bacillus sp. was applied to overexpress the endoxylanase gene (639 bp) in Bacillus subtilis. The expression plasmid, pJHKJ4, was designed to contain the $P_{JH}$ promoter and open reading frame of endoxylanase including its own promoter. The plasmid was introduced into B. subtilis DB431 and the resulting transformant was grown on LB glucose medium. At the end of cultivation, the endoxylanase activity in the culture supernatant reached about 140 DIm!. The enzyme in the supernatant was concentrated by ultrafiltration (MW cut-off 10 kDa and 30 kDa) and ammonium sulfate precipitation. For the concentration of the enzyme, ultrafiltration was more efficient than 70% ammonium sulfate precipitation. The stabilization of concentrated enzyme solution at $50^{\circ}C$ was examined with various stabilizers such as NaCI, glycerol, polyethylene glycol, sorbitol, and $CaCI_2$. The most effective stabilizers were found to be NaCI and $CaCI_2$.
This study was designed to investigate the productivity of L-methionine by the method of protoplast fusion between Brevibacterium flavum ATCC 14067 and Corynebacterium glutamicm ATCC 13032, and then L-methionine production was performed to continuous fermentation using the immobilized fusant cells. Mutants B. flavum K 104($thr\;met\;Km^{r}\;Et^{r}\;Sm^{r}\;Tm^{r}\;as\;genetic\;marker$) and C. glutamicum B 70($thr\;Hos\;Km^{r}\;Et^{r}\;Sm^{r}\;Tm^{r}as\;genetic\;marker$) were isolated by MNNG treatment. On the other hand, protoplast of mutants were formed to treat with lysis solution containing $500{\mu}g/ml$ of lysozyme. The ratios of protoplast formation and regeneration were 99% and $64{\sim}66%$ respectively. Fusion frequency between B. flavum K 104 and C. glutamicum B 70 showed the $3.5{\times}10^{5}$ in the 35% polyethylene glycol(PEG6000) containing 3% PVP solution. The productivity of L-methionine by fusant BFCG 37 immobilized with sodium alginate was 0.89 g/l the batch fermentation and was $18.75mg/^{1}hr\;^{1}$ on the continuous fermentation at $30^{\circ}C$ for 72 hr.
This study was conducted to examine suspended embryogenic cells growth with days of culture, effects of various kinds/concentrations of osmoticum for induction of somatic embryos (SEs), following somatic embryos germination or plantlet regeneration. The proliferation pattern of embryogenic cells in suspension culture is characterized by settled cells volume (SCV) increased with the duration of culture with marked the maxium of SCV (10.1 ml) in 18 days of culture, however the SCV of cells gradually decreased after that. In comparison of kinds/concentrations of osmoticum on somatic embryo induction, the highest induction number (352.3/g FW) of the SE was showed in 0.2 M sucrose, in addition, we also observed some effects with treatments of 0.2 M maltose (203.7) and 0.3 M maltose (193.7), respectively. However, no somatic embryos produced in treatments of 7.5% PEG plus 0.15 M sucrose or maltose. In comparison of germination efficiency of SEs which occurred from the treatments of various kinds/ concentrations of osmoticum, the highest induction frequency of cotyledon (25.2%) was obtained from SEs that produced 0.3 M maltose, however, the best occurrence rates of hypocotyl (39%), radicle (30.3%) and plantlet regeneration (3.5%) were observed from the 0.2 M sucrose treatment, respectively.
Yoo, Young-Bok;You, Chang-Hyun;Park, Yong-Hwan;Lee, Yeon-Hee;Chang, Kwon-Yawl;Peberdy, John F.
The Korean Journal of Mycology
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v.15
no.3
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pp.135-141
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1987
Interspecific heterokaryons were obtained by polyethylene glycol induced fusion of protoplasts from auxotrophic mutants of P. ostreatus+P. cornucopiae, P. ostreatus+P. florida, P. ostreatus+P. sajor-caju, P. florida+P. cornucopiae, P. florida+P. sajor-caju and P. sajor-caju+P. cornucopiae protoplasts. The Fusion products of protoplasts were induced by MCM+benomyl, but segregation of sectors were not identified. Interspecific fusion products of protoplasts between incompatible strains did not form true clamp connections and did not produce fruit bodies. For induction of fertility, interspecific heterokaryons crossed with their parents by hyphal anastomosis.
Ahn, Jaehyun;Kwon, Youngwoo;Lee, Jeong-Su;Choi, Weon Sang
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.30
no.2
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pp.150-158
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2015
This article reports the development of an effective test procedure for detection of norovirus (NoV) in foods of diverse matrices. In this study, target foods included fermented milk, soybean paste, powders made from uncooked grains and vegetables, sesame leaves preserved in soy sauce, pickled mooli, and mooli. Viral recovery varied depending on the food matrices or elution buffers tested. Buffers were compared to determine effective elution buffers from artificially virus-contaminated foods. The conventional test procedure for concentrating viruses from food (elution-polyethylene glycol(PEG) precipitation-chloroform-PEG precipitation) was modified to save time by eliminating one PEG precipitation step. The modified procedure (elution-chloroform-PEG precipitation) was able to concentrate viruses more effectively than the conventional procedure. It also removed RT-PCR inhibitors effectively. The modified procedure was applied to target food for genogroup II NoV detection. NoV RNA was detected at the initial inoculum levels 3.125-12.5 RT-PCR units per 10-25 g tested food. The use of this newly established procedure should facilitate detection of low levels of norovirus in diverse foods.
The physical properties of ${\kappa}/{\lamda}$- and ${\kappa}/{\iota}$-carrageenan films, mixed with ${\lamda}$- or ${\iota}$-carrageenan (${\kappa}:{\lamda}$ or ${\kappa}:{\iota}$ = 2:1, 1.5:1.5, 1.2:1.8) and with polyethylene glycol, were compared to those of ${\kappa}$-, ${\lamda}$-, or ${\iota}$-carrageenan films. The tensile strengths of the ${\kappa}/{\lamda}$- and ${\kappa}/{\iota}$-carrageenan films decreased with increasing mixing ratios of ${\kappa}/{\lamda}$- or ${\kappa}/{\iota}$-carrageenan, respectively, and were lower than those of the ${\lamda}$- and ${\iota}$-carrageenan films. The elongations and water vapor permeabilities of the ${\kappa}/{\lamda}$- and ${\kappa}/{\iota}$-carrageenan films increased with increasing mixing ratios of ${\lamda}$- and ${\iota}$-carrageenan, respectively, and were higher than those of the ${\lamda}$- or ${\iota}$-carrageenan films.
Korean Journal of Agricultural and Forest Meteorology
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v.7
no.4
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pp.296-302
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2005
We investigated changes in photosynthetic characteristics of P. davidiana in order to understand damage patterns to photosynthetic apparatus under drought stress. Root sprout saplings of P. davildiana were treated with $0\%,\;2\%,\;5\%,\;and\;10\%$ of 300ml polyethylene glycol (PEG) once a weer far one month. After one month, we measured photosynthetic parameters and analyzed the photochemical and $CO_2$ fixation systems. Photosynthetic rate, stomatal conductance, and respiration rate in the leaves of P. davildiana decreased according to increasing stress strength. In the photochemical system, quantum yield of PSII was reduced by the increment of PEG concentration, The decrease of apparent quantum yield was related to reduction of electron transport. Respiration rate decreased with an increase in PEG concentration, whereas photorespiration rate in the $CO_2$ fixation system increased. In conclusion, photosynthesis of P. davidiana responded sensitively under drought stress, and the sensitivity depended upon the strength of water stress. P. davidiana exhibited an increase of water use efficiency under water stress.
The effect of various water-activity depressors, such as pol yo Is, sugars, and polymers, on the conversion yields of the enzymatic synthesis of maltosyl-$\beta$-cyclodextrin from $\beta$-cyc1odextrin and maltose through reverse reaction of pullulanase was investigated. PEG 6000 of concentration of 10% (w/w) was found to be the most acceptable water-activity depressor resulting for increment of conversion yield from 43.0% to 55.9%, corresponding maltosyl-$\beta$-cyc1odextrin concentration of 3.02 g/100 ml H20. Water activity was changed from initial 0.966 to 0.914 upon addition of 20% (w/w) of PEG 6000. The conversion yields were inversely proportional to the water activities, and the increased conversion yield was caused by water activity depression which inhibited the hydrolysis reaction of maltosyl-$\beta$-CD to maltose and $\beta$-cyc1odextrin. The changes of enthalpy ($\Delta$H), entropy ($\Delta$S), and Gibbs free energy ($\Delta$G) were calculated to be 36.788 kJ/mole, 0.067 kJ/mole K. and 14.433 kJ/mole, respectively. The synthesis of maltosyl-$\beta$-CD could be increased substantially by the intermittent feeding of $\beta$-cyclodextrin. PEG 6000 could be separated effectively from reaction mixture using ultrafiltration membrane for reutilization.
In order to shorten the time of germination and emergence of red pepper seeds of cv. Serona and cv. King were soaked at 20, 25, and 30% PEG solutions for 6 and 12 days and effects of osmotic treatments with PEG were determined. 1. Osmotic treatments with 20 and 25% PEG for 12 days were proven effective in reducing germination time of cv. Serona and cv. King. Final germination percentages were not significantly different among PEG treatments. 2. Osmotic treatment with 25% PEG for 12 days showed effective in reducing the time between sowing and emergence of red pepper and shortened 4 and 5 days for emergence of cv. King and cv. Serona, respectively. 3. It is anticipated that germination and emergence of red pepper can be greatly hastened under unfavorable low temperature condition by osmotic treatment with 20 and 25% PEG for 6 and 12 days.
In this study, multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) were oxidized with a mixture of nitric acid and sulfuric acid. After oxidation, oxidized MWCNTs were treated with thionyl chloride ($SOCl_2$) and 1,4-butanediol (BD) in sequence at room temperature to introduce hydroxyl groups on the surface of MWCNTs. The prepared MWCNT-OH was silanized with 3-methacryloxypropyltrimethoxylsilane (MPTMS) to make MWCNT-MPTMS. The MWCNT-MPTMS was used as fillers in emulsion polymerization to make MWCNT-MPTMS/PMMA composite particles with 3 kinds of emulsifiers, hexadecyltrimethylammoniumbromide (CTAB) as a cationic, sodium dodecylbenzene sulfonate (SDBS) as an anionic and polyethylene glycol tert-octylphenyl ether (Triton X-114) as a nonionic emulsifier. Morphologies of composite emulsions were confirmed by a particle size analyzer (PSA) and a scanning electron microscope (SEM). Morphologies of emulsion polymerized MWCNT-MPTMS/PMMA with SDBS showed more uniform particle size distribution compared to those of other two emulsifiers used emulsions. MWCNT-MPTMS/PMMA showed $3.4^{\circ}C$ higher $T_g$ compared to pristine MWCNT/PMMA due to covalent bond formation at interface of MWCNT-MPTMS and PMMA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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