• Applied Biological Chemistry
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• 제33권1호
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• pp.73-78
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• 1990

한국산 토마토로부터 endo-polygalacturonase를 gel filtration과 이온교환크로마토그라피에 의하여 약 24배 정제할 수 있었고, 최대 효소활성을 위한 PH는 5.0, 최적온도는 $50^{\circ}C$ 였으며 pH안정범위는 $4.0{\sim}5.0$, 열안정성은 $50^{\circ}C$에서 1시간 열처리 하였을 때 약 45 % 실활 되었다. 정제된 이 효소는 SDS-polyacrylamide gel 전기영동에 의하여 단일밴드로 확인되었으며, 그 분자량은 50,000정도였고, Km값은 $1.43{\times}10^{-1}\;mol/l이었다. 금속이온중 $Ag^+$, $Zn^{++}$이온이 효소의 활성을 촉진시켰으며, $Na^+$, $K^+$등의 이온에 의해서는 활성이 저해되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제11권1호
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• pp.15-21
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• 1983

전보에서 분리 동정한 Y-33 균주의 $\beta$-galactosise 효소생산조건을 검토하고 효소를 정제하여 정제효소의 성질을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 효소생산을 위한 최적초발 pH는 7.0이었고 최적온도는 $65^{\circ}C$이었다. 2. 효소는 lactose와 galactose에 의하여 유도되어졌으며 세포내효소이었다. 3. 조효소액을 1차 DEAE-cellulose, 2차 DEAE-cellulose column chromatography 및 Sephadex G-150로 gel filtration하여 정제도가 28.3배, 수율이 15.2%의 정제효소를 얻었다. 4. 정제효소는 polyacrylamide gel 전기 영동에 의하여 순도가 검정되었다. 5. 정제효소의 유당가수분해를 위한 최적작용 온도는 $65^{\circ}C$. pH는 6.5이었다.

• 미생물학회지
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• 제27권4호
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• pp.348-356
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• 1989

PIeurotus ostrealus의 배양액에서 syringic acid에 의해 유도되는 peroxidase의 활성이 추정되었다. 본 효소는 DEAE Sephadex A-50 이온교환크로마토그래피와 Sephadex G-150 첼 여과크로마토 그래피를 통하여 순수분리 되었다. 순수분리된 효소는 당함량이 35.7%인 당단백젤이었으며. SDS-linear polyacrylamide gradient gel 전기영동과 젤여과크로마토그래피에 의해 분자량(Mr) 72.400인 2개의 동일한 소단위체로 이루어진 이합체로 판명되었다. 본 효소는 흡광 스펙프럼의 분석결과, iron protoporphyrin IX의 구조를 갖는 2개의 heme을 조효소로 가지고 였는 것으로 추정되였다. 본 효소의 등전점은 4.26 이었고 $H_2O_2$에 대한 $K_m$값은 $7.2{\mu}M$이었다. 본 효소의 반응 최적온도는 $40^{\circ}C$, 최적 pH는 3.5에서 4.0 사이였다. Ferulic acid와 sinapic acid에 대한 본 효소의 친화도(Km)는 horseradish peroxidase에 비해 각각 2.4. 12.3배 더 높은 것으호 계산되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제30권1호
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• pp.33-38
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• 2002

Lactobacillus plantarum 용균 효소를 생산하는 균주를 배양하여 생산된 효소를 정제한 결과 비활성도가 5.8 units/mg protein 이었고 정제도 8.3배, 수율은 30%이었다. 정제효소의 분자량은 gel filtration과 SDS-polyacrylamide gel eletrophoresis를 이용하여 측정한 결과 60,000 kDa 이었다. 용균 효소의 최적 반응 시간은 20분이었으며 최적 온도는 4$0^{\circ}C$, 최적 pH는 3.0이었다. 온도 안정성은 각 온도에서 30분간 처리하였을 때 $30^{\circ}C$까지는 안정하였으나 4$0^{\circ}C$에서는 80% 활성을 나타내었다. 효소의 pH 안정성은 실온에서 1시간 처리하였을 때 pH 4~7에서 안정성을 나타내었다.

• 한국식품과학회지
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• 제33권1호
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• pp.117-121
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• 2001

Phaseolus vulgaris을 분쇄한 후 ethanol 70% 및 80% 포화도에서 침전을 행하고 그 침전물을 다시 ammonium sulfate로 재침전한 후, DEAE-Sephadex ion exchange chromatography 및 Sephadex G-100 gel의 chromatography를 행하여 활성을 보인 fraction I-1-f와 I-2-f를 분획하였다. 그 결과 분리된 I-1-f의 총 단백질량은 12.0 mg/L, 총 활성은 2784 unit/L, 비활성은 232 unit/mg이였으며 정제도는 15.0배 증가하였고 수율은 5.56%이였다. 또한 I-2-f의 총 단백질량은 14.0 mg/L, 총 활성은 3210 units/L, 비활성은 229.28 units/mg protein이였으며, 정제도는 14.8배 증가하였으며 수율은 6.4%이였다. 또한 polyacrylamide gel electrophoresis를 행한 결과 단백질 band가 각각 하나로 확인되어 각각 단일 성분으로 판단되었다. 정제 ${\alpha}-amylase$ 저해제 I-1-f와 I-2-f의 분자량은 gel filtration과 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis를 행한 결과 50,000과 45,000이었다. 또한 구성성분의 함량을 측정한 결과 각각 $17.6{\sim}17%$의 당과 $79{\sim}80%$의 단백질로 구성되어 있으며 당은 glucose : xylose : mannose : N-acetylglucosamine의 함량이 5 : 3 : 50 : 42의 구성성분을 갖고 있음을 확인하였다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제5권3호
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• pp.148-152
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• 2000

Mussel adhesive protein (MAP) was extracted from Korean Mytilus edulis and then partially purified using Sephacryl S-300 gel permeation chromatography and reversed-phase high performance liquid chromatography. As an indicator of adhesiveness, is 3,4-dihydroxyphenylalanine (DOPA) content was determined. Its DOPA/protein ratio of 0.19 was higher than those of other reports, indicating a good adhesive. The partially purified MAP was confirmed by acid-urea polyacrylamide gel electrophoresis using cetylpiridinium bromide as a cationic detergent. Sea mussel hydrolysates were prepared using three commercial proteases to provide value-added functional materials and their angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitory activities were determined. Among hydrolysates of sea mussel, Protamex was the best and further purification would improved ACE inhibitory activity.

• BMB Reports
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• 제38권2호
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• pp.232-237
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• 2005

A glutathione S-transferase (GST) from Lactuca sativa was purified to electrophoretic homogeneity approximately 403-fold with a 9.6% activity yield by DEAE-Sephacel and glutathione (GSH)-Sepharose column chromatography. The molecular weight of the enzyme was determined to be approximately 23,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and 48,000 by gel chromatography, indicating a homodimeric structure. The activity of the enzyme was significantly inhibited by S-hexylGSH and S-(2,4-dinitrophenyl) glutathione. The enzyme displayed activity towards 1-chloro-2,4-dinitrobenzene, a general GST substrate and high activities towards ethacrynic acid. It also exhibited glutathione peroxidase activity toward cumene hydroperoxide.

• Journal of Microbiology
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• 제42권1호
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• pp.20-24
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• 2004

Cloned myo-inositol-1-phosphate synthase (INOS) of Drosophila melanogaster was expressed in Escherichia coli, and purified using a His-affinity column. The purified INOS required NAD$\^$+/ for the conversion of glucose-6-phosphate to inositol-1-phosphate. The optimum pH for myo-inositol-1-phosphate synthase is 7.5, and the maximum activity was measured at 40$^{\circ}C$. The molecular weight of the native enzyme, as determined by gel filtration, was approximately M$\_$r/ 271,000${\pm}$15,000. A single subunit of approximately M$\_$r/ 62,000${\pm}$5,000 was detected upon SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The Michaelis ($K_{m}$) and dissociation constants for glucose-6-phosphate were 3.5 and 3.7 mM, whereas for the cofactor NAD$\^$+/ these were 0.42 and 0.4 mM, respectively.

• 미생물학회지
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• 제24권2호
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• pp.119-126
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• 1986

A periplasmic endoprotease, named protease Pi, was purified to homogeneity from Escherkchia coli by conventional procedure with insulin as substrate. This enzyme degrades insulin and glucagon to trichloroacetic acid-soluble meterials, but shows little or no hydrolysis of bovine serum albumin, casein or globin. Its molecular weight was 110, 000 when determined by gel filtration on Sephacryl S-300 and was 105, 000 when estimated by polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of sodium dodecyl sulfate. Thus, it appears to be single polypeptide. This snzyme is metalloprotease, since it is completely inhibited by o-phenanthroline and can be activated by addition of divalent metal cations, such as $Mg^{2+}\;and\;Co^{2+}$. It is destinct from protease Ci, a cytoplasmic insulin degrading enzyme, since protease Pi is localized to the periplasm. Since protease Pi selectively degrades GTP cyclohydrolase I, it appears to play a role in the regulation of pteridine biosynthesis.

• 미생물학회지
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• 제28권1호
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• pp.65-70
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• 1990

방선균의 세포분화와 관련된 연구의 일환으로 Streptomyces fradiae NRRL2702가 생성하는 단백질분해효소 저해물질을 분리정제하여 그 특성을 분석하였다. 즉 S. fradiaesm s일반 환경 조건하에서 단백질분해효소를 생성하나 특정 조건하에서는 그 단백질의 활성을 저해하는 저해제를 생성함을 알았다. 이 저해제의 분자량은 16,800이며 serine proteinasem이 일부만을 저해하는 특징이 있었다. Pronase E의 활성의 저해양상은 competitive inhibition 이었고 열에 대하여 매우 안정함을 알았다.