• 제목/요약/키워드: polyacrylamide gel electrophoresis

검색결과 919건 처리시간 0.029초

누에 체액주단백질에 관한 생화학적 연구 (Biochemical Studies on the Major hemolymph Proteins (MHPs) of the Silkworm, Bombyx mori)

  • 성수일
    • 한국잠사곤충학회지
    • /
    • 제28권1호
    • /
    • pp.30-36
    • /
    • 1986
  • 누에의 유충 체액내에 다량으로 존재하는 저분자 체액단백질(MHP)의 체액 내의 출현시기, 체내 생합성에 관하여 polyacrylamide gel 전기영동 및 autoradiography로 조사하고, 동시에 MHP의 b성분에 대한 분리.정제를 시도하였다. 얻어진 연구결과는 다음과 같다. 1. MHP의 a성분은 유충 4령 2일의 그리고 b와 c성분은 5령 1일의 체액에 각각 출현하기 시작하여 5령 2일 이후 급격한 농도의 증가를 보였다. 2. MHP의 b와 c성분은 유충 5령 초기의 지방체에서 생합성된 후 곧 체액에 방출되나 a성분의 정확한 합성장소와 시기는 불완전하다. 3. 토사기의 유충 체액을 열처리(6$0^{\circ}C$, 5분), gel 여과 및 DEAE-cellulose와 CM-cellulose chromatography법에 의해 분리.정제한 결과 순도가 거의 100%에 가까운 MHP-b를 얻었다.

  • PDF

면양(緬羊) Squamous Cell Carcinoma의 세포추출액(細胞抽出液)중에 함유된 종양특이(腫瘍特異) 및 면역기능저하물질(免疫機能低下物質) (Tumour Specific and Immunosuppressive Components in Soluble Cell Extracts from Ovine Squamous Cell Carcinoma)

  • 전무형
    • 농업과학연구
    • /
    • 제13권2호
    • /
    • pp.299-310
    • /
    • 1986
  • 3M KCl을 이용하여 면양 squamous cell carcinoma 및 정상면양 조직(組織)에서 획득(獲得)한 추출액(抽出液)의 성상을 sephadex column chromatography, lymphocyte blastogenicity assay, acid dissociation method 및 gradient polyacrylamide gel electrophoresis 등을 이용하여 연구하였다. Sephadex column chromatography에서 얻은 5개의 종양분획(腫瘍分劃)중 분획(分劃)III은 가장 종양특이(腫瘍特異)한 항원(抗原)을 보유하고, 분획(分劃)V lymphocyte reactivity를 저하(低下)시키는 성분을 함유하고 있었다. 각 분획(分劃)을 분자량(分子量) > 100,000, 10,000~100,000 및 < 10,000의 3군(群)으로 분리한 바 종양특이항원(腫瘍特異抗原) 및 면역저지물질(免疫沮止物質)은 10,000~100,000분획(分劃)에서 나타났다. 분획(分劃)I tumour specific antigen - antibody complex를 내포하고 있음이 밝혀졌다. Gradient gel electrophoresis를 이용하여 분획(分劃)을 더욱 세분했을 때 분획(分劃)III은 Slice No 4~6에서 종양특이물질(腫瘍特異物質)이 인정되었고, 분획(分劃)V Slice No 9~11에서 면역기능저하물질(免疫機能低下物質)이 있음이 밝혀졌다.

  • PDF

색소기질을 이용한 Bacillus subtilis의 $\beta$-glucanase 정제 (Purification of $\beta$-glucanase from Bacillus subtilis Using Chromogenic Substrate)

  • 이성택;양진오;정안식
    • 미생물학회지
    • /
    • 제26권3호
    • /
    • pp.223-229
    • /
    • 1988
  • 토양에서 분리 동정한 Bacillus subtilis K-4-3를 $\beta$-glucanase생산을 위하여 발효조를 사용한 결과 flask내 배양보다 배양 시간을 단축하였고 높은 역가의 조효소액을 얻을 수 있었다. 배양여액으로부터 균체의 $\beta$-glucanase는 색소에 접합된 변형기질을 이용하여 ammonium sulfate, fractionation Sephadex G-100 gel filtration, DEAE-Sphacel ion exchange chromotography의 순으로 정제하였으며, 정제효소는 15배로 정제되어 비활성이 25.7 unit/mg이였으며, 수율은 4.2%이였다. 본 효소의 일반적 특성을 검토한 결과 정제효소는 $50^{\circ}C$에서 최적반응을 나타내었고 그 활성은 $50^{\circ}C$에서 30분간 열처리에도 안정하였다. 효소의 최적 pH는 7.0 부근이었고 금속이온의 영향으로는 $Fe^{3+}$에 의해 강하게 저해받았고 $Li^{+1}$에 의해 약간 활성화 되였다. 분자량은 SDS 전기영동에 의해 17,000.으로 추정되었으며 monomer였다. 또한 본 효소에 의한 분해산불을 TLC로 관찰한 결과 2탄당, 3탄당 빛 4탄당으로 추정되는 분해산물을 얻을 수 았었으나 최종산물인 glucose는 얻을 수 없었다.

  • PDF

검정곰팡이의 분화(分化)에 있어서 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동법(電氣泳動法)에 의한 단백질 패턴 연구(硏究) (Polyacrylamide Gel Electrophoresis of the Cell Proteins from Differentiating Aspergillus niger)

  • 박영자;김종협
    • 한국균학회지
    • /
    • 제8권3호
    • /
    • pp.159-166
    • /
    • 1980
  • 검정곰팡이(Aspergillus niger)의 동조적(同調的) 분화(分化)를 시행(施行)하면서 acid-phenol 용성(溶性)인 세포단백질(細包蛋白質)을 추출(抽出)하여 포자형성(胞子形成) 전후(前後)의 단백상(蛋白像)의 변화(變化)를 polyacrylamide gel 전기영동법(電氣泳動法)으로 추구(追究)하였다. 결과(結果)에서 1종(種)의 단백질(蛋白質)(분자량(分子量) 약(約) 27,000 정도(程度))이 포자형성기(胞子形成期)에 신생(新生)함을 알았다. 포자(胞子)의 발아시(發芽時)에는 18개의 단백질(蛋白質)밴드가 있으며 포자형성시(胞子形成時)에는 19개가 있었다. Amido black 색소(色素)의 염색도(染色度)는 분화시기(分化時期)에 따라서 각(各) 밴드마다 각각 많이 달랐다.

  • PDF

Rhodosporidium toruloides의 접합형 A 세포내 Invertase의 정제 (Purification of Internal Invertase in Rhodosporidium toruloides Mating Type A Cells)

  • 정영기;류병호
    • 한국식품영양과학회지
    • /
    • 제21권6호
    • /
    • pp.725-730
    • /
    • 1992
  • 이담자 효모균 Rhodosporidium toruloides의 mating type A 세포에서 세포내 invertase를 정제하였다. 세포내 invertase는 배양 세포의 파쇄액을 산침전 시킨 후 그 상등액으로부터 DEAE-Sephadex A-50, SP-Sephadex C-50 column chromatography와 Sephadex G-200 gel fitration 등의 과정을 거쳐 polyacrylamide gel disc 전기영동상 단일 효소 단백질까지 정제되었다. 정제효소의 분자량은 gel filtration에 의하여 90,000이었고, SDS-PAGE상에서는 22,000 dalttons에서 단일 band를 보여 단일종의 subunit가 4개로 구성된 단백질로 추정된다.

  • PDF

遺傳工學의 方法論 (Methodology of Genetic Engineering)

  • 이평우;윤경하;이세영
    • 미생물학회지
    • /
    • 제13권2호
    • /
    • pp.71-80
    • /
    • 1975
  • The neurotoxin of Clostridium botulinum type B was purified from a liquid culture. The purification steps consist of ammonium sulfate precipitation of whole culture, treatment of Polymin P(0.15%, v/v), gel filtration on Sephadex G-100 at pH5.6 and DEAE-Sephadex charomatography at pH8.0. The procedure recovered 17% of the toxin assayed in the starting culture. The toxin was homogeneous by sodium dodecyl sulfate(SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis and had a molecular weight of 163,000. Subunits of 106,000 and 56,000 molecular weight were found when purified toxin was treated with a disulfide-reducing agent and electro phoresed on SDS-polyacrylamide gels.

  • PDF

해녀콩(Canavalia lineata) 잎에서 Arginase 활성의 세포내 분포 (Subcellular Distribution of Arginase in Leaves of Canavalia lineata)

  • 유경희
    • Journal of Plant Biology
    • /
    • 제33권1호
    • /
    • pp.73-80
    • /
    • 1990
  • Subcellular distribution of arginase activity was measured in leaves of Canavalia lineata. Both mitochondrial and cytosolic fraction were found to contain the arginase activity. It was noticible that cytosolic fraction contained a substantial amount of arginase activity. Different mobility of arginase from these two fractions was showed on DEAE-Sephacel chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis. Also different pI value was showed 6.3 in cytosolic and 6.7, 7.1 in mitochondiral fraction on IEF gel electrophoresis. However, canavaine-dependent-activity (CDA) of arginase in these two fractions were not different. These results indicate that heterogenity of arginase occurs in leaves of C. lineata.

  • PDF

메밀 단백질의 전기영동유형 및 아미노산 조성에 관한 연구 (Studies on Electrophoretic Pattern and Amino Acids of Buckwheat Protein)

  • 이미숙;손경희
    • 한국식품조리과학회지
    • /
    • 제8권4호
    • /
    • pp.379-385
    • /
    • 1992
  • 1. Amino acid compositions were determined by amino acid analyzer. Through the analysis of these samples, it was found that glutamic acid was the most abundant; glycine, aspartic acid, lysine and threonine were rich; and tryptophan and methionine were the limiting amino acid. 2. Albumins, globulins, gliadins and glutelins were extracted from the Kangwon hull, Kangwon rice buckwheat, and wheat. The relative proportions of protein fractions were 52.45 : 10.14 : 16.61 : 20.80% in Kangwon hull buckwheat, 21.10 : 13.80 : 28.40 : 36.70% in Kangwon rice buckwheat and 6.87 : 1.65 : 42.85 : 48.6% in wheat, in the order of albumins, globulins, gliadins and glutelins. 3. Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) were performed to identify the subfractions of each protein fraction. The electrophoregrams of PAGE showed that the same fractions of both Kangwon hull buckwheat protein and Kangwon rice buckwheat protein had very similar electrophoretic patterns to each other respectively, but there were significant differences in the patterns between buckwheat proteins and wheat proteins.

  • PDF

Chlamydomonas reinhardtii로부터 분리, 정제된 DNA Methyltransferase 활성에 대한 Polyamine의 영향 (Effect of Polyamines on purified DNA Methyltransferase from Chlamydomonas reinhardtii)

  • 이명민
    • Journal of Plant Biology
    • /
    • 제32권4호
    • /
    • pp.331-341
    • /
    • 1989
  • DNA methyltransferase was purified 282.6-fold from Chlamydomonas reinhardtii 21gr (mt+) gametic cell to examine the effect of polyamine on the enzyme acctivity. Polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE) revealed at least three bands(1 major band, 2 minor bands). Among these, the major band represents DNA methyltransferase. Polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of 0.1% sodium dodecylsulfate(SDS-PAGE) revealed a major band with M.W. 60,000. DNA methyltransferase activity was inhibited more effectively by spermine than by spermidine, and the inhibition by putrescine was smaller than spermine and spermidine. DNA methyltransferase activity was inhibited by 40% and 53% at 5mM and 20mM spermine, respectively. In the case of spermidine, the inhibition was 35% at 10mM and 44% at 20mM. However, the inhibition by putrescine appeared only above 5mM and reached about 25% at 20mM.

  • PDF

인삼 단백질분획에 대한 폴리아크릴아미드 전기영동 (Polyacrylamide Gel Electrophoresis on Ginseng Proteins)

  • 김춘미;황정주
    • 약학회지
    • /
    • 제30권6호
    • /
    • pp.343-347
    • /
    • 1986
  • Korean ginseng was purified to obtain radioprotective protein fractions by buffer extraction, ammonium sulfate fractionation, CM-cellulose column chromatography, heat inactivation and Sephadex G-75 column chromatography. The final three fractions, GI, GII and GIII were subjected to Disc-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and SDS-PAGE. The molecular weights(M.W.) of native and denatured proteins were estimated by using regression line equations obtained from the mobilities of standard proteins. As the results, in Disc-PAGE, the GI fraction showed two protein bands with M.W. of above 213, 000 and 55, 000, GII showed one band with M.W. of 44, 000 and GIII, also one band with M.W. of 19, 000. In SDS-PAGE, GI fraction gave four subunit bands with M.W. of above 114, 000, 27, 000, 24, 000 and 19, 000, GII gave two bands with M.W. of 46, 000 and 22, 000, and GIII, one band of 19, 000.

  • PDF