In this report, we present an inverse opal scaffold that can enhance the chondrogenic differentiation of human adipose-derived stem cells (hADSCs) without drug, gene, or cytokine supplement. Inverse opal scaffolds based on poly(D,L-lactide-co-glycolide) were formed with uniform $200{\mu}m$ pores. Due to uniform pore sizes and well-controlled interconnectivity of inverse opal scaffold, hADSCs were allowed to distribute homogeneously throughout the scaffolds. As a result, high cell density culture with scaffold was possible. Since the hADSCs cultured in inverse opal scaffolds were subjected to limited supplies of oxygen and nutrients, these cells were naturally preconditioned to a hypoxic environment that stimulated the up-regulation of hypoxia-inducible factor-$1{\alpha}$ (HIF-$1{\alpha}$). As a result, apoptotic activity of hADSCs until 3 weeks after initial cell seeding was significantly reduced and chondrogenic differentiation related molecular signal cascades were up regulated (transforming growth factor-beta, phosphorylated AKT, and phosphorylated p38 expression). In contrast, hADSCs cultured with small and non-uniform porous scaffolds showed significantly increased apoptotic activity with decreased chondrogenic differentiation. Taken together, inverse opal scaffold could potentially be used as an effective tool for improving chondrogenesis using stem cells.
Polymeric membranes consisting of poly(d,1-lactide) as a polymer matrix and crystallizable progesterone as a drug were prepared by coagulating polymeric solutions. The homogeneous casting solutions in dimethyformamide were solidified by using three different coagulating processes : solvent evaporation under vacuum, solvent extraction via immersion into the nonsolvent bath, or vapor exposure at high humidity condition. With solvent removal via evaporation under vacuum, the cast solution film was vitrified to form a homogeneous film containing progesterone of spherical shape distributed evenly in the film. Being prepared by solvent extraction via immersion into a water bath, the resulting membrane showed an asymmetric structure, with progesterone of big crystallites distributed unevenly in the structure. On the other hand, the coagulation under high humidity transformed the cast film into a sponge-like structure, where progesterone took a shape like flake.
STATEMENT OF PROBLEM: A biochemical approach for surface modification has offered an alternative for physicochemical and morphological methods to obtain desirable bone-implant interfaces. PURPOSE: The purpose of the present study was to investigate cell responses to poly (D,L-lactide-co-glycolide) (PLGA)/$1{\alpha}$,25-(OH)$_2D_3$ coating with reference to cellular proliferation and differentiation in vitro. MATERIAL AND METHODS: 96 titanium discs were fabricated and divided into four groups. Group 1 was anodized under 300 V as control. Group 2, 3 and 4 were anodized then coated with 3 ml PLGA/$1{\alpha}$,25-(OH)$_2D_3$ solutions. Amount of the solutions were 2 ul, 20 ul and 200ul respectively. The osteoblast-like Human Osteogenic Sarcoma (HOS) cells were seeded and cultured for 1, 3 and 7 days. MTSbased cell proliferation assay and ALPase activity test were carried out. RESULTS: PLGA nanoparticles were observed as fine, smooth and round and HOS cells attached to the anodized surfaces through strand-like and sheet-like filopodia. After 3 days of culture, the dendritic filopodia were exaggerated and sheet-like cytoplasmic projections covered the coated titanium surfaces. After 3 days of culture, all of the groups showed increased cellular proliferation and the lowest proliferation rate was measured on group 2. Higher amount of incorporated $1{\alpha}$,25-(OH)$_2D_3$ (Group 3 and 4) improved cellular proliferation but the differences were not significant statistically (P > .05). But they increased the rate of ALP activities than the control group at day 3 (P < .05). CONCLUSION: Biodegradable PLGA nanoparticles incorporated with vitamin D metabolite positively affected proliferation and differentiation of cells on the anodized titanium surface.
In this study, expanded poly(tetrafluoro ethylene) (ePTFE) graft was modified to be used as a hemodialysis vascular access. Biodegradable poly(D,L-lactide-$co$-glycolide) (PLGA) was coated onto the inner surface of ePTFE graft with paclitaxel, which is often used as an anti-cancer agent and for reducing neointimal hyperplasia. Surface characterization before and after PLGA coating was carried out by SEM and ATR-FTIR. Porous sturcture of ePTFE was maintained after coating of PLGA solution. The amounts of coated PLGA and paclitaxel determined by ATR-FTIR and HPLC were 1.96 and 0.263 mg/$cm^2$, respectively. Young's modulus was decreased and tensile strength was increased by PLGA coating. Released paclitaxel as a function of incubation time was monitored by HPLC. Approximately 35% of coated paclitaxel was released steadily for 4 weeks with the biodegradation of PLGA. From these results, it is expected that the effect of paclitaxel on reducing neointimal hyperplasia and stenosis is maintained for a long time.
Objectives: This study examined the relative efficacies of a derivative of betulinic acid (dBA) and its poly (lactide-co-glycolide) (PLGA) nano-encapsulated form in A549 lung cancer cells in vivo and in co-mutagen [sodium arsenite (SA) + benzo[a]pyrene (BaP)]-induced lung cancer in mice in vivo. Methods: dBA was loaded with PLGA nanoparticles by using the standard solvent displacement method. The sizes and morphologies of nano-dBA (NdBA) were determined by using transmission electron microscopy (TEM), and their intracellular localization was verified by using confocal microscopy. The binding and interaction of NdBA with calf thymus deoxyribonucleic acid (CT-DNA) as a target were analyzed by using conventional circular dichroism (CD) and melting temperature (Tm) profile data. Apoptotic signalling cascades in vitro and in vivo were studied by using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA); the ability of NdBA to cross the blood-brain barrier (BBB) was also examined. The stage of cell cycle arrest was confirmed by using a fluorescence-activated cell-sorting (FACS) data analysis. Results: The average size of the nanoparticles was ~ 110 nm. Confocal microscopy images confirmed the presence of NdBA in the cellular cytoplasm. The bio-physical properties of dBA and NdBA ascertained from the CD and the Tm profiles revealed that NdBA had greater interaction with the target DNA than dBA did. Both dBA and NdBA arrested cell proliferation at G0/G1, NdBA showing the greater effect. NdBA also induced a greater degree of cytotoxicity in A549 cells, but it had an insignificant cytotoxic effect in normal L6 cells. The results of flow cytometric, cytogenetial and histopathological studies in mice revealed that NdBA caused less nuclear condensation and DNA damage than dBA did. TEM images showed the presence of NdBA in brain samples of NdBA fed mice, indicating its ability to cross the BBB. Conclusion: Thus, compared to dBA, NdBA appears to have greater chemoprotective potential against lung cancer.
Novel pH-sensitive moieties containing an s-triazine ring were synthesized with sulfonamide and secondary amino groups. The synthesized pH-sensitive moieties were used for the synthesis of a pH-sensitive amphiphilic ABA triblock copolymer. The pH-sensitive triblock copolymer was composed of diblock copolymers, methoxy poly(ethylene glycol)-poly ($\varepsilon$-caprolactone-co-D,L-lactide) (MPEG-PCLA), and pH-sensitive moiety. These copolymers could be dissolved molecularly in both acidic and basic aqueous media at room temperature due to secondary amino and sulfonamide groups. The synthesized s-triazine rings containing pH-sensitive compounds were characterized by ${^1}H-NMR,\;{^13}C-NMR$, and LC/MSD spectral data. The synthesized diblock and triblock copolymers were also characterized by ${^1}H-NMR$ and GPC analyses. The critical micelle concentrations at various pH conditions were determined by fluorescence technique using pyrene as a probe. Furthermore, the micellization and demicellization study of the triblock copolymer was done with pH-sensitive groups. The sensitivity towards pH change was further established by acid-base titration.
Jo, Yeong-Woo;Lee, Ghun-Il;Park, Yong-Man;Yang, Hi-Chang;Kim, Mi-Ryang;Lee, Sung-Hee;Kwon, Jong-Won;Kim, Won-Bae;Choi, Eung-Chil
Proceedings of the PSK Conference
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2002.10a
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pp.417.1-417.1
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2002
The in vitro release of rhGH from PLGA microspheres was characterized. rhGH-loaded PLGA microspheres were prepared with 50:50 poly(D.L-lactide-co-glycolide) (PLGA) polymers using a double emulsion process. To simulate rhGH release under physiological conditions. the microspheres were suspended in a physiological buller at 37$^{\circ}C$. Quantification of the rhGH released and its molecular form analysis were carried out using SE-HPLC. (omitted)
Jo, Yeong-Woo;Park, Yong-Man;Lee, Ghun-Il;Park, Yong-Man;Yang, Hi-Chang;Kim, Mi-Ryang;Lee, Sung-Hee;Kwon, Jong-Won;Kim, Won-Bae
Proceedings of the PSK Conference
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2002.10a
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pp.417.2-418
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2002
The rhGH-loaded PLGA microsphere formulation was prepared using a double emulsion process from hydrophilic 0:50 poly(D.L-lactide-co-glycolide) (PLGA) polymers. To investigate the sustained efficacy of this formulation, ts pharmacodynamic characteristics were analyzed. It showed particle size of ca 53.1 $\mu\textrm{m}$ with high drug ncorporation efficiency and it was sucutaneously administrated to hypophysectomized rats and whole body rowth responses of this formulation were compared to those of the different dosing patterns of rhGH. (omitted)
Jo, Yeong-Woo;Park, Yong-Man;Lee, Ghun-Il;Yang, Hi-Chang;Kim, Mi-Ryang;Lee, Sung-Hee;Kwon, Jong-Won;Kim, Won-Bae;Choi, Eung-Chil
Proceedings of the PSK Conference
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2002.10a
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pp.424.2-424.2
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2002
The in vivo release characteristics of rhGH-loaded PLGA microsphere prepared using a double emulsion process from hydrophilic 50:50 poly(D.L-lactide-co-glycolide) (PLGA) polymers were analyzed. This formulation showed particle size of ca 53.1$\mu\textrm{m}$ with high drug incorporation efficiency. To investigate in vivo release kinetics without the interference of formation of antibodies to rhGH in the experimental animals, the animals were immunosuppressed by treatment with Cyclosporin. (omitted)
Background: Polymeric nanoparticles are attractive materials that have been widely used in medicine for drug delivery, with therapeutic applications. In our study, polymeric nanoparticles and the anticancer drug, chrysin, were encapsulated into poly (D, L-lactic-co-glycolic acid) poly (ethylene glycol) (PLGA-PEG) nanoparticles for local treatment. Materials and Methods: PLGA: PEG triblock copolymers were synthesized by ring-opening polymerization of D, L-lactide and glycolide as an initiator. The bulk properties of these copolymers were characterized using 1H nuclear magnetic resonance spectroscopy and Fourier transform infrared spectroscopy. In addition, the resulting particles were characterized by scanning electron microscopy. Results: The chrysin encapsulation efficiency achieved for polymeric nanoparticles was 70% control of release kinetics. The cytotoxicity of different concentration of pure chrysin and chrysin loaded in PLGA-PEG ($5-640{\mu}M$) on T47-D breast cancer cell line was analyzed by MTT-assay. Conclusions: There is potential for use of these nanoparticles for biomedical applications. Future work should include in vivo investigation of the targeting capability and effectiveness of these nanoparticles in the treatment of breast cancer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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