한국산 표고버섯(Lentinus edodes SR-1) 균사체를 액체배양한 후 균사체로부터 추출, 정제한 PBP의 항암효과 및 면역학적 특성에 대하여 실험하였다. PBP의 항암효과는 in vitro 배양에서 암세포의 배수시간을 2배로 연장하는 활성단위 1 unit은 mouse leukemic cell인 $P_{388}$과 $L_{1210}$의 경우 1 mg 정도였으며, 인체의 장암세포인 HCT-48, HRT-18, HT-29 및 간암세포인 Hep G2의 경우 각각 4.4, 3.6, 6.6, 2.6 mg이었다. 그리고 $P_{388}$과 $L_{1210}$의 경우 배지 1 mL당 4 mg 정도, HRT-18 및 HT-29, Hep G2의 경우 9 mg의 PBP를 첨가했을 때 암세포를 사멸시키는 것으로 나타났다. $P_{388}$과 $L_{1210}$, HCT-48, Hep G-2의 PBP 처리에 따른 암세포의 크기 분포도 변화는 PBP를 처리하지 않은 대조군에 비하여 시간이 경과함에 따라, 그리고 PBP의 농도가 증가함에 따라 비례적으로 적은 쪽으로 이동하였다. In vivo 실험에서 대조군보다 PBP를 첨가한 군에서 비장의 무게가 증가하였으며, 용혈반 형성실험에서 PBP를 투여한 군이 대조군에 비하여 항체 형성세포가 2배로 증가하였다.
There has been continuing interest in the development of synthetic and natural compounds that modify the immune response particularly for the treatment of AIDS and cancer. During the past fifty years, numerous scientific studies have been published on ginseng. Modem human studies have investigated preventive effect of ginseng on several kinds of cancer, its long term immunological effect on HIV patients, its effect on cell mediated immune functions in healthy volunteers. Similarly non clinical studies on animal model system have studied the chemopreventive action of ginseng on cancer and immunological properties of ginseng. The precise mechanism of action of ginseng, however, not clearly understood. Considering its wide-ranging therapeutic effects, this study is being undertaken to elucidate the general mode of action of ginseng, especially to test our hypothesis that its biological action may be mediated by the immune system.
To clarify the activating effects of Buthus martensi Karsch on immunological function, its effect on primary and secondary antibodies production in mice of various ages was investigated. Buthus martensi Karsch increased the number of both antibody producing cells(anti-IgM and anti-IgG producing plaque forming cells, PFC) and phagocytic activity of peritoneal macrophage. Futhermore, these phenomena were significantly increased with aging in mice. Buthus martensi Karsch also increased natural killer cell activity concerning to cancer immunology. These results suggest that Buthus martensi Karsch markedly increases the reduced activity in the elderly and activates the immune response in senescence mice.
In this study, comparative replicational properties of Hyphantria cunea nucleopolyhedrovirus (HycuNPV) in Lymantria dispar (IPLB-LdElta) and Spodoptera frugiperda (IPLB-Sf21) cell lines were investigated. Our microscopic observations showed that cytopathic effects (CPEs) in LdElta cells appeared 12 h later than those in Sf21 cells. Whereas polyhedral inclusion bodies (PIBs) formed at 48 h postinfection (p.i.) in LdElta cells, it formed at 36 h p.i. in Sf21 cells. Extracellular virus production determined according to the 50% tissue culture infective dose ($TCID_{50}$) method in LdElta cells started about 12 h later when compared with Sf21 cells. Titers of extracellular virus in LdElta and Sf21 cells were calculated as $1.77{\times}10^9$ plaque forming units (PFU)/ml and $5.6{\times}10^9PFU/ml$, respectively, at 72 h p.i. We also showed that viral DNA replication began at 12 h p.i. in both cell lines. Viral protein synthesis was determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and polyhedrin synthesis was observed at 12 h p.i. in both cell lines. The results indicate that while the synthesis of macromolecules is 12 h later and production of extracellular virus is almost 3-fold lower in LdElta cells compared with those in Sf21 cells, the LdElta cell line is still a productive cell line for infection of HycuNPV.
Objective : Lonicerae Flos has detoxifying properties and been used as antipyretic, antibacterial and antitumor. Fermentation of herbal medicine is known to increase the absorption, enhance effectiveness, decrease herbal toxicity and reduce side-effects. This study was performed to measure the effects of fermented Lonicerae Flos on influenza A/WSN (H1N1) virus replication. Material and Methods : Lonicerae Flos was fermented by Lactobacillus casei PM1. Fermented Lonicerae Flos was treated for 12 hours to MDCK (Mardin Darby canine kidney) cells, then cell-virulence was observed by MTT assay for 12 hours, 24 hours, and 36 hours after treatment. Following cases were conducted for 0, 10, 100, and $1000{\mu}g/ml$ concentrations of fermented Lonicerae Flos under the same time-frame; the fermented Lonicerae Flos was treated to MDCK cells before and after contamination by A-type influenza virus. The fermented Lonicerae Flos and the virus were mixed directly. The influence was observed by MTT assay and plaque assay. Results : These findings suggest that the fermented Lonicerae Flos inhibited the virulence of influenza A virus in MDCK cells and suppressed the plaque forming colonies induced by influenza A virus. Furthermore, pretreatment with fermented Lonicerae Flos was more effective than post-treatment. The titer of influenza virus was reduced for all before and after influenza A virus inoculation.
Effects of Astragali radix extract (AG) on the humoral immunotoxic responses of zinc chloride (Zn) were studied in ICR mice. Mice were divided into 4 groups (10 mice/group), and Zn was given to the mice, 1 hr after i.p. injection with 0.5 g/kg of AG, by i.p. injection daily for 10 days at a dose of 25 mg/kg. Mice were immunized and challenged with sheep red blood cells (SRBC). Zn treatment increased the relative weight of spleen compared with those in controls, but decreased the hemagglutination (HA) titer 2-mercaptoethanol-resistant HA (MER-HA) titer and splenic plaque forming cells (PFC). AG treatment significantly increased the relative weight of spleen, HA titer and PFC compared with those in controls. Combination of Zn and AG significantly increased the relative weight of spleen compared with those in controls, but decreased the HA titer, MER-HA titer and PFC. The relative weight of spleen was significantly increased in the Zn and AG combination group than those in Zn alone treatment group. But the HA titer, MER-HA titer and PFC were slightly increased in the group of combination. These results suggest that AG might slightly restore humoral immune responses lowered by an excess of zinc.
The antitumor components of the protoplast fusants of Lentinula edodes and Ganoderma lucidum were examined for immunological activity to elucidate the mechanism of their antitumor activity. They did not show any direct cytotoxicity against tumor cells. But being examined for immunopotentiation activity, they increased the number of colonies in the bone marrow stem cells to 3.0 times. They also increased the activities of the acid phosphatase in activated macrophages to 2.1 times and the secretion of nitric oxide in RAW 264.7 to 2.2 times, respectively. They activated the components of the alternative complement pathway. In humoral immunity. they increased the activities of the alkaline phosphatase in differentiated B cells to 1.6 times and the number of plaque forming cells to 1.8 times, respectively. In cellular immunity, they restored the depressed response of delayed type hypersensitivity in tumor bearing mice to normal level.
영지가 면역계에 미치는 영향을 살펴보기 위해, 국내에서 자생하는 자실체로부터 분리된 균사를 액내배양하여 얻은 균사체를 알칼리로 추출하였다. 영지의 알칼리 추출물은 in vitro에서 alternative 경로는 물론 classical 경로에 의해 보체계를 활성화시켰으며, 알칼리 추출물에 의해 활성화된 C3는 면역전기영동에서도 확인 되었다. 또한, 영지의 알칼리추출물은 mouse의 망내계에 존재하는 macrophage를 활성화 시켜 이물질인 carbon에 대한 탐식기능을 증진시켰으며, 항체생산을 자극하여 mouse의 용혈반 형성세포수를 증가시킴을 알 수 있었다. 알칼리 추출물의 성분을 분석한 결과, 당 10%와 단백질 58%로 4종의 단당류와 16종의 아미노산으로 이루어진 단백다당류로 추정되었다.
One of water and/or methanol extracts from 14 herbal deugs which were screened using murine splenocytes showed immunosuppressive activities previously. After water extract from Xanthium strumarium was treated with chloroform. $100 \mu{g/ml}$ of water layer (XS-WCI) has very strong immunosimulating activities tested by $^3H$-thmidine incorporation (control as $100 \mu{g/ml}$, 26345 cpm was 69515 cpm). MLR also appears to be simulated strongly (control vs $100 \mu{g/ml}$, 4962 cpm vs 78688 cpm). When $100 \mu{g/ml}$ of XS-WCI and $0.8 \mu{g/ml}$ of concanavalin a (ConA) were added. more $^3H$-thymidine were incorporated significantly, compared with $0.8 \mu{g/ml}$ of ConA only. In contrast with ConA. results from $5 \mu{/ml}$ of lipopolysaccharide (LPS) and $100 \mu{g/ml}$ of XS-WCI were not different. compared with $5\mu{/ml}$of LPS only. These results indicated the responses of XS-WCI to B cell and T cell may be different. XS-WCI was injected intraperitoneally (10 mg/kg. 50mg/kg/ 100 mg/kg) for 4 days or 10 days and tested secretion of IgM or IgG by direct and indirect hemolytic plaque-forming cell assays, respectively. Numbers of hemolytic plaques for both IgM and IgG were increased significantly. Especially, secretion of IgGs was increased more than 10 times. After administration of XS-WCI for 7 days (50 mg/kg. 100 mg/kg) splenomegaly deu to graft vs host reaction was observed. Human lymhocytes separated from whole blood by Ficoll-Hypaque method were also proliferated after treatment of $10 \mu{g/ml}$ and $50 \mu{g/ml}$ of XS-WCI. As seen in murine lymphocytes, human lymphocyte proliferation was increased synergistically after treatment with both of XS-WCI and phytohemagglutinin (PHA). It appears that XS-WCI may have potential immunosimulating activities and that it remains to be purified further for isolation of active components.
The effects of methidathion on humoral immune response were studied in BALB/c mice. 0.5 or 5.0 mg/kg/day methidathion were administered orally for 14 days. The parameters examined to assess apparent toxicity of methidathion included changes of body weight, relative weight of spleen, thymus, sidney and liver, and viable spllenic cell numbers. To evaluate the humoral immune response, thymus, kidney and liver, and viable splenic cell numbers. To evaluate the humoral immune resopnse, the plaque forming cell(PFC) responses sheep the red blood cells (SRBC) and the lovels of serum IgG to hen egg lysozyme (HEL) were determined. No alterations were observed in changes of body weights, relative organ weights and the numbers of viable splenocytes by exposure to any dose of methidathion. At the dose of 0.5mg/kg only PFC response was decreased, whereas both PFC response and the level of serum IgG were decreased significantly at the dose of 5.0 mg/kg. These results indicate that exposure to methidathion may cause sup[pression of humoral immune reponse in mice without overt changed in lymphoid organ weight or viability of splenocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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