This study was carried out to determine the effects of plant growth regulators on cell culture and organogenesis from Sicyos angulatus L. using explants of leaves, stems and cotyledons. Optimal callus induction for S. angulatus was obtained on MS medium with 0.1mg/$\ell$ BA and 2.0mg/$\ell$ 2,4 -D from cotyledons, 0.1mg/$\ell$ BA and 5.0mg/$\ell$ NAA from leaves explants, Optimal media for subculture and growth of S. angulatus callus were 1/2 MS medium with 0.1mg/$\ell$ BA and 1.0mg/$\ell$ 2,4 -D for solid culture, and 0.1mg/$\ell$ 2,4-D for suspension culture. Many adventitious roots with some shoots were formed were formed from leaf and cotyledon explants of S. angulatus during callus induction with optimal combinations of plants growth regulators.
Single cells obtained from suspension culture of mature embryo-derived callus in wheat(Triticum aestivum L. cv Jang Kwang) were cultured to regenrated into the plantlet. Cell clusters and embryogenic calluses were efficiently developed from when the single cells clutured on the MS medium supplemented with 10${\mu}{\textrm}{m}$ 2,4-D. Upon transfer to hormone-free MS medium containing 10 mg/I AgNO3, embryogenic calluses gave rise to shoots, probably through somatic embryogenesis.
Won yong Song;In, Jun-Gyo;Lim, Yong-Pyo;Park, Kwan-Sam
Journal of Plant Biotechnology
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v.1
no.2
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pp.117-121
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1999
Effects of jasmonic acid treatment, UV-B and white light treatment on the anthocyanin biosynthesis and cell growth were investigated using the cell suspension culture system of grape (Vitis vinifera L.). Cell growth was not affected by white light irradiation, while it was remarkably suppressed by UV-B irradiation from 8 to 32 h. Anthocyanin accumulation dramatically increased after 16 h from irradiation of UV-B. Simultaneous treatment of jasmonic acid and UV-B increased anthocyanin accumulation by 10-fold. The cell division was restored when anthocyanin was abundantly accumulated after 32 h from UV-B irradiation. Optimum concentration of jasmonic acid was found to be 5 uM for maximum accumulation of anthocyanin. Application of jasmonic acid to grape suspension cells rapidly induced the expression of CHS gene after 2 h from treatment and showed maximum level at 32 h. Simultaneous treatment of jasmonic acid and light also induced CHS gene expression after 2 h, but the maximum level of CHS transcript was observed at 16 h with white light and 8 h with UV-B exposure. The synergistical effects could be explained by the defense mechanism that UV irradiation is mediated in part by alterations in JA and its signaling pathway.
Green fluorescent protein (GFP) is an attractive reporter for bioprocess monitoring. A fluorescence-based method was developed to quantify GFP levels in transgenic plants and protein extracts. In this study, GFP was produced and secreted from suspension cells derived from transgenic rice. The RAmy3E promoter placed before the GFP gene controlled by sugars such as sucrose. The effects of sucrose concentration on the secretion of GFP and total protein into the medium were investigated in batch suspension culture. It was possible, therefore, to induce the expression of the GFP by removing sucrose from the cultured media or by allowing the rice suspension cells to deplete sucrose catabolically. The dry cell weight (7.06 g/L) and GFP level were detected as highest at 12%, 3% sucrose after 20 day culture, respectively. However secreted GFP fluorescence at the other sucrose concentrations (6%, 12%, 18% and 24%) were a little amount in media.
Oh, Myung Jin;Na, Hye Ryun;Choi, Hong-Keun;Liu, Jang Ryol;Kim, Suk Weon
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.1
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pp.87-92
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2008
An improved protocol for high frequency plant regeneration via somatic embryogenesis from zygotic embryo-derived cell suspension cultures of watershield (Brasenia schreberi) was developed. Zygotic embryos formed pale-yellow globular structures and white friable callus at a frequency of 80% when cultured on halfstrength MS medium supplemented with $0.3mg\;l^{-1}$ 2,4-D. However, the frequency of formation of pale-yellow globular structures and white friable callus decreased slightly with increasing concentrations of 2,4-D up to $3mg\;l^{-1}$, where the frequency reached ~50% of the control. Cell suspension cultures from zygotic embryoderived white friable callus were established using half-strength MS medium supplemented with $0.3mg\;l^{-1}$ 2,4-D. Upon plating of cell aggregates on half-strength MS basal medium, approximately 8.3% gave rise to somatic embryos and developed into plantlets. However, the frequency of plantlet development from cell aggregates was sharply increased (by up to 55%) when activated charcoal and zeatin were applied. Regenerated plantlets were successfully transplanted to potting soil and grown to normal plants in a growth chamber. The distinctive feature of this study is the establishment of a high frequency plant regeneration system via somatic embryogenesis from zygotic embryo-derived cell suspension cultures of water-shield, which has not been previously reported. The protocol for plant regeneration of watershield through somatic embryogenesis could be useful for the mass propagation and transformation of selected elite lines.
The effects of light on the production of anthocyanin and betacyanin in cell suspension cultures of Vitis vinifera and Phytolacca americana were investigated. The cell growth of V.vinifera was little affected by exposure to light, but that of P.americana was markedly increased by light than in the dark In suspension cultures of V vinifera maximum accumulation of anthocyanin was observed during the stationary phase in continuous light By contrast, in suspension cultures of R americana, accumulation of betacyanin occured in parallel with cell division which showed two peaks after 4 days and 8 days of culture in continuous light whereas in continuous dark accumulation of anthocyanin and betacyanin did not occured However treatment of light interrupting for l, 12, and 24 h after 4 days in cell suspension. cultures of remarkably showed a slight anthocyanin accumulation, but after 8 days of culture remarkably accumulated by light interrupting for more than 12 h. In cultures of P. americana, the light treatment was more effective at 4th day than at 7th day after culture, but betacyanin accumulation was decreased again in the dark after light treatment These result indicate that the difference of light responses exist between the V.vinifera and the betacyanin of P. americana though cell suspension culture systems.
The growth kinetics and the production of $\beta$-glucuronidase from transgenic tobacco's suspension culture was investigated in the flask culture and a 2.5 L bubble column reactor. The growth of bubble column reactor was similar to that of flask culture. However, in the bubble column reactor, the production of $\beta$ -glucuronidase reached 2850 U/mg (85-fold higher than that of flask culture). In both case, the production level of $\beta$ -glucuronidase was fluctuated, which was resulted from periodical degradation of the protein. Sucrose is important component in plant culture medium. Twice addition of sucrose in bubble column reactor could not improve cell growth, since other components in a medium were already depleted. However, the addition of sugar decreased cell size, which facilitated the operation of bioreactor. The production of $\beta$ -glucuronidase was continuously increased, however final concentration of $\beta$ -glucuronidase was similar to that without sucrose addition.
A method for long-term conservation of somatic embryos of Eleutherococcus senticosos was described. Suspension cultured globular somatic embryos were successfully conservated for 36 months at $4^{\circ}C$. The embryos resumed growth within two weeks when returned to MS liquid medium containing $0.2\;mg/{\ell}$. 2,4-dichlorophenoxy acetic acid. The optimal condition for cell proliferation was achieved when somatic embryos cultured at $32^{\circ}C$ in 1/3 MS liquid medium, and about 1.2 g of embryogenic cell was induced from 150 globular embryos after 6 weeks of suspension culture. The embryogenic cells produced from these somatic embryos exhibited normal plant regeneration on auxin-free medium.
Embryogenic calli were induced from mature seed scutella of anther culture-derived rice variety Zhonghua 8. Cell suspension cultures were initiated from friable embryogenic calli and utilized as source material for protoplast isolation. Generally, the older and finer cell suspensions gave higher protoplast yields than younger suspension cultures. Protoplasts exhibited sustained cell division and formed microcalli when cultured in KPR medium supplemented with 0.5 mg $l^{-1}$ 2,4-D, 1.0 mg $l^{-1}$ NAA and 0.5 mg $l^{-1}$ zeatin using the agarose embedding procedure without feeder cells. Protoplast plating efficiencies ranged from 0.20 to 0.54%. Microcalli were transferred to MS medium supplemented with 2.0 mg $l^{-1}$ kinetin and 0.5mg $l^{-1}$ NAA for plant regeneration. The regeneration frequencies were 2 to 12%, depending on the cell suspension lines of Zhonghua 8. The plants were transferred to the glasshouse and were fertile.
Kim, Seok-Won;In, Dong-Soo;Jung, Won-Joong;Woo, Je-Wook;Jung, Min;Yoo, Jang-Ryul
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.25
no.6
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pp.501-505
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1998
Conditions for high frequency plant regeneration from cryopreserved embryogenic cell suspension cultures derived from hypocotyl explants of cucumber (Cucumis sativus L.) are described. Cells cryoprotected with a mixture of 2 M DMSO and 0.4 M sucrose exhibited a regeneration frequency of 85%. However, cells cryoprotected with different concentrations of glycerol showed no regeneration after cryopreservation. Pretreatment of cells in a high osmotic medium was not necessary to the process. Upon transfer to MS medium supplemented with 1 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, regenerated calli gave rise to numerous somatic embryos, then underwent development into plantlets.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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