• 제목/요약/키워드: phnF gene

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Pseudomonas sp. strain DJ77로 부터 phenanthrene 분해 유전자군의 클로닝과 대장균에서의 발현 (Molecular Cloning of a Gene Cluster for Phenanthrene Degradation from Pseudomonas sp. Strain DJ77 and Its Expression in Escherichia coli)

  • 김영창;윤길상;신명수;김흥식;박미선;박희진
    • 미생물학회지
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    • 제30권1호
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    • pp.1-7
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    • 1992
  • Pseudomonas sp. DJ77 의 chromosomal DNA로 부터 6-8kb XhoI 절편 상에 존재하는 phenanthrene 분해에 관련된 유전자군을 vector pBLUESCRIPT SK(+)에 클로닝하였다. 이렇게 얻은 재조합 plasmid인 pHENX7을 가지고 있는 JM101 균주는 3-methylcatechol을 노란색의 meta-cleavage 화합물로 전환학 수 있었다. 그러자 삽입된 절편의 방향이 반대가 되도록 제조한 pHENX7R 은 extradiol dioxygenase 활성을 나타내지 않기 때문에 전사방향을 알 수 있었다. pHENX7과 이의 유도체들을 지니는 JM101 균주에서 PhnC(24kDa), PhnD(31 kDa), PhnE(34 kDA), PhnF(15 kDa) 의 4 polypeptide 를 확인학 수 있었고 개개의 유전자의 위치와 범위를 알 수 있었다. 유전자 순서는 phnC-phnD-phnE-phnF-phnG 이었으며, phnD, phnE, phnG 는 각기 gluthione S-transferase, meta-cleavage compound hydrolase, extradiol dioxygenase, metacleavage compound dehydrogenase 의 유전자이었다.

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Pseudomonas sp. Strain DJ77에서 phnF 유전자의 구조 (Structure and Function of the phnF Gene of Pseudomonas sp. Strain DJ77)

  • 이성훈;김성재;신명수;김치경;임재윤;이기성;민경희;김영창
    • 미생물학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.92-96
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    • 1997
  • Pseudomonas sp. strain DJ77로부터 클로닝한 catechol 분해와 관련된 phnDEFG 유전자들이 존재하는 pHENX7에서 phnF 유전자의 염기서열을 밝혔다. Extradiol dioxygenase 유전자인 phnE와, 2-hydroxymuconic semialdehyde dehydrogenase를 생산하는 phnG 유전자 사이에 존재하는 유전자 phnF는 432 bps로 된 하나의 open reading frame(ORF)으로 존재하였고, 여기서 유추한 아미노산은 143개로 분자량 13,859 dalton의 polypeptide를 만들어 내고 있다. phnF 유전자는 Sphingomonas sp. strain HV3 catE 유전자 부위와 sphingomonas yanoikuyae B1의 xylE와 xylG 사이에 존재하는 ORF 부위의 염기서열과 각각 99%, 68.6%의 상동성을 가지고 있었다. 또한 PhnF 단백질의 아미노산서열은 citrobacter freundii DSM30040의 orfY 부위의 아미노산서열과 62.3%의 상동성이 있었다.

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Sphingomonas chungbukensis DJ77 균주에서 2- hydroxychromene-2-carboxylate isomerase를 암호화하는 phnS 유전자의 염기서열과 상동성 분석 (Sequence and phylogenetic analysis of the phnS gene encoding 2-hydroxychromene-2-carboxylate isomerase in Sphingomonas chungbukensis DJ77)

  • 엄현주;강민희;김영필;김성재;김영창
    • 미생물학회지
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    • 제39권3호
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    • pp.123-127
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    • 2003
  • Sphingomonas chungbuken교 DJ77은 phenanthrene을 단일 탄소원과 에너지원으로 이용하여 살아갈 수 있다. pUPXS는 phenanthrene과 naphthalene분해를 위해 필요한 2-hydroxychromene-2-carboxylate (HCCA) isomerase를 암호화하는phnS유전자를 포함한다. 본 논문에서는 phnS유전자가 포함된 3271 bp의 염기 서열을 결정하였다. 이 유전자는 ATG를 개시코돈으로 사용하며, TAA를 종결 코돈으로 사용하고 있다. 또한 개시 코돈의 5 bp앞쪽으로 GGAA라는 ribosomal binding site를 갖는다. phnS는 총 594 bP의 open reading frame을 포함하며,158개의 아미노산으로 구성되었다. phns를 구성하는 아미노산서열은 S. aromaticivorans F199의 유사서열과 87%의 유사성을 나타냈다. phns 유전자는 biphenyl dioxygenase를 구성하는 2,3-dihydroxybiphenyl 1,2-dioxygenase를 암호화하는 phnQ와 ferredoxin를 암호화 하는 phnR과 같은 operon을 이루며, 이들 유전자의 downstream에 위치하고 있다.

대장균에서 분리된 din (damage-inducible)과 tin (temperature-inducible) 유전자들의 특성 (Characterization of the din (damage-inducible) and tin (temperature-inducible) Genes Isolated from Escherichia coli)

  • 백경희
    • 미생물학회지
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    • 제29권6호
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    • pp.392-396
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    • 1991
  • Pseudomonas sp. DJ77의 chromosomal DNA로부터 6.9kb XhoI 절편 상에 존재하는 phenanthrene 분해에 관련된 유전자군을 vector pBLUESCRIPT SK(+)에 클로닝하였다. 이렇게 얻은 재조합 plasmid인 pHENX7을 가지고 있는 JM101 균주는 3-methylcarechol을 노란색의 meta-cleavage 화합물로 전환할 수 있었다. 그러나 삽입된 절편의 방향이 반대가 되도록 제조한 pHENX7은 extradiol dioxygenase 활성을 나타내지 않기 때문에 전사방향을 알 수 있었다. pHENX7과 이의 듀도체들을 지니는 JH101균주에서 PhnC(24kDa), PhnD(31KDa), PhnE(34kDa), PhnF(KDa)의 4 polypeptide를 확인 할 수 있었고 개개의 유전자의 위치와 범위를 알 수 있었다. 유전자 순서는 phnC-phnD-phnE-phnF-phnG이었으며, phnC, phnD, phnE, phnF, phnG는 각기 glutathione S-transferase, meta-cleavage compound hydrolase extradiol dioxygenase, meta-cleavage compound dehydrogenase의 유전자이었다.

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Molecular Characteristics of Pseudomonas rhodesiae Strain KK1 in Response to Phenanthrene

  • Kahng, Hyung-Yeel;Nam, Kyoung-Phile
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제12권5호
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    • pp.729-734
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    • 2002
  • Radiorespirometric analysis revealed that Pseudomonas sp. strain KKI isolated from a soil contaminated with petroleum hydrocarbons was able to catabolize polycyclic aromatic hydrocarbons such as phenanthrene and naphthalene. The rate and extent of phenanthrene mineralization was markedly enhanced when the cells were pregrown on either naphthalene or phenanthrene, compared to the cells grown on universal carbon sources (i.e., TSA medium). Deduced amino acid sequence of the Rieske-type iron-sulfur center of a putative phenanthrene dioxygenase (PhnAl) obtained from the strain KKI shared significant homology with DxnAl (dioxin dioxygenase) from Spingomonas sp. RW1, BphA1b (biphenyl dioxygenase) from Spingomonas aromaticivorans F199, and PhnAc (phenanthrene diokygenase) from Burkholderia sp. RP007 or Alcaligenes faecalis AFK2. Northern hybridization using the dioxygenase gene fragment cloned from KKI showed that the expression of the putative phn dioxygenase gene reached the highest level in cells grown in the minimal medium containing phenanthrene and $KNO_3$, and the expression of the phn gene was repressed in cells grown with glucose. In addition to the metabolic change, phospholipid ester-linked fatty acids (PLFA) analysis revealed that the total cellular fatty acid composition of KKI was significantly changed in response to phenanthrene. Fatty acids such as 14:0, 16:0 3OH, 17:0 cyclo, 18:1$\omega$7c, 19:0 cyclo increased in phenanthrene-exposed cells, while fatty acids such as 10:0 3OH, 12:0, 12:0 2OH, 12:0 3OH, 16:1$\omega$7c, 15:0 iso 2OH, 16:0, 18:1$\omega$6c, 18:0 decreased.