Sopheareth, Mao;Chan, Sarun;Naing, Kyaw Wai;Lee, Yong Seong;Hyun, Hae Nam;Kim, Young Cheol;Kim, Kil Yong
The Plant Pathology Journal
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v.29
no.1
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pp.67-76
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2013
A chitinolytic bacterial strain having strong antifungal activity was isolated and identified as Burkholderia cepacia MPC-7 based on 16S rRNA gene analysis. MPC-7 solubilized insoluble phosphorous in hydroxyapatite agar media. It produced gluconic acid and 2-keto-gluconic acid related to the decrease in pH of broth culture. The antagonist produced benzoic acid (BA) and phenylacetic acid (PA). The authentic compounds, BA and PA, showed a broad spectrum of antimicrobial activity against yeast, several bacterial and fungal pathogens in vitro. To demonstrate the biocontrol efficiency of MPC-7 on late blight disease caused by Phyto-phthora capsici, pepper plants in pot trials were treated with modified medium only (M), M plus zoospore inoculation (MP), MPC-7 cultured broth (B) and B plus zoospore inoculation (BP). With the sudden increase in root mortality, plants in MP wilted as early as five days after pathogen inoculation. However, plant in BP did not show any symptom of wilting until five days. Root mortality in BP was markedly reduced for as much as 50%. Plants in B had higher dry weight, P concentration in root, and larger leaf area compared to those in M and MP. These results suggested that B. cepacia MPC-7 should be considered as a candidate for the biological fertilizer as well as antimicrobial agent for pepper plants.
Poly(3-hydroxy-5-phenylvalerate) [P(3HPV)] was efficiently accumulated from 5-phenylvalerate (5PV) in Pseudomonas putida BM01 in a mineral salts medium containing butyric acid (BA) as the cosubstrate. A nove aromatic copolyester, poly(5 mol% 3-hydroxy-4-phenylbutyrate-co- 95 mol% 3-hydroxy-6-phenylhexanoate) [P(3HPB-co-3HPC)] was also synthesized from 6-phenylhexanoate (6PC) plus Ba. The two aromatic polymers, P(3HPV) and P(3HPB-co-3HPC), were found to be amorphous and showed different glass-transition temperatures at $15^{\circ}C$ and $10^{\circ}C$, respectively. When the bacterium was grown ina medium containing 20 mM 5PV as the sole carbon source for 140 h, 0.4 g/l of dry cells was obtained in a flask cultivation and 20 wt% of P(3HPV) homopolymer was accumulated in the cells. However, when it was grown with a mixture of 2 mM 5PV and 50 mM BA for 40 h, the yield of dry biomass was increased up to 2.5 g/l and the content of P(3HPV) in the dry cells was optimally 56 wt%. This efficient production of P(3HPV) homopolymer from the mixed substrate was feasible because BA only supported cell growth and did not induce any aliphatic PHA accumulation. The metabolites released into the PHA synthesis medium were analyzed using GC or GC/MS. Two $\beta$-oxidation derivatives, 3-phenylpropionic acid and trans-cinnamic acid, were found in the 5V-grown cell medium and these comprised 55-88 mol% of the 5PV consumed. In the 6PC-grown medium containing Ba, seven ${\beta}$-oxidation and related intermediates were found, which included phenylacetic acid, 4-phenylbutyric acid, cis-4-phenyl-2-butenoic acid, trans-4-phenyl-3-butenoic acid, trans-4-phenyl-2-butenoic acid, 3-hydroxy-4-phenylbutyric acid, and 3-hydroxy-6-phenylhexanoic acid. Accordingly, based on the metabolite analysis, PHA synthesis pathways from the two aromatic carbon sources are suggested.
This study was conducted to evaluate the allelopathic effect of aqueous extract of Ganghwa domestic mugwort (Artemisia spp.) on vegetables and its related allelo-chemicals. When the receptor vegetables, such as Chinese cabbage, lettuce, and red radish, were treated with aqueous extract obtained from Sajabalssuk (A. $sp^*I$), Ssajuarissuk (A. $sp^*II$) or Ssajarissuk (A. $sp^*III$), their germination rate, leaf number, plant height, and root length were restricted with increasing concentration of aqueous extract. Allelopathic effect was the highest in radish, than lettuce and Chinese cabbage in order. The growth of topplant were more inhibited then root growth observing in restriction of plant height, root length, and chlorophyll contents. The plant height, the root length of red radish were 53.3 and 61.2% and their fresh weights were 19.8 and 26.4% compared to those of controls, respectively. A. $sp^*III$ showed the highest allelopathic effect among the donor plants. In HPLC analysis, 7 phenol compounds were identified in A. $sp^*I$ and A. $sp^*II$, and, in A. $sp^*III$, and hydroxybenzoic acid and phenylacetic acid were further identified as allelochemicals. It is considered that their plant growths were variously inhibited by the amounts and types of allelochemicals in aqueous extracts. To increase the productivity of farm land after cultivation of mugwort, these results can be useful to select the following field crops.
An efficient system for in vitro bulblet formation of Lilium oriental hybrids(cvs). Casa Blanca and Siberia is described. Transverse thin cell layer(tTCL)(1mm thick) explants of 'Casa Blanca' formed bulblets at a frequency of 97.7% when cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1mg/L 2,4 dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D) (On average 15.6 bulblets were formed per explant). The frequency of bulblet formation was drastically reduced when the explant ghickness was thinner than 1 mm. Explants from the outermost layer of bulb scale produced greater frequency of bulblet formation than middle or innermost layer. Among auxins supplemented to culture medium at 1 mg/L, 2,4-D led to greater frequency of bulblet formation on explants than dicamba, picamba, or phenylacetic acid(PAA). tTCL explants from the middle region of the outermost layer bulb scale yielded greater frequency of bulblet formation than the upper or lower region. tTCL stem explants of 'Siberia' formed bulblets at a frequency of 95.3% when cultured on MS medium with 1 mg/L 2,4-D(On average 9.1 bulblets were formed per explant). The system estabilished in this study will be useful for in vitro rapid propagation and genetic transformation of Lilium Oriental hybrids.
Kim, Bong-Hee;Seong, Baik-Lin;Mheen, Tae-Iek;Moon H. Ban
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.9
no.1
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pp.29-34
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1981
To maximize the production of penicillin amidase from Estherichia coli (ATCC 9637), the media composition and several factors affecting the engyme production during fermentation were studied. The optimal media composition was found to be; 3.5% tryptone, 1.5% monosodium glutamate and 0.5% yeast extract. The addition of 0.15% phenylacetic acid as an enzyme inducer at the initial stage of cultivation increased the engyme productivity about 5 fold. It was found that the engyme activity reached maximum within 16hr of cultivation. The maximum production of the enzyme obtained was about 102.5 units/l broth under the optimized condition. The enzyme production was markedly increased by the optimization as compared with those previously reported.
Aceclofenac is an orally effective non-steroidal anti-inflammatory agent of the phenylacetic acid derivative. Bioequivalence study of two aceclofenac preparations, the test drug (Senafe $n_{R}$: Daewon Phar-maceutical Company) and the reference drug (Airta $l_{R}$: Daewoong Pharmaceutical Company), was conducted according to the guidelines of Korea Food and Drug Administration (KFDA). Sixteen healthy male volunteers, 24$\pm$4 years old and 63.9$\pm$6.9 kg of body weight in average, were divided randomly into two groups and administered the drug orally at the dose of 100 mg as aceclofenac in a 2$\times$2 crossover study. Plasma concentrations of aceclofenac were monitored by HPLC method for 12 hr after administration. AU $Co_{-12h}$ (area under the plasma concentration-time curve from initial to 12 hr) was calculated by the linear trapezoidal method. $C_{max}$ (maximum plasma drug concentration) and $T_{max}$ (time to reach $C_{msx}$) were compiled directly from the plasma drug concentration-time data. Student's t-test indicated no significant differences between the formulations in these parameters. Analysis of variance (ANOVA) revealed that there are no differences in AU $Co_{12h}$, $C_{max}$ and $T_{max}$ between the formulations. The apparent differences between the formulations were far less than 20% (e.g., 0.25, 0.01 and 7.32 for AU $Co_{-12h}$, $C_{max}$. and $T_{max}$, respectively). Minimum detectable differences (%) between the formulations at $\alpha$=0.05 and 1-$\beta$=0.8 were less than 20% (e.g., 14.65, 12.47 and 15.46 for AU $Co_{-l2h}$, $C_{max}$ and $T_{max}$, respectively). The 90% confidence intervals for these parameters were also within $\pm$ 20% (e.g.,-10.19~10.68, -8.87~8.89 and -3.69~ 18.33 for AU $Co_{-12h}$, $C_{msx}$ and $T_{max}$, respectively). These results satisfy the bioequivalence criteria of KFDA guidelines, indicating that two formulations of aceclofenac are bioequivalent.quivalent.ivalent.ent.t.ent.
Lee, Sang-Hoon;Bidle, Kay;Falkowski, Paul;Marchant, David
Ocean and Polar Research
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v.27
no.2
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pp.205-214
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2005
From ancient Antarctic glacier ice, we extracted total genomic DNA that was suitable for prokaryotic 16S rDNA gene cloning and sequencing, and bacterial artificial chromosome (BAC) library and end-sequencing. The ice samples were from the Dry Valley region. Age dating by $^{40}Ar/^{39}Ar$ analysis on the volcanic ashes deposited in situ indicated the ice samples are minimum 100,000-300,000 yr (sample DLE) and 8 million years (sample EME) old. Further assay proved the ice survived freeze-thaw cycles or other re-working processes. EME, which was from a small lobe of the basal Taylor glacier, is the oldest known ice on Earth. Microorganisms, preserved frozen in glacier ice and isolated from the rest of the world over a geological time scale, can provide valuable data or insight for the diversity, distribution, survival strategy, and evolutionary relationships to the extant relatives. From the 16S gene cloning study, we detected no PCR amplicons with Archaea-specific primers, however we found many phylotypes belonging to Bacteria divisions, such as Actinobacteria, Acidobacteria, Proteobacteria $({\alpha},\;{\beta},\;and\;{\gamma})$, Firmicutes, and Cytophaga-Flavobacterium-Bacteroid$. BAC cloning and sequencing revealed protein codings highly identical to phenylacetic acid degradation protein paaA, chromosome segregation ATPases, or cold shock protein B of present day bacteria. Throughput sequencing of the BAC clones is underway. Viable and culturable cells were recovered from the DLE sample, and characterized by their 16S rDNA sequences. Further investigation on the survivorship and functional genes from the past should help unveil the evolution of life on Earth, or elsewhere, if any.
Diclofenac, a phenylacetic acid derivative, is a widely used non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) to provide effective relief of inflammation and pain. Nitric oxide (NO) synthesized by inducible nitric oxide synthase (iNOS) has been implicated as a mediator of inflammation. We examined the inhibitory effects of diclofenac on the induction of iNOS in RAW 264.7 macrophages which were activated with lipopolysaccharide (LPS) plus interferon-gamma $(IFN-{\gamma}).$ Treatment of RAW 264.7 cells with diclofenac and other NSAIDs (aspirin and indomethacin) significantly inhibited NO production and iNOS protein expression induced by LPS plus $IFN-{\gamma}.$ Also, diclofenac but not aspirin and indomethacin, inhibited iNOS mRNA expression and nuclear factor-kappa B $(NF-{\kappa}B)$ binding activity concentration-dependently. Furthermore, transfection of RAW 264.7 cells with iNOS promoter linked to a CAT reporter gene revealed that only diclofenac inhibited the iNOS promoter activity induced by LPS plus $IFN-{\gamma}$ through the $NF-{\kappa}B$ sites of iNOS promoter. Taken together, these suggest that diclofenac may exert its anti-inflammatory effect by inhibiting iNOS gene expression at the transcriptional level through suppression of $NF-{\kappa}B$ activation.
Seong, Baik-Lin;Son, Hyeung-Jin;Mheen, Tae-Ick;Moon H. Han
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.9
no.4
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pp.197-205
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1981
Penicillin amidase of Bacillus megaterium was recovered from the fermentation broth by adsorption on celite and immobilized by entrapping the adsorbed enzyme in acrylamide gel. The operational stability in column reactor was greatly increased by entrappment as compared with that of without entrappment. The optimum pH of the immobilized enzyme was 8.7 with broader activity profile than that of the free enzyme, while the most stable pH range appeared to be between pH 7.5 and 8.0. The optimum temperature was shifted to 5$0^{\circ}C$ from 45$^{\circ}C$ for the soluble enzyme. The values of Km and the inhibition constants for 6-APA( $K_{ia}$ ) and phenylacetic acid ( $K_{ip}$ ), were 4.55 mM, 36.5mM, and 10.5mM, respectively. No significant internal pore diffusion limitation was found since the value of effectiveness factor was 0.95. The operational half life in a column reactor at pH 8.0 was 6.8 days at 4$0^{\circ}C$ and 47 days at 3$0^{\circ}C$, whereas that of without entrappment was only 1 day and 4 days, respectively. The performance of a batch and a column reactor was also discussed with respect to the productivity. The results demonstrated that the entrappment of an adsorbed enzyme for the enhancement of the operational stability of the immobilized enzyme was useful especially when an extracellular enzyme was used.
Reinforced Calcium-alginate gel entrappment method for enzyme immobilization is described with an example of penicillin amidase from Bacillus megaterium KFCC 10029, a partially constitutive mutant of B. megaterium ATCC 14945. Penicillin amidase recovered from the fermentation broth by adsorption on celite is mixed with alginate and gelatin solution, and cast into a pellet or noodle form by coagulation in calcium salt solution followed by crosslinking with glutaraldehyde. Optimum pH and temperature of the immobilized enzyme preparation were 8.0 and 6$0^{\circ}C$, respectively. Kinetic constants such as Km value and the inhibition constant of 6-APA and phenylacetic acid were 2.6 mM, 7.4 mM and 21.2 mM, respectively. The enzyme leakage from the adsorbent during operation was successfully prevented owing to the increase of physical strength of gel coat. The half lives in a column reactor were 6 and 30 days at the respective temperature of 4$0^{\circ}C$ and 3$0^{\circ}C$, which were the 6-8 fold increased values as compared with those of without entrappment. The results highly recommended the use of reinforced Calcium-alginate gel entrappment method for the enhancement of physical strength and the operational stability of alginate gel entrapped enzyme.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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