Ji, Hye-Young;Kim, Sook-Jin;Lee, Hong-Il;Lee, Seung-Seok;Lee, Hye-Sook
Proceedings of the PSK Conference
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2002.10a
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pp.402.1-402.1
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2002
The LC/MS/MS method for the simultaneous determination of sildenafil and its active metabolite N-demethylsildenafil in human plama was developed. Sildenafil. its active metabolite and the internal standard. DA-8159 were extracted form human plasma by liquid-liquid partitioning. A reverse-phase HPLC separation was performed on Luna phenylhexyl column with the mixture of acetonitrile-5 mM ammonium formate (55:45. v/v) as mobile phase. (omitted)
In recent years, there has been a globally increasing application of herbal medicines and dietary supplements to treat various chronic diseases and to promote health. However, there are increasing clinical reports on the organ toxicities associated with consumption of herbal medicines. In general, most xenobiotics are metabolized by Phase I reaction(the main enzyme : cytochrome P450) and Phase II reaction. However, reactive oxygen species, free radicals and electrophils are produced inevitably during xenobiotics metabolism. These toxic species and metabolites are increased whenever the endogenous substances and enzymes for Phase II reaction not available. In addition, herbal-drug interactions are pharmacokinetic, with most actually or theoretically affecting the metabolism of the affected product by way of the cytochrome P450 enzymes. This review updated the knowledge on metabolic activation of herbal components and its clinical and toxicological implications. Also, the possible way for preventing the side-effects by herbal-medicine use was suggested.
To investigate the effect of the circadian variations on the toluene metabolism, 50% toluene in olive oil (0.2 m1/100 g body weight) was intraperitoneally administered to the rats every other day for 6 days both in the night; 24:00 and the day; 12:00. Each group of animals was sacrificed at 8 hr after last injection of toluene. Hepatic microsomal aniline hydroxylase activity was more increased in control rats of night phase than those of day phase. On the other hand, the activities of hepatic benzylalcohol dehydrogenase in control rats of night phase showed the similiar value with that in those of day phase and in case of toluene treatment, these enzyme activities in rats of night phase were rather more decreased than those of day phase. Furthermore, hepatic benzaldehyde dehydrogenase activities were more or less higher in the control rats of night phase than those of day phase and by toluene treatment, enzyme activities of rats of night phase were somewhat decreased than those of day phase. in vitro, benzylalcohol or benzaldehyde inhibited the activities of benzylalcohol or aldehyde dehydrngenase prepared from the rats liver supematant. There were no differences in urinary hippuric acid contents between the night phase and day phase both in the control and toluene treated group. The increasing rate of liver weight per body weight (%), serum xanthine oxidase activities were higher in rats of night phase than in those of day phase by toluene treatment. In conclusion, these results indicate that the producing rate of benzylalcohol and benzaldehyde from toluene may be higher in rats of night phase than those of day phase.
Mycoplasma ovipneumoniae (Mo) is difficult to culture, resulting in many difficulties in related research and application. Since nucleotide metabolism is a basic metabolism affects growth, this study conducted a "point-to-point" comparison of the corresponding growth phases between the Mo NM151 strain and the Mycoplasma mycoides subsp. capri (Mmc) PG3 strain. The results showed that the largest difference in nucleotide metabolism was found in the stationary phase. Nucleotide synthesis in PG3 was mostly de novo, while nucleotide synthesis in NM151 was primarily based on salvage synthesis. Compared with PG3, the missing reactions of NM151 referred to the synthesis of deoxythymine monophosphate. We proposed and validated a culture medium with added serine to fill this gap and prolong the stationary phase of NM151. This solved the problem of the fast death of Mo, which is significant for related research and application.
RNA metabolism plays a central role in regulating of T cell-mediated immunity. RNA processing, modifications, and regulations of RNA decay influence the tight and rapid regulation of gene expression during T cell phase transition. Thymic selection, quiescence maintenance, activation, differentiation, and effector functions of T cells are dependent on selective RNA modulations. Recent technical improvements have unveiled the complex crosstalk between RNAs and T cells. Moreover, resting T cells contain large amounts of untranslated mRNAs, implying that the regulation of RNA metabolism might be a key step in controlling gene expression. Considering the immunological significance of T cells for disease treatment, an understanding of RNA metabolism in T cells could provide new directions in harnessing T cells for therapeutic implications.
Kim, Un-Yong;Han, Sang-Beom;Kwon, Oh-Seung;Yoo, Hye-Hyun
Mass Spectrometry Letters
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v.2
no.1
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pp.20-23
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2011
The purpose of this study is to investigate the in vitro metabolism of hesperetin, a bioflavonoid. Hesperetin was incubated with rat liver microsomes in the presence of NADPH and UDP-glucuronic acid for 30 min. The reaction mixture was analyzed by liquid chromatography-ion trap mass spectrometer and the chemical structures of hesperetin metabolites were characterzed based on their MS/MS spectra. As a result, a total of five metabolites were detected in rat liver microsomes. The metabolites were identified as a de-methylated metabolite (eriodictyol), two hesperetin glucuronides, and two eriodictyol glucuronides.
Vibrio vulnificus needs various responsive mechanisms to survive and transmit successfully in alternative niches of human and marine environments, and to ensure the acquisition of steady energy supply to facilitate such unique life style. The bacterium had genetic constitution very different from that of Escherichia coli regarding metabolism of glycogen, a major energy reserve. V. vulnificus accumulated more glycogen than other bacteria and at various levels according to culture medium and carbon source supplied in excess. Glycogen was accumulated to the highest level in Luria-Bertani (3.08 mg/mg protein) and heart infusion (4.30 mg/mg protein) complex media supplemented with 1% (w/v) maltodextrin at 3 h into the stationary phase. Regarding effect of carbon source, more glycogen was accumulated when maltodextrin (2.34 mg/mg protein) was added than when glucose or maltose (0.78.1-14 mg/mg protein) was added as an excessive carbon source to M9 minimal medium, suggesting that maltodextrin metabolism might affect glycogen metabolism very closely. These results were supported by the analysis using the malP (encoding a maltodextrin phosphorylase) and malQ (encoding a 4-${\alpha}$-glucanotransferase) mutants, which accumulated much less glycogen than wild type when either glucose or maltodextrin was supplied as an excessive carbon source, but at different levels (3.1-80.3% of wild type glycogen). Therefore, multiple pathways for glycogen metabolism were likely to function in V. vulnificus and that responding to maltodextrin might be more efficient in synthesizing glycogen. All of the glycogen samples from 3 V. vulnificus strains under various conditions showed a narrow side chain length distribution with short chains (G4-G6) as major ones. Not only the comparatively large accumulation volume but also the structure of glycogen in V. vulnificus, compared to other bacteria, may explain durability of the bacterium in external environment.
CodY is a highly conserved protein in low G+C gram-positive bacteria that regulates genes involved in sporulation and stationary-phase adaptation. Bacillus thuringiensis is a grampositive bacterium that forms spores and parasporal crystals during the stationary phase. To our knowledge, the regulatory mechanism of CodY in B. thuringiensis is unknown. To study the function of CodY protein in B. thuringiensis, BMB171codY- was constructed in a BMB171 strain. A shuttle vector containing the ORF of cry1Ac10 was transformed into BMB171 and BMB171codY-, named BMB171cry1Ac and BMB171codY-cry1Ac, respectively. Some morphological and physiological changes of codY mutant BMB171codY-cry1Ac were observed. A comparative proteomic analysis was conducted for both BMB171codY-cry1Ac and BMB171cry1Ac through two-dimensional gel electrophoresis and MALDI-TOF-MS/MS analysis. The results showed that the proteins regulated by CodY are involved in microbial metabolism, including branched-chain amino acid metabolism, carbohydrate metabolism, fatty acid metabolism, and energy metabolism. Furthermore, we found CodY to be involved in sporulation, biosynthesis of poly-β-hydroxybutyrate, growth, genetic competence, and translation. According to the analysis of differentially expressed proteins, and physiological characterization of the codY mutant, we performed bacterial one-hybrid and electrophoretic mobility shift assay experiments and confirmed the direct regulation of genes by CodY, specifically those involved in metabolism of branched-chain amino acids, ribosomal recycling factor FRR, and the late competence protein ComER. Our data establish the foundation for in-depth study of the regulation of CodY in B. thuringiensis, and also offer a potential biocatalyst for functions of CodY in other bacteria.
Purpose: This review aims at introducing 3 modeling approaches classified into 3 categories based on the purpose (estimation or prediction), structure (linear or non-linear) and phase (steady-state or dynamic-state); 1) statistical approaches, 2) kinetic modeling and 3) mechanistic modeling. We hope that this review can be a useful guide in the model-based approach of calcium metabolism as well as illustrates an application of engineering tools in studying biosystems. Background: The meaning of biosystems has been expanded, including agricultural/food system as well as biological systems like genes, cells and metabolisms. This expansion has required a useful tool for assessing the biosystems and modeling has arisen as a method that satisfies the current inquiry. To suit for the flow of the era, examining the system which is a little bit far from the traditional biosystems may be interesting issue, which can enlarge our insights and provide new ideas for prospective biosystem-researches. Herein, calcium metabolic models reviewed as an example of application of modeling approaches into the biosystems. Review: Calcium is an essential nutrient widely involved in animal and human metabolism including bone mineralization and signaling pathways. For this reason, the calcium metabolic system has been studied in various research fields of academia and industries. To study calcium metabolism, model-based system analyses have been utilized according to the purpose, subject characteristics, metabolic sites of interest, and experimental design. Either individual metabolic pathways or a whole homeostasis has been modeled in a number of studies.
In this research, 3-hydroxypyridine(2-HP) metabolic ability of starving Arthrobacter crystallopoietes cell and the effect of humic acid on the metabolism of this starving cell were evaluated. 2-HP metabolic ability of exponential phase cell (acclimated cell) was much higher than that of lag phase cell (unacclimated cell) during starvation period. After 3 days of starvation, 2-HP half-life of the acclimated cell was 14 hours and that of the unacclimated cell was 46.5 hours. Humic acid enhanced the stability of 2-HP monooxygenase of starving co]1 and, after 2 days of starvation, the residual activity rate of this enzyme of the microbial cell starved in humic acid solution was 12% while the rate for control condition was 1.5%. After 14 days of starvation, 2-HP half-life for control condition was 43 hours and that for humic acid condition was 1.25 hour.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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