In order to examine the mechanistic basis for differential sensitivities to chilling and subsequent recovery between two rice (Oryza sativa L.) cutivars, a chilling-tolerant japonica type (Ilpumbyeo) and a chilling-susceptible indica type (Taebaekbyeo), changes of physiological responses and antioxidant enzymes were investigated. Both cultivars at 3 leaf stage were exposed at a low temperature of $5^{\circ}C$ for 3 days and subsequently recovered in a growth chamber at a $25^{\circ}C$ for 5 days with 250 mmol $m^{-2}$$s^{-1}$. Physiological parameters such as leaf fresh weight, relative water content, cellular leakage, lipid peroxidation, and chlorophyll a fluorescence showed that the chilling tolerant cultivar had a high tolerance during chilling. However, the chilling-susceptible cultivar revealed severe chilling damages. The chilling-tolerant cultivar was also faster in recovery than the chilling-susceptible cultivar in all parameters examined. We analyzed the activity and isozyme profiles of four antioxidant enzymes which are: superoxide dismutase (SOD), caltalase (CAT), ascorbate peroxidase (APX), and glutation reductase (GR). We observed that chilling-tolerance was due to a result of the induced or higher antioxidant enzyme system, CAT and APX in leaves and SOD, CAT, APX, and GR in roots. Especially, we observed the most significant differences between the chilling-tolerant cultivar and -susceptible cultivar in CAT and APX activity. Also in isozyme profiles, CAT and APX band intensity in the chilling-tolerant cultivar was distinctively higher than in the chilling-susceptible cultivars during chilling and recovery. Thus, the cold stability of CAT and APX are expected to contribute to a tolerance mechanism of chilling in rice plants. In addition, the antioxidative enzymes activity in roots may be more important than in that of leaves to protect chilling damage on rice plants.
Whereas cationic extracellular peroxidases (PODs) were observed in the suspension cultures of rose (Rosa sp. L. cv Pual's scarlet) grown under normal conditions, new anionic isozymes were induced within 24 hr by the treatment of low host-specific elicitor (10 mg glucan/L media) prepared from yeast cell wall. Prominent anionic (pI 6.1) and cationic POD (pI 8.4) were purified and characterized to understand the physiological role of the enzymes. Both enzymes were purified (ca.200 fold) by the ammonium sulfate precipitation, ion exchange chromate-graphy and gel filtration chromatography. The Km values of the purified anionic POD for ferulic acid and $\textrm{H}_2\textrm{O}_2$ were 4.64 mM and 0.72 mM, whereas those of the cationic POD were 1.38 mM and 0.48 mM, respetively. The activity of the anionic POD as NADH oxidase was twice higher than that of cationic POD. The NADH oxidation in the anionic POD fraction was inhibited by 60% on the addition of 0.1 mM coniferyl alcohol, while that in the cationic fraction was inhibited by 15%.
Biochemical and histological effects of ozone gas (0.3 ppm) on rice plant were discussed. After ozone expoure, damage symptom, percentages of destroyed leaves, activities of peroxidase and polyphenoloxidase, and the contents of flavonoid, protein and sugar were examined on two rice varieties (Seokwangbyeo, Jinjubyeo), on tillering stage, and at different exposure time (0, 1, 3, 5 hr). The result were as followed. 1. The ozone-injured cell adjoining stomata become pigmented red-brown. 2. The percentage of injured leaves in Jinjubyeo was higher than that in Seokwangbyeo. 3. The activities of peroxidase and polyphenoloxidase increased on ozone-injured leaves. 4. The peroxidase activity increased with time in Jinjubyeo compared to Seokwangbyeo. 5. Peroxidase isozyme spectrum was altered after ozone exposure. 6. The content of flavonoid and reducing sugar in the rice leaves was increased, but the contents of protein was reduced.
In this study, hexaconazole 5% SC, an ergosterol biosynthesis inhibitor, was tested on groundnut with its recommended ($500\;mL\;ha^{-1}$) and higher ($2,000\;mL\;ha^{-1}$) concentrations under greenhouse conditions in India. Its influence on biochemical constituents of groundnut plants was assessed apart from its disease management potential against late leaf spot caused by Phaeoisariopsis personata (Berk and Curt). Likewise, leaf samples were collected from hexaconazole 5% SC-sprayed plants at different time intervals. Thereafter, their analyses showed considerable differences in the plant constituents, such as chlorophyll, soluble protein, and total phenol contents and the activity of nitrate reductase enzyme. The induction activity of defense-related enzyme, peroxidase, was also analyzed. However, no difference was observed in the isozymic pattern. Moreover, the ground kernels collected from treated plants also showed no difference in the estimated carbohydrate and other constituents.
Seo, Dong-Jun;Nguyen, Dang-Minh-Chanh;Song, Yong-Su;Jung, Woo-Jin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.22
no.3
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pp.407-415
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2012
An endophytic bacterium, Bacillus thuringiensis GS1, was isolated from bracken (Pteridium aquilinum) and found to have maximal production of chitinase (4.3 units/ml) at 5 days after culture. This study investigated the ability of B. thuringiensis GS1 to induce resistance to Rhizoctonia solani KACC 40111 (RS) in cucumber plants. Chitinase activity was greatest in RS-treated plants at 4 days. ${\beta}$-1,3-Glucanase activity was highest in GS1-treated plants at 5 days. Guaiacol peroxidase (GPOD) activity increased continuously in all treated plants for 5 days. Ascorbate peroxidase (APX) activity in RS-treated plants was increased 1.5-fold compared with the control at 4 days. Polyphenol oxidase (PPO) activity in RS-treated plants was increased 1.5-fold compared with the control at 3 days. At 5 days after treatment, activity staining revealed three bands with chitinase activity (Ch1, Ch2, and Ch3) on SDS-PAGE of cucumber plants treated with GS1+RS, whereas only one band was observed for RS-treated plants (Ch2). One GPOD isozyme (Gp1) was also observed in response to treatment with RS and GS1+RS at 4 days. One APX band (Ap2) was present on the native-PAGE gel of the control, and GS1- and GS1+RS-treated plants at 1 day. PPO bands (Po1 and Po2) from RS- and GS1+RS-treated plants were stronger than in the control and GS1-treated plants upon native-PAGE at 5 days. Taken together, these results indicate that the induction of PR proteins and defense-related enzymes by B. thuringiensis GS1 might have suppressed the damping-off caused by R. solani KACC 40111 in cucumber plants.
This study was aimed for determining the biochemical mechanism of cold tolerance in crops and for searching the biochemical genetic marker related with cold tolerance by the analysis of isozyme pattern. We investigated various biochemical changes induced by the long-term cold acclimation in cold sensitive rape (B. napus) and in cold tolerant 'Sandongchae'(B. campestris) seedlings. The cold shock after long-term cold acclimation to B. napus and B. campestris greatly increased the activities of peroxidase 157% and 50% in root fraction and, 201% and 205% in hypocotyl, respectively. Simultaneously, the activity of superoxide dismutase was largely increased in hypocotyl fraction, too. Protein contents of hypocotyl fractions in B. napus and B. campestris were also increased by 11.4% and 57.8%, respectively. The band of pl 6.4 among peroxidase isozymes newly biosynthesized during long-term cold acclimation was emerged in the hypocotyl fraction of cold tolerant B. campestris as well as in the root of both species. From above and previous results, we presented a model of interconversions of molecular oxygen species due to the cold injury and biochemically inferred the mechanism of cold tolerance in crops.
To determine whether antioxidant enzyme systems are related to chilling tolerance, changes of antioxidant enzyme activities during the chilling stress were determined in the leaves of a chilling-tolerant cultivar (Cucurbita ficifolia, cv. Heukjong) and a chilling-sensitive cultivar (Cucurbita moschata, cv. Jaerae 13). Leaves of chilling-tolerant plant have two major isoforms, Fe-SOD and Mn-SOD, at the Rm values of 0.20 and 0.52, respectively. In leaves of chilling-sensitive plant, two major isozymes of SOD was observed, one isoform is Mn-SOD at the Rm value of 0.20, and the other isoform is Cu/zn-SOD at the nm value of 0.58. When plants were treated with chilling stress, Cu/zn-SOD at the Rm value of 0.58 was newly expressed at 10 days after chilling stress in the chilling-tolerant plants, and density of this band increased at five days after chilling stress in the chilling-sensitive plants. One APX isozyme band was observed in unstressed plants of both cultivars. Under the chilling stress one APX isozyme band was newly expressed at 10 days after chilling stress in the chilling-tolerant cultivar. Significant genotype differences were observed fnr POD isozyme banding patterns such as few main isozyme bands in chilling-tolerant plants, and one band in chilling-sensitive plants. Densities of three POD isozyme bands at the Rm of 0.36, 0.40 and 0.54 increased at 10 days after chilling stress in the chilling-tolerant plants, while two bands at the nm of 0.36 and 0.54 increased at 10 days and 20 days after chilling stress in the chilling-sensitive plants, respectively. Activities of SOD, APX and POD significantly increased during five days after chilling stress in both cultivars. In the chilling-tolerant cultivar, activities of these enzymes were higher in chilling-stressed plant than in unstressed plants. However, activities of these enzymes in the chilling-sensitive cultivar decreased rapidly after five days of chilling stress, and were lower in chilling stressed plants than in unstressed plants.
To classify fungal species employed for pharmacological effects, mycelial proteins of six isolates of Ganoderma lucidum, five isolates of Schizophyllum commune and five isolates of Cordyceps spp. were separated on polyacrylamide gel to compare them by esterase, acid phosphatase, leucine aminopeptidase and peroxidase patterns. Similarity of isozyme patterns among the isolates of G. lucidum IY003, IY004, IY005 and IY008 was indicated over 70%, but that among the isolates of G. lucidum IY009, IY010 and others was indicated from 48% to 9%. Highest similarity of isozymes of S. commune was observed to be between IY803 and IY805, and similarity between these two isolates was 57%. Similarity among other isolates was shown to be from 40% to 56%. Isozyme patterns of Cordyceps spp. were comparatively different, even though they were originated from the same kind of insect as their isolate. Similarity between Cordyceps spp. IY901 and IY904, which was isolated from moths, was 67% and that of IY905 and IY909, which was originated from the larvae, was 42%. Similarity among other isolates was shown to be from 12% to 67%.
Park, Min-Hee;Jang, Hyun-Kyu;Cha, Young-Ju;Kim, Ho-Bun;Lee, Sook-Young
Plant Resources
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v.5
no.1
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pp.29-44
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2002
In this study, plant regeneration through in vitro culture from plantlet stems of Yooja (C. junos Sieb.) and trifoliate orange (P. trifoliata Rafin.) was attempted to make mass-production system of virus-free plants having the same genotype with mother plant. In order to investigate physiological change depending on the developmental stage of plant regeneration, the changes of total protein, peroxidase and esterase activity and their isozyme patterns as well were examined in 1/2 MS medium. The results are as follows : 1. The MS medium for the optimal callus induction and shoot formation was utilized. The medium was supplemented either with 2,4-D and Kinetin or with BA and NAA. The optimal concentrations were the combination of 1.0mg/ 2,4-D +0.3mg/ Kinetin and 1.0mg BA +0.3mg NAA in callus induction and shoot formation, respectively. 2. For the plant regeneration from somatic embryos, 1/2 MS medium was used with supplements of growth regulators (free, 1.0mg/ IBA +1.0mg/ BA ,0.5mg/ IBA +0.5mg/ BA). Shooting and rooting were the best in the treatment of 0.5mg/ IBA and 0.5mg/ BA combination. 3. The total protein content has a tendency of increase with the developmental stage of embryo, but it was decreased at the plantlet. Also it was the highest at 8 and 6 weeks stage in C. junos Sieb. and P. trioliata Rafin, respectively. In the SDS-PAGE pattern of protein, C. junos Sieb. showed bands of 29.0 and 40kDa at 10 weeks. The 45,66 and 97.4 kDa bands at 10 weeks of culture were shown in P. trifoliata Rafin. 4. The highest esterase activity was shown at the 6 and 8 weeks of culture in C.junos Sieb. and P. trifoliata Rafin.., respectively. 5. Esterase isozyme patterns were shown difference according to the developmental stage. In C. junos Sieb. a new band was observed at pl 7.7 following 4 weeks culture. On the other hand, new bands in P. trifoliata Rafin. were observed at pl 7.5~6.5 following 4 and 6 weeks culture, respectively.
This experiment was conducted to study the effect of soil water potenial on the growth and internal changes of stressed plants. The experimental imposition of soil water potential ( $\Psi$soil) were -0.1 to -0.2, -0.2 to -0.5, -0.5 to -3.0, -3.0 to -10.0 bar respectively. During water stress all growth rates were depressed, and the most sensitive period to water stress was found to be 10 to 25 days after transplanting. The water potential of leaf was declined rapidly within 12 hours after with holding of water. Nitrate reductase activity was decreased progressively as water deficit was built up in tobacco leaves, but the activity of alpha- amylase and super contents were increased. There were differences in peroxidase isozyme patterns between tile control and water stressed plant. New isozymes started to appear as tobacco leaf water potential decreased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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