New lectins have been isolated and purified from mung bean (Phaseolus radiatus) through physiological saline extraction, ammonium sulfate salt fractionation and column chromatographies. Ion exchanger were eluted by linear salt gradient and then further purified through gel filtration. Thus obtained lectin named as MBL. The gene expressions of 5 cytokines (IL-1, IL-2, IL-6, $TNF-{\aphpa}$ and $IFN-{\gamma}$) from human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) stimulated with MBL were investigated by using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). PBMC ($1{\times}106$ cells/ml) isolated from healthy volunteers were stimulated with lectins (4 mg/ml) for various time intervals (1 to 96 hrs). After each of the various stimulated times, total RNA was isolated and assessed for different cytokines mRNA by RT-PCR. The mRNA encoding IL-1, IL-2 were detected continuously from 1 to 20 hrs, and IL-6 was detected up to 24 hrs. But the mRNA encoding $IFN-{\gamma}$ and $TNF-{\alpha}$ were detected to 8 hours only and showed short time response compared with other cytokines. The significant expression of all cytokines mRNA were observed at 4 hrs. These results suggested that MBL, as inducer of cytokines could elicit detectable cytokine mRNA from PBMC.
Breast cancer is the most common cancer among females worldwide and a most prevalent malignancy in Iranian women. Chronic stress may make an important contribution to cancer, especially in the breast. Numerous studies showed roles of neurotransmitters in the occurrence and progression of cancers which are mediated by their various types of receptors. This study was conducted to evaluate alterations in the expression profile of dopamine receptor genes in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) as stress factors in breast cancer patients and the human breast cancer cell line (MCF-7). Peripheral blood samples were obtained from 30 patients and 30 healthy individuals. Total mRNA was extracted from PBMC and MCF-7 cells and RT-PCR was performed to confirm the presence of five dopamine receptors (DRD1-DRD5). Expression changes of dopamine receptor genes were evaluated by real time PCR. We observed that DRD2-DRD4 in PBMCs of breast cancer patients were increased compared to healthy individuals. In addition, all dopamine receptor subtypes but DRD1 were expressed in MCF-7 cells. Therefore, alterations of these receptors as stress factors should be assessed for selecting appropriate drugs such as D2-like agonists for treatment of breast cancer after performing complimentary tests. Determining the expression profile of dopamine receptor genes thus seems promising.
Atopic dermatitis (AD) is a chronic inflammatory skin disease that induces changes in various inflammatory skin cells. The prevalence of AD is as high as 18% in some regions of the world, and is steadily rising. However, the pathophysiology of AD is poorly understood. To identify the proteins involved in AD pathogenesis, a comparative proteomic analysis of protein expression in peripheral blood mononuclear cells isolated from AD patients and healthy donors was conducted. Significant changes were observed in the expressions of fourteen proteins, including the vinculin, PITPNB, and Filamin A proteins. Among the proteins, $\alpha$-SNAP and FLNA decreased significantly, and PITPNB increased significantly in AD patients compared with control subjects; these findings were further confirmed by real-time PCR and Western blot analysis. The comparative proteome data may provide a valuable clue to further understand AD pathogenesis, and several differentially regulated proteins may be used as biomarkers for diagnosis and as target proteins for the development of novel drugs.
Quercetin, a flavonoid found in fruits and vegetables, exhibits a strong anti-inflammatory activity. The objective of this study was to examine the effect of quercetin on chemotactic activity of peripheral blood polymorphonuclear cells (PMNs) to culture supernatant from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) stimulated with lipopolysaccharide (LPS). In addition, we determined whether this effect is related to interleukin (IL)-8 and changes in cytoskeleton. The chemotactic activity of PMNs was evaluated by a modified Boyden chamber assay. Total cellular filamentous (F)-actin levels were measured by method of fluorescence microscopy. The levels of IL-8 mRNA and protein were measured by real time polymerase reaction method and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. Quercetin (0-50 µM) itself has no chemoattractant effect for PMNs. The culture supernatant from PBMCs (2 × 106 cells/mL) treated with LPS (1 ㎍/mL) showed remarkable increase in chemotaxis of PMNs. However, this effect was reduced dose-dependently by treatment with quercetin. In addition, PBMCs treated with LPS revealed enhanced levels in IL-8 protein and mRNA. Co-treatment of LPS with quercetin (50 µM) in PBMCs decreased IL-8 production and expression. Treatment of quercetin (0-50 µM) on PMNs to rpIL-8 (10 nM) decreased dose-dependently the chemotactic activity of PMNs. Treatment of quercetin on PMNs to IL-8 also reduced their total cellular F-actin level. These results suggested that quercetin attenuates chemotactic activity of PMNs, which is mediated by down-regulation of IL-8 production from LPS-stimulated PBMCs and inhibition of F-actin polymerization in PMNs.
Journal of The Korean Society of Clinical Toxicology
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v.6
no.1
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pp.37-41
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2008
Methemoglobinemia can be caused by dapsone toxicity. We report a case dapsone induced methemoglobinemia unresponsive to methylene blue successfully treated by exchange transfusion. A 52-year-old male ingested a handful of dapsone. He presented with severe peripheral cyanosis in lips and fingertips and his methemoglobin level was found to be 21.9%. After admission, methylene blue (1%) at 1 mg/kg was injected each time peripheral cyanosis and rising serum methemoglobin occurred. Despite methylene blue therapy, the patient‘s methemoglobin level continued to fluctuate. Five days after the injections of methylene blue, many Heinz bodies were visualized in the peripheral blood, suggestive of hemolytic anemia occurrence. By hospital day 6, serum methemoglobine levels were elevated and not measurable (> 50%) and the patient was constantly in a semi-comatose mental state. An exchange transfusion carried out by utilizing 6 units of packed red blood cells and 4 units of fresh frozen plasma was performed. The patient's methemoglobin levels were subsequently kept up below 20% and his peripheral cyanosis receded. Physicians should recognize the important role of exchange transfusion in refractory dapsoneinduced methemoglobinemia.
To establish the effective ways to prevent bovine mastitis, the study has been performed to investigate the attributable factors causing down-regulation of immune responses in mammary gland of non-lactating cows. Lymphocytes from peripheral blood and mammary gland secretions(MGS) were obtained from normal healthy cows and mastitic cows, respectively. Lymphoblastogenesis were investigated carefully by adding different concentrations of supernatants collected from pure-cultures of neutrophils seperated from peripheral blood and MGS, respectively. The results obtained are as follows ; 1. Lymphoblastogenesis activity stimulated by Con A, PWM and PHA were significantly reduced in MGS from mastitic cows. 2. Supernatants collected from pure-culture of neutrophils separated both from peripheral blood and MGS showed inhibitory effect on mitogenic lymphoblastogenesis. 3. Supernatants from mammary gland neutrophils have shown 7 times more inhibitory activity than those from peripheral blood and this inhibitory effect was increased in proportion to increasing concentrations of supernatants when those were added to lymphoblast cells in culture.
To establish the effective ways to prevent bovine mastitis, the study has been performed to investigate the attributable factors causing down-regulation of immune responses in mammary gland of non-lactating cows. Lymphocytes from peripheral blood and mammary gland secretions(MGS) were obtained from normal healthy cows and mastitic cows, respectively. Cellular immune responses were examined by comparison of proportion of lymphocyte subpopulations using a set of monoclonal antibodies and flow cytometry. The results obtained are as follows. 1. Proportions of peripheral blood lymphocyte subpopulations expressing BoCD2 and BoCD4 molecules were 32.9%, 15.4% in mastitic cows and 43.3%, 28.3% in normal healthy cows, respectively. The ratios of BoCD4 to BoCD8 were 0.76 and 1.47, respectively. 2. Proportions of mammary gland lymphocyte subpopulations expressing BoCD2 and BoCD4 molecules were 18.5%, 8.3% in mastitic cows and 38.2%, 14.2% in normal healthy cows, respectively. The ratios of BoCD4 to BoCD8 were 0.6 and 2.0, respectively. 3. Proportions of T lymphocyte subpopulations from MGS were significantly lower than those from peripheral blood both in mastitic cows and normal healthy cows. However, lymphocyte subpopulations expressing ACT2 and ACT3, which represent activated T suppressor cells, were significantly higher in MGS than those in peripheral blood.
The aqueous extract of fresh ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) contains a macromolecular fraction that showed mitogenic and comitogenic activities in human peripheral blood Iymphocytes. Purification of the crude extract by size (ultrafiltration, Sephadex G-200) and charge (DEAE-cellulose. DEAE-Sepharose) yielded a semi-purified fraction (DS-3). This fraction contains at least three subgroups of anionic macromolecules with apparent molecular weight greater than 600 kilodaltons. It is a glycoprotein with a large amount of glucuronic acid. It acts as a mitogen in both T and B cells of human peripheral blood lymphocytes. It could also potentiate the mitogenic action of Concanavalin A in Iymphocyte T cells. Such potentiation is not due to increased binding of Concanavalin A to the cell surface. Its mitogenic and co-mitogenic effects do depend on the presence of extracellular Ca2+.
Immune checkpoint blockade targeting PD-1 and PD-L1 has resulted in unprecedented clinical benefit for cancer patients. Anti-PD-1/PD-L1 therapy has become the standard treatment for diverse cancer types as monotherapy or in combination with other anticancer therapies, and its indications are expanding. However, many patients do not benefit from anti-PD-1/PD-L1 therapy due to primary and/or acquired resistance, which is a major obstacle to broadening the clinical applicability of anti-PD-1/PD-L1 therapy. In addition, hyperprogressive disease, an acceleration of tumor growth following anti-PD-1/PD-L1 therapy, has been proposed as a new response pattern associated with deleterious prognosis. Anti-PD-1/PD-L1 therapy can also cause a unique pattern of adverse events termed immune-related adverse events, sometimes leading to treatment discontinuation and fatal outcomes. Investigations have been carried out to predict and monitor treatment outcomes using peripheral blood as an alternative to tissue biopsy. This review summarizes recent studies utilizing peripheral blood immune cells to predict various outcomes in cancer patients treated with anti-PD-1/PD-L1 therapy.
In this study, the micronucleus test with peripheral blood using acridine orange coated slides was evaluated in mice treated with mitomycin C(MMC) at doses of 0.5, 1.0 and 1.5 mg/kg body weight. The peripheral bloods were obtained at 0, 24, 48 and 72h after treatment. The frequencies of micronucleated reficulocytes(MNRET) in the MMC-treated groups increased dose-dependently, and showed a peak time at 48h after treatment. We also performed the sex differences of MNRET frequency in 0.5 mg/kg MMC treated group, and we observed no sex differences in this experiment. And we evaluated the usefulness of a direct acting clastogen, N-methyl-N-nitrosourea and a indirect acting clastogen, benzo(a) pyrene as the positive control in this supravital micronucleus test. They also caused a significant increase in MNRET frequencies. These results suggest that the supravital staining micronucleus test using MNRET can be useful tool to evalulate the quantitative and qualitative assessment of genotoxicity in vivo compared to classical in vivo micronucleus test using bone-marrow cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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