Luteolin (LUT), a bioflavonoid has been used as a chemopreventive agent world-wide against chemically induced cancer. Hence we designed an experiment to assess chemopreventive action of LUT on lipid peroxidation (LPO) and glycoconjugates in azoxymethane (AOM)-induced colon carcinogenesis. Colon cancer was induced by 15 mg/body kg. body weight of AOM and administration of LUT (at the dose of 1.2 mg/kg. body weight) was till end of the study. Analysis of lipid peroxidative end products such as protein carbonyl (PC), malonadehyde (MDA) and conjucated dienes (CD) demonstrated significant increase in in AOM-induced animals with reduction by LUT (p<0.05). Increased levels of glycoconjugates such as hexose, hexosamine, sialic acid, fucose and mucoprotein were analyzed in serum and colon tissues examined histopathologically by periodic acid Schiff's (PAS) staining were also reversed by LUT l(p<0.05). The secondary marker of colon cancer mucin depleted foci (MDF) was assessed in control and experimental group of animals. A characteristic increase of MDF was observed in AOM-induced colon cancer animals. Treatment with LUT decreased the incidence of MDF. These results suggest that LUT alters the expression of glycoconjugates and suppress colon cancer. Hence, we speculate that LUT can be used as a chemopreventive agent to treat colon cancer.
Lee, Jong Hoon;Lee, Kuk Han;Kim, Min Ho;Kim, Jun Pyo;Lee, Seung Jae;Yoon, Jinah
Archives of Plastic Surgery
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제39권6호
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pp.593-599
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2012
Background This study aimed to investigate the possibility of isolating mesenchymal stem cells (MSCs) from human thigh adipose tissue and the ability of human thigh adipose stem cells (HTASCs) to differentiate into hepatocytes. Methods The adipose-derived stem cells (ADSCs) were isolated from thigh adipose tissue. Growth factors, cytokines, and hormones were added to the collagen coated dishes to induce the undifferentiated HTASCs to differentiate into hepatocyte-like cells. To confirm the experimental results, the expression of hepatocyte-specific markers on undifferentiated and differentiated HTASCs was analyzed using reverse transcription polymerase chain reaction and immunocytochemical staining. Differentiation efficiency was evaluated using functional tests such as periodic acid schiff (PAS) staining and detection of the albumin secretion level using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results The majority of the undifferentiated HTASCs were changed into a more polygonal shape showing tight interactions between the cells. The differentiated HTASCs up-regulated mRNA of hepatocyte markers. Immunocytochemical analysis showed that they were intensely stained with anti-albumin antibody compared with undifferentiated HTASCs. PAS staining showed that HTASCs submitted to the hepatocyte differentiation protocol were able to more specifically store glycogen than undifferentiated HTASCs, displaying a purple color in the cytoplasm of the differentiated HTASCs. ELISA analyses showed that differentiated HTASCs could secrete albumin, which is one of the hepatocyte markers. Conclusions MSCs were islolated from human thigh adipose tissue differentiate to heapatocytes. The source of ADSCs is not only abundant abdominal adipose tissue, but also thigh adipose tissue for cell therapy in liver regeneration and tissue regeneration.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Chronic renal failure (CRF) is a complex pathological condition that lacks a cure. Certain Chinese medicines, such as melittin, a major component in bee venom, have shown efficacy in treating CRF patients. On the other hand, the mechanisms underlying the therapeutic effects of melittin are unclear. MATERIALS/METHODS: A 5/6 nephrectomy model (5/6 Nx) of renal failure was established on rats for in vivo assays, and mouse podocyte clone 5 (MPC5) mouse podocyte cells were treated with angiotensin II (AngII) to establish an in vitro podocyte damage model. The 24-h urine protein, serum creatinine, and blood urea nitrogen levels were evaluated after one, 2, and 4 weeks. Hematoxylin and eosin staining, Masson staining, and periodic acid-Schiff staining were used to examine the pathological changes in kidney tissues. A cell counting kit 8 assay was used to assess the cell viability. Reverse transcription polymerase chain reaction and Western blot were used to assess the mRNA and protein levels in the cells, respectively. RESULTS: In the rat 5/6 Nx, melittin reduced the 24-h urinary protein excretion and the serum creatinine and blood urea nitrogen levels. Furthermore, the renal pathology was improved in the melittin-treated 5/6 Nx rats. Melittin promoted podocin, nephrin, Beclin 1, and the LC3II/LC3I ratio and inhibited phosphorylated mammalian target of rapamycin (mTOR)/mTOR in 5/6 Nx-induced rats and AngII-induced MPC5 mouse podocyte cells. Moreover, inhibiting autophagy with 3-MA weakened the effects of melittin on podocin, nephrin, and the LC3II/LC3I ratio in podocytes. CONCLUSION: Melittin may offer protection against kidney injury, probably by regulating podocyte autophagy. These results provide the theoretical basis for applying melittin in CRF therapy.
This study aimed to find out suitable culture conditions for the differentiation of human amniotic membrane-derived stem cells(HAM) into hepatocyte-like cells. Almost homogenous population of fibroblast-like cells was successfully isolated from the amniotic membrane. In comparison to the non-coated plates and in the absence of insulin/transferrin/selenium(ITS), HAM cultured on the fibronectin-coated plates and in the presence of ITS showed the more intense immunocytochemical staining against the albumin. Addition of both fibroblast growth factor(FGF)-1 and -2 to the differentiation medium gave stronger staining compared to the treatment with FGF-1 or -2 alone. Periodic acid Schiff's base staining of glycogen and morphological turnover of fibroblast-like appearance of HAM into round shape matched the results of immunocytochemical studies. When the efficiency of two-step culture method was examined on the differentiation of HAM into hepatocyte-like cells, all of the results of immunocytochemical staining, periodic acid Schiff's staining and morphological change exhibited effective hepatic differentiation of HAM compared to the continuous culture method. Immunoblot analyses of HAM- conditioned media against the albumin showed that the culture of HAM in the presence of both ITS and fibronectin always gave a stronger staining intensity than those in the absence of them, and that the addition of ether mixture of FGF-4 and either FGF-2 or transforming growth $factor(TGF)-{\alpha}$ to the culture medium significantly enhanced the albumin secretion by HAM. Based on these observations, it is suggested that HAM could differentiate into hepatocyte-like cells under a culture condition consisting of fibronectin and ITS, and addition of FGF-4 with either one of FGF-2 or $TGF-{\alpha}$ could enhance the hepatic differentiation of HAM.
The presence of sialoglycoproteins (SGPs) in the membranes from goat (Capra aegagrus hircus), buffalo (Bubalus bubalis bubalis) and pig (Sus scrofa domestica) erythrocytes was investigated by partial purification with a chloroform-methanol extraction method followed by Sodium dodecyl sulphate - Polyacrylamide gel electrophoresis in comparison to human (Homo sapiens) erythrocytes. The results show that mammalian erythrocytes possess clear differences in the SGPs numbers and molecular weights although all animals studied in this experiment are from the same class i.e. mammalia. The SGPs number in human, goat, buffalo and pig are four (PAS-1 to PAS-4), ten (PAS-GI to PAS-GX), seven (PAS-BI to PAS-BVII) and four (PAS-PI to PAS-IV) respectively as indicated by staining the polyacrylamide gel with sialoglycoprotein-specific Periodic acid-Schiff's (PAS) stain. The new SGPs could be observed only after the partial purification of membrane fractions named as PAS-HI with molecular weight (Mr) 190 kDa and PAS-HII 150 kDa in human, PAS-BIA in buffalo and PAS-PIA and PAS-PIVA in pig. The gels were also stained with Coomassie brilliant blue (CBB) and Silver stain to check the contamination of other membrane proteins in the purified fractions. The quantitative distribution of SGPs was also determined by densitometry. Present study indicates that there are some basic differences in mammalian erythrocyte membrane SGPs, especially with respect to their number and molecular weights indicating major structural variations.
Sprague-Dawley rats received subcutaneous injections of gentamicin sulfate, 50 and 100mg/kg for 3, 7 and 10 days. The hematological and blood chemical values were determined. Kidneys were examined histologically and ultrastructurally. The results obtained were summarized as follows; 1. The serum values of aspartate transaminase, blood urea nitrogen and creatinine in the rats administered gentamicin, 50 and 100mg/kg/day were significantly increased than those in the control. 2. The ratio of kidney weight to body weight was significantly increased in the rats injected gentamicin, 100mg/kg for 10 days than those in the control. 3. The brush borders of proximal convoluted tubules in the kindneys received gentamicin, 50 and 100mg/kg/day were decreased or absent in periodic acid-Schiff staining. 4. The necrosis of proximal convoluted tubules was shown in the rats given gentamicin, 50 and 100mg/kg for 7 and 10 days. 5. The regeneration of the proximal tubular epithelia was observed in the rats treated gentamicin, 100mg/kg for 10 days. 6. The number and size of lysosomes were increased in the proximal convoluted tubules of the rats injected gentamicin, 50mg/kg for 7 days, many of which contained myeloid bodies.
Mucosal surface of the trachea and larynx is protected by several complex defense mechanism, namely mucociliary clearance, immunoglobulin, antibacterial secretory enzyme, which have also been demonstrated in the middle ear mucosa and eustachian tube. The morphologgy of secretory glands and cells of the trachea and larynx is well-known, but knowledge concerning their development related to secretory activity is still sketchy. The secretory element of the murine trachea and larynx, aging from gestational day 16 to postnatal day 21, was studied using hematoxylin & eosin and alcian blue/periodic acid-Schiff staining including lysozyme immunohistochemistry to investigate the development of secretory element of the murine trachea and larynx and to provide with basis of the future study for developmental morphology of the trachea and larynx. The results of this study suggest that the secretory activity starts to be established immediately after birth with the aeration of the lung.
Objectives : This study was performed to investigate the anti-diabetic effect of the fruit extract of Lycium chinense Mill(Lycii Fructus, LF) on multiple low-dose streptozotocin-induced diabetic rats.Methods : Male Sprague-Dawley rats were divided into three groups; normal, STZ-control, Lycii Fructus extractorally administrated 300 ㎎/㎏ group (STZ-LF). Diabetes was induced in rats by consecutive injection of streptozotocin (STZ) at doses of 30 ㎎/㎏ for 5 days. After 4 weeks, all rats were sacrificed, Fasting blood glucose, total cholesterol (CHO), triglyceride (TG) and HDL-Cholesterol were measured in sera of rats. Histopathological changes of pancreas, kidney, liver and lung tissues were observed by microscope after H&E, Periodic acid-Schiff (PAS) and Masson's trichrome staining. The changes of body weight, blood glucose, and food and water intake were also measured.Results : There were no differences in body, food intake and water intake in LF-administrated groups compared with STZ control group. However, LF extract significantly decreased the levels of serum glucose, CHO, TG and HDL-Cholesterol in diabetic rats. In histopathological analysis of kidney, liver and lung, LF-administrated groups showed the inhibition of morphological damage.Conclusions : These results suggest that LF have a biological action on multi low-dose STZ-induced diabetes in rats via decreasing the serum glucose, TG and TG levels and may protect the morphological changes of kidney, liver and lung.
Mucoepidermoid carcinoma (MEC) is the most common malignant neoplasm of the salivary gland, but primary thyroid MEC has rarely been reported and usually has a good prognosis. Herein, I report a case of thyroidal MEC with a poor prognosis in an 82-year-old woman with an anterior neck mass. Ultrasonography and computed tomography revealed a thyroid mass. The patient initially underwent fine-needle aspiration, was diagnosed with malignancy, and underwent a right lobectomy. On gross examination, a 4.0×3.6×2.6 cm-sized ill-defined, unencapsulated, and infiltrative tan to whitish mass with necrosis was identified. Microscopically, epidermoid tumor cell nests or solid sheets were identified. Mucous cells that were positive for periodic acid-Schiff and mucicarmine stains were also identified within epidermoid cell nests. Frequent mitosis and necrosis were observed. Immunohistochemical staining for p40 and p63 was positive, and that for thyroid transcription factor-1 and paired box gene 8 was focally positive. According to the Armed Forces Institute of Pathology grading system for salivary gland MEC, the current case was classified as high-grade MEC. After surgery, the patient suffered from dyspnea due to a remnant neck mass that compressed and obstructed the trachea; therefore, the patient refused further treatment. Thyroidal MECs are considered low-grade with a favorable prognosis, but there are several reported cases of thyroidal MEC with poor prognosis. The current case is a rare presentation of high-grade thyroidal MEC with a poor prognosis.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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제33권2호
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pp.318-323
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2004
This study has been carried out to investigate the effect of the beverage contained Radix puerariae (15%) and Bambusae caules in Liquamen Phyllostachyos (1%) on the alcohol administered mouse. The control group was treated with alcohol (40% alcohol, 8.0 mL/kg of body weight), experimental group 1 (Exp.1) was administered with beverage (8.0 mL/kg of body weight) before alcohol treatment, and experimental group 2 (Exp.2) was administered with beverage after alcohol treatment. Blood alcohol concentrations were decreased by 11% (in Exp. 1) and 17% (in Exp. 2) compared with control group. The concentrations of serum aspartate aminotransferase (AST) were slightly increased in Exp. 1 and Exp.2, but alanine aminotransferase (ALT) levels were not changed compared with control group. Mn-Superoxide dismutase activity was increased by about 70% in the experimental groups in comparison to control group. The Exp. 1 and Exp. 2 contained more periodic-acid Schiff (PAS)-positive materials than the control group. Electron microscopical observations showed that, cell organelles of hepatocytes were more disoriented in the control group than in Exp. 1 and Exp. 2. These results suggest that the beverage contained Radix puerariae and Bambusae caules in Liquamen Fhyllostachyos is a safe and effective therapeutic agent for alcohol abuse.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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